Молярный коэффициент поглощения
В химии молярный коэффициент поглощения или молярный коэффициент затухания ( ε ) [1] Это измерение того, насколько сильно химическое вещество поглощает и тем самым ослабляет свет определенной длины волны . Это внутреннее свойство вида. Единицей молярного коэффициента поглощения в системе СИ является квадратный метр на моль ( м 2 /моль ), но на практике величины обычно выражаются через M −1 ⋅cm −1 или л⋅моль −1 ⋅cm −1 (последние две единицы равны 0,1 м 2 /моль ). В старой литературе см 2 /моль иногда используется; 1 М −1 ⋅cm −1 равен 1000 см 2 /моль. Молярный коэффициент поглощения также известен как молярный коэффициент поглощения и молярная поглощающая способность , но использование этих альтернативных терминов не поощряется ИЮПАК . [2] [3]
Закон Бера – Ламберта
[ редактировать ]Поглощение материала, имеющего только один поглощающий компонент , также зависит от длины пути и концентрации частиц в соответствии с законом Бера – Ламберта.
где
- ε — молярный коэффициент поглощения этого материала;
- c — молярная концентрация этих веществ;
- ℓ — длина пути.
В разных дисциплинах существуют разные соглашения относительно того, является ли поглощение десятичным (на основе 10) или неперовым (на основе e), т.е. определяется в отношении пропускания через десятичный логарифм (log 10 ) или натуральный логарифм (ln). Молярный коэффициент поглощения обычно десятичный. [1] [4] При наличии двусмысленности важно указать, какая из них применима.
Если в растворе имеется N поглощающих частиц, общее поглощение представляет собой сумму поглощений для каждого отдельного вида i :
Состав смеси N поглощающих частиц можно определить путем измерения оптической плотности на N длинах волн (также должны быть известны значения молярного коэффициента поглощения для каждой частицы на этих длинах волн). Выбранные длины волн обычно представляют собой длины волн максимального поглощения (максимумы поглощения) для отдельных видов. Ни одна из длин волн не может быть изобестической точкой для пары видов. систему следующих одновременных уравнений Чтобы найти концентрации каждого поглощающего вещества, можно решить :
Молярный коэффициент поглощения (в единицах М -1 см -1 ) напрямую связана с сечением затухания (в единицах см 2 ) через постоянную Авогадро N A : [5]
Коэффициент массового поглощения
[ редактировать ]Массовый коэффициент поглощения равен молярному коэффициенту поглощения, деленному на молярную массу поглощающего вещества.
- е м = ε ⁄ M
где
- ε m = коэффициент поглощения массы
- ε = Молярный коэффициент поглощения
- M = молярная масса поглощающих частиц
Белки
[ редактировать ]В биохимии молярный коэффициент поглощения белка при 280 нм зависит почти исключительно от количества ароматических остатков, в частности триптофана , и может быть предсказан по последовательности аминокислот . [6] молярный коэффициент поглощения нуклеиновых кислот при 260 нм Аналогичным образом, зная нуклеотидную последовательность, можно предсказать .
Если известен молярный коэффициент поглощения, его можно использовать для определения концентрации белка в растворе.
Ссылки
[ редактировать ]- ^ Перейти обратно: а б «Глава 11, раздел 2. Термины и символы, используемые в фотохимии и светорассеянии» (PDF) . Сборник по аналитической номенклатуре (Оранжевая книга) . ИЮПАК. 2002. с. 28.
- ^ ИЮПАК , Сборник химической терминологии , 2-е изд. («Золотая книга») (1997). Интернет-исправленная версия: (2006–) « Вымирание ». doi : 10.1351/goldbook.E02293
- ^ ИЮПАК , Сборник химической терминологии , 2-е изд. («Золотая книга») (1997). Интернет-исправленная версия: (2006–) « Впитывающая способность ». doi : 10.1351/goldbook.A00044
- ^ «Молекулярная спектроскопия» (PDF) . Сборник по аналитической номенклатуре . ИЮПАК. 2002. «Измерительная техника» (PDF) . Сборник по аналитической номенклатуре . ИЮПАК. 2002.
- ^ Лакович, младший (2006). Принципы флуоресцентной спектроскопии (3-е изд.). Нью-Йорк: Спрингер. п. 59. ИСБН 9780387312781 .
- ^ Гилл, Южная Каролина; фон Хиппель, PH (1989). «Расчет коэффициентов экстинкции белка по данным аминокислотной последовательности». Аналитическая биохимия . 182 (2): 319–326. дои : 10.1016/0003-2697(89)90602-7 . ПМИД 2610349 .
Внешние ссылки
[ редактировать ]- Nikon MicroscopeU: Введение в флуоресцентные белки включает таблицу молярных коэффициентов ослабления флуоресцентных белков .