Исследование местных лимфатических узлов

Анализ на мышах местных лимфатических узлов (LLNA) представляет собой тест in vivo на сенсибилизацию кожи .

LLNA в значительной степени заменил тест максимизации на морских свинках и тест Бюлера . Он считается более научным и менее жестоким (меньшее количество животных, меньше страданий) и нашел широкое научное и нормативное признание.

Принцип, лежащий в основе LLNA, заключается в том, что кожные сенсибилизаторы вызывают рост лимфоцитов в лимфатических узлах, дренирующих место нанесения. лимфоцитов Пролиферацию можно измерить с помощью радиоактивного мечения (количественное определение тритиадного тимидина ), биолюминесценции (количественное определение содержания АТФ в лимфоцитах) или иммуноанализа ( ИФА с использованием антител, специфичных для BrdU ). ^{[ 1 ]}

Испытуемый материал наносится на уши мышей. индикаторное вещество, такое как 3H-метилтимидин или BrdU . Необязательно, для включения лимфоцитов внутрибрюшинно вводят Животных подвергают эвтаназии, клетки их лимфатических узлов удаляют и анализируют. Коэффициент включения индикатора в лимфатические узлы животных, которым вводили дозу, сравнивают с контрольными животными, получая индекс стимуляции (SI). Когда индекс стимуляции превышает 3 (SI > 3), предполагается наличие соответствующего сенсибилизирующего потенциала. В отличие от классических тестов на морских свинках, LLNA обеспечивает количественное измерение сенсибилизирующей активности тестируемого химического вещества. ^{[ 2 ]}

LLNA может не подходить для некоторых металлических соединений, поверхностно-активных веществ, высокомолекулярных белков, сильных раздражителей кожи и материалов, которые недостаточно прилипают к уху в течение приемлемого периода времени во время лечения. Абсолютного совпадения сенсибилизирующего потенциала вещества у мыши, морской свинки и человека нет.

Регуляторный

Рекомендации ОЭСР по тестированию химических веществ № 429 от 23 июля 2010 г. ^{[ 3 ]}

Регламент REACH , Приложение VII, параграф 8.3 гласит: «Анализ локальных лимфатических узлов на мышах (LLNA) является методом первого выбора для тестирования in vivo . Только в исключительных обстоятельствах следует использовать другой тест. Обоснование использования другого теста должно быть предоставил."

В соответствии с Европейским руководством OECD 406 «Сенсибилизация кожи» тест LLNA или MEST ( тест на отек ушей на мышах ) может использоваться в качестве первого этапа оценки потенциала сенсибилизации кожи. Если в любом из анализов получен положительный результат, тестируемое вещество может быть признано потенциальным сенсибилизатором, и нет необходимости проводить дальнейшее тестирование на морских свинках. Однако если по LLNA или MEST получен отрицательный результат, необходимо провести тест на морских свинках (предпочтительно GPMT или BT).

Ссылки

^ Майкл Дж. Дереленко; Кэрол С. Аулетта, ред. (2014), Справочник по токсикологии (3-е изд.), CRC Press, ISBN 978-1-4398-9014-1
^ «Препараты для волос», Энциклопедия промышленной химии Ульмана (7-е изд.), Wiley, 2007, doi : 10.1002/14356007.a12_571.pub2
^ «Тест № 429: Сенсибилизация кожи: анализ локальных лимфатических узлов» .

[1] Майкл Дж. Дереленко; Кэрол С. Аулетта, ред. (2014), Справочник по токсикологии (3-е изд.), CRC Press, ISBN 978-1-4398-9014-1

[2] «Препараты для волос», Энциклопедия промышленной химии Ульмана (7-е изд.), Wiley, 2007, doi : 10.1002/14356007.a12_571.pub2

[3] «Тест № 429: Сенсибилизация кожи: анализ локальных лимфатических узлов» .

[ 1 ]

[ 2 ]

[ 3 ]