Поэтапный процесс продления

Процесс поэтапного расширения (также называемый StEP) — это распространенный метод, используемый в биотехнологии и молекулярной биологии для создания новых мутированных генов с качествами одного или нескольких исходных генов.

Сам метод представляет собой модифицированную полимеразную цепную реакцию с очень короткими (около 10 секунд) циклами. В этих циклах удлинение ДНК происходит очень быстро (всего несколько сотен пар оснований), и синтезированные фрагменты отжигаются с комплементарными фрагментами других цепей. Таким образом, мутации исходных генов перемешиваются и в конечном итоге амплифицируются гены с новыми комбинациями мутаций. ^{[ 1 ]}^{[ 2 ]}

Было обнаружено, что протокол StEP полезен как метод направленной эволюции для открытия ферментов, полезных для промышленности. ^{[ 3 ]}

Ссылки

^ Чжао, Хуэйминь; Дайвер, Лори; Шао, Чжисинь; Аффхолтер, Джозеф А.; Арнольд, Фрэнсис Х. (1998). «Молекулярная эволюция путем поэтапного процесса расширения (StEP) рекомбинации in vitro». Природная биотехнология . 16 (3): 258–261. дои : 10.1038/nbt0398-258 . ПМИД 9528005 . S2CID 20490024 .
^ Чжао, Хуэйминь; Чжа, Вэньцзюань (1 ноября 2006 г.). «Половая» эволюция in vitro посредством процесса поэтапного расширения на основе ПЦР (StEP)». Протоколы природы . 1 (4): 1865–1871. дои : 10.1038/нпрот.2006.309 . ПМИД 17487170 . S2CID 15317544 .
^ Маррс, Барри; Делагрейв, Саймон; Мерфи, Деннис (29 июля 1999 г.). «Новые подходы к открытию промышленных ферментов». Современное мнение в микробиологии . 2 (3): 241–245. дои : 10.1016/S1369-5274(99)80042-3 . ПМИД 10383866 .

[1] Чжао, Хуэйминь; Дайвер, Лори; Шао, Чжисинь; Аффхолтер, Джозеф А.; Арнольд, Фрэнсис Х. (1998). «Молекулярная эволюция путем поэтапного процесса расширения (StEP) рекомбинации in vitro». Природная биотехнология . 16 (3): 258–261. дои : 10.1038/nbt0398-258 . ПМИД 9528005 . S2CID 20490024 .

[2] Чжао, Хуэйминь; Чжа, Вэньцзюань (1 ноября 2006 г.). «Половая» эволюция in vitro посредством процесса поэтапного расширения на основе ПЦР (StEP)». Протоколы природы . 1 (4): 1865–1871. дои : 10.1038/нпрот.2006.309 . ПМИД 17487170 . S2CID 15317544 .

[3] Маррс, Барри; Делагрейв, Саймон; Мерфи, Деннис (29 июля 1999 г.). «Новые подходы к открытию промышленных ферментов». Современное мнение в микробиологии . 2 (3): 241–245. дои : 10.1016/S1369-5274(99)80042-3 . ПМИД 10383866 .

[ 1 ]

[ 2 ]

[ 3 ]