Кислотостойкость
Кислотостойкость — это физическое свойство некоторых бактериальных и эукариотических клеток , а также некоторых субклеточных структур , в частности их устойчивость к обесцвечиванию кислотами во время лабораторных процедур окрашивания . [1] [2] После окрашивания в составе образца эти организмы могут противостоять процедурам обесцвечивания кислотой и/или этанолом, обычным во многих протоколах окрашивания, отсюда и название « кислотностойкие» . [2]
Механизмы кислотоустойчивости варьируются в зависимости от вида, хотя наиболее известный пример относится к роду Mycobacterium , который включает виды, ответственные за туберкулез и проказу . Кислотоустойчивость микобактерий обусловлена высоким содержанием миколевой кислоты в их клеточных стенках , что отвечает за характер окрашивания с плохой абсорбцией и последующим высоким удерживанием. Некоторые бактерии также могут быть частично кислотоустойчивыми, например Nocardia .
Кислотоустойчивые организмы трудно охарактеризовать с помощью стандартных микробиологических методов, хотя их можно окрашивать концентрированными красителями, особенно когда процесс окрашивания сочетается с нагреванием. Некоторые бактерии, такие как Mycobacteria , можно окрасить красителем по Граму , но они плохо воспринимают кристаллический фиолетовый и поэтому кажутся светло-фиолетовыми, что потенциально может привести к неправильной идентификации грамотрицательных бактерий. [3]
Наиболее распространенным методом окрашивания, используемым для идентификации кислотоустойчивых бактерий, является окрашивание по Цилю-Нильсену , при котором кислотоустойчивые виды окрашиваются в ярко-красный цвет и четко выделяются на синем фоне. Другой метод — метод Киньюна , при котором бактерии окрашиваются в ярко-красный цвет и четко выделяются на зеленом фоне. Кислотоустойчивые микобактерии также можно визуализировать с помощью флуоресцентной микроскопии с использованием специальных флуоресцентных красителей ( окраска аурамин-родамином ). например, [4]
Некоторые методы кислотостойкого окрашивания
[ редактировать ]- Окрашивание по Цилю-Нильсену (классический и модифицированный отбеливатель) [5]
- Пятно Киньюна
- Для людей с цветовой слепотой (или в условиях, когда обнаружение красных бактерий затруднено), синим Виктории можно заменить карболфуксин , а можно использовать пикриновую кислоту в качестве встречного окрашивания вместо метиленового синего , а также можно использовать остальную часть метода Киньюна. [6]
- Различные методы окрашивания бактериальных спор с использованием Кеньона, например.
- метод Меллера
- Метод Дорнера [7] (кислотно-спиртовой обесцвечиватель) без Шеффера-Фултона [8] модификация (обесцвечивание водой) [9]
- Моющий метод с использованием Тергитола 7, неионогенных полигликолевых эфирных ПАВ типа НП-7. [10]
- Различные методы окрашивания бактериальных спор с использованием Кеньона, например.
- Файт пятно [11]
- Пятно Эллиса и Заброварного [15] [16] (без фенола/карболовой кислоты)
- Окраска аурамин-родамином
- Окрашивание фенолом аурамина
Известные кислотостойкие структуры
[ редактировать ]Очень немногие структуры являются кислотостойкими; это делает окрашивание на кислотоустойчивость особенно полезным в диагностике. Ниже приведены яркие примеры кислотоустойчивых или модифицированных кислотоустойчивых структур:
- Все микобактерии – M.tuberculosis , M.leprae , M.smegmatis и атипичные микобактерии.
- Актиномицеты (особенно некоторые аэробные) с миколовой кислотой в клеточной стенке (обратите внимание, что у стрептомицетов ее НЕТ); не путать с Actinomyces , некислотоустойчивым родом актиномицетов.
- Нокардия (слабокислотоустойчивая; сопротивляется обесцвечиванию при более слабых концентрациях кислоты)
- Родококк
- Гордония (актиномицет)
- Цукамурелла
- Диета
- Головка спермы
- Бактериальные споры, см. Эндоспора.
- Легионелла Микдадей
- Определенные клеточные включения, например
- Цитоплазматические тельца включения наблюдаются в
- Нейроны в слое 5 нейронального цероидного липофусциноза коры головного мозга ( болезнь Баттена ).
- Тельца ядерного включения, наблюдаемые в
- Отравление свинцом
- Отравление висмутом.
- Цитоплазматические тельца включения наблюдаются в
- Ооцисты некоторых кокцидийных паразитов в фекалиях, таких как:
- Еще несколько паразитов:
- Саркоцистис
- Яйца Taenia saginata хорошо окрашиваются, а яйца Taenia solium нет (можно использовать для различения)
- Гидатидные кисты , особенно их « крючки », окрашиваются красителем ZN неравномерно, но излучают ярко-красную флуоресценцию под зеленым светом и могут помочь в обнаружении на умеренно тяжелом фоне или с редкими крючками. [20]
- Грибковые дрожжевые формы непостоянно окрашиваются кислотостойким красителем, который считается красителем узкого спектра для грибов. [21] В исследовании кислотостойкости грибов [22] 60% бластомицетов и 47% гистоплазмы показали положительное цитоплазматическое окрашивание дрожжеподобных клеток, а Cryptococcus или Candida не окрашивались, а очень редкое окрашивание наблюдалось в эндоспорах Coccidioides.
Ссылки
[ редактировать ]- ^ Мэдисон Б (2001). «Применение красителей в клинической микробиологии». Биотех Гистохим . 76 (3): 119–25. дои : 10.1080/714028138 . ПМИД 11475314 .
- ↑ Перейти обратно: Перейти обратно: а б Райан К.Дж.; Рэй К.Г., ред. (2004). Медицинская микробиология Шерриса (4-е изд.). МакГроу Хилл. ISBN 0-8385-8529-9 .
- ^ Рейнольдс, Джеки; Мойес, Рита Б.; Брейкуэлл, Дональд П. (ноябрь 2009 г.). «Дифференциальное окрашивание бактерий: кислотоустойчивое окрашивание». Современные протоколы в микробиологии . Приложение 3: Приложение 3H. дои : 10.1002/9780471729259.mca03hs15 . ISSN 1934-8533 . ПМИД 19885935 . S2CID 45685776 .
- ^ Абэ С. (2003). «[Стандартизация лабораторных исследований на туберкулез и проверка их квалификации]». Кеккаку . 78 (8): 541–51. ПМИД 14509226 .
- ^ «Кислотоустойчивый/Аурамин-родамин» . Pathologyoutlines.com .
- ^ Теория и практика гистологических методов, Джон Д. Бэнкрофт, 6-е изд., стр. 314.
- ^ Дорнер, В. 1926. Простой процесс окрашивания спор. Молоко 6:8–12.
- ^ Шеффер А.Б., Фултон М. (1933). «Упрощенный метод окрашивания эндоспор». Наука . 77 (1990): 194. Бибкод : 1933Sci....77..194S . дои : 10.1126/science.77.1990.194 . ПМИД 17741261 .
- ^ «Протокол окрашивания эндоспор» . 1 июня 2012 года. Архивировано из оригинала 1 июня 2012 года . Проверено 7 марта 2022 г.
- ^ М. Хаяма; К. Оана; Т. Козакай; С. Умеда; Дж. Фудзимото; Х. Ота; Ю. Каваками (2007). «ПРЕДЛОЖЕНИЕ УПРОЩЕННОЙ МЕТОДИКИ ОКРАШИВАНИЯ БАКТЕРИАЛЬНЫХ СПО БЕЗ ПРИМЕНЕНИЯ ТЕПЛА – УСПЕШНАЯ МОДИФИКАЦИЯ МЕТОДА МЁЛЛЕРА» (PDF) . Европейский журнал медицинских исследований . 12 (8): 356–359. ПМИД 17933713 . Проверено 7 марта 2022 г.
- ^ «Stainsfile – Файт» . stainsfile.info . Архивировано из оригинала 18 ноября 2011 г. Проверено 28 июня 2012 г.
- ^ «Протокол окрашивания по Фите-Фарако на бациллы проказы» . Ihcworld.com .
- ^ «Stainsfile – Fite Faraco» . stainsfile.info . Архивировано из оригинала 18 ноября 2011 г. Проверено 28 июня 2012 г.
- ^ «Stainsfile – Уэйд Файт» . stainsfile.info . Архивировано из оригинала 18 ноября 2011 г. Проверено 28 июня 2012 г.
- ^ Эллис, Р.К.; Заброварный, Луизиана (1993). «Безопасный метод окрашивания кислотоустойчивых бактерий» . Журнал клинической патологии . 46 (6): 559–560. дои : 10.1136/jcp.46.6.559 . ПМК 501296 . ПМИД 7687254 .
- ^ «Лаборатория гистологии: ОКРАШИВАНИЕ КИСЛОБЫТЫХ БАКИЛЛ» . Архивировано из оригинала 4 января 2006 г. Проверено 11 марта 2006 г.
- ^ Гарсия Л.С., Брукнер Д.А., Брюэр Т.К., Симидзу Р.Ю. (июль 1983 г.). «Методы выделения и идентификации ооцист Cryptosporidium из образцов стула» . Дж. Клин. Микробиол . 18 (1): 185–90. doi : 10.1128/JCM.18.1.185-190.1983 . ПМК 270765 . ПМИД 6193138 .
- ^ Нг Э., Маркелл Э.К., Флеминг Р.Л., Фрид М. (сентябрь 1984 г.). «Демонстрация Isospora belli кислотостойким окрашиванием у пациента с синдромом приобретенного иммунодефицита» . Дж. Клин. Микробиол . 20 (3): 384–6. doi : 10.1128/JCM.20.3.384-386.1984 . ПМК 271334 . ПМИД 6208216 .
- ^ Ортега Ю.Р., Стерлинг Ч.Р., Гилман Р.Х., Кама В.А., Диас Ф. (май 1993 г.). «Вид Cyclospora — новый простейший патоген человека» . Н. англ. Дж. Мед . 328 (18): 1308–12. дои : 10.1056/NEJM199305063281804 . ПМИД 8469253 .
- ^ Клавель А., Вареа М., Дойс О., Лопес Л., Килес Х., Кастильо Ф.Дж., Рубио К., Гомес-Лус Р. (1999). «Визуализация гидатидных элементов: сравнение нескольких методик» . J Clin Микробиол . 37 (5): 1561–3. doi : 10.1128/JCM.37.5.1561-1563.1999 . ПМЦ 84828 . ПМИД 10203521 .
- ^ «Продукты Dako – Agilent» (PDF) . Дако.com . Архивировано из оригинала (PDF) 4 марта 2016 года . Проверено 3 декабря 2018 г.
- ^ Заработная плата ds, Wear DJ. кислотоустойчивость грибов при бластомикозе и гистоплазмозе. Arch Pathol Lab Med, 1982; 106:440-41.
Примеры онлайн-протоколов
[ редактировать ]- Протокол Циля-Нильсена ( формат PDF ).
- Альтернативный метод Эллиса и Заброварни. Архивировано 4 января 2006 г. в Wayback Machine для окрашивания AFB.
