АТФазный анализ

Анализ АТФазы представляет собой мембранный анализ , который косвенно измеряет активность эффлюксных транспортеров . АТФ- связывающая кассета или транспортеры оттока опосредуют транспорт субстратов через клеточные мембраны против градиента концентрации . Расщепление АТФ тесно связано с транслокацией субстрата, поскольку энергия для транслокации субстрата получается в результате гидролиза АТФ . Гидролиз АТФ дает неорганический фосфат (Pi), который можно измерить с помощью простой колориметрической реакции. Количество высвободившегося Pi прямо пропорционально активности транспортера. ^{[ 1 ]}

Использование анализа АТФазы

Анализ АТФазы предназначен для определения характера взаимодействия между соединением и переносчиком . Анализы АТФазы используются в двух разных режимах: активация АТФазы и ингибирование АТФазы. Транспортируемые субстраты повышают базовую активность АТФазы, тогда как ингибиторы или медленно транспортируемые соединения ингибируют базовую активность АТФазы и/или активность АТФазы, измеренную в присутствии стимулирующего агента. Таким образом, анализы АТФазы могут иметь потенциал для определения того, действует ли соединение в качестве субстрата-переносчика и/или ингибитора. ^{[ 2 ]}^{[ 3 ]}

Мутации в домене АТФазы приводят к потере транспортной функции. Активность мультилекарственного переносчика в устойчивых к лекарствам клетках связана с быстрым клеточным истощением АТФ при ингибировании синтеза АТФ.

Ссылки

^ Главанас Х., Мен Д., Яни М., Остерхейс Б., Эреди-Сабо К., Крайчи П. (июнь 2008 г.). «Использование препаратов мембранных везикул для изучения взаимодействия лекарственного средства и переносчика ABC». Экспертное заключение по метаболизму и токсикологии лекарственных средств . 4 (6): 721–32. дои : 10.1517/17425255.4.6.721 . ПМИД 18611113 .
^ Кис Э., Раджнай З., Иоджа Э. и др. (январь 2009 г.). «Анализ АТФазы Bsep на мышах: нерадиоактивный инструмент для оценки холестатического потенциала лекарств» . Журнал биомолекулярного скрининга . 14 (1): 10–5. дои : 10.1177/1087057108326145 . ПМИД 19029016 .
^ Саркади Б., Прайс Э.М., Баучер Р.К., Германн У.А., Скарборо, Джорджия (март 1992 г.). «Экспрессия кДНК человека с множественной лекарственной устойчивостью в клетках насекомых генерирует высокоактивную мембранную АТФазу, стимулируемую лекарствами» . Журнал биологической химии . 267 (7): 4854–8. ПМИД 1347044 .

[1] Главанас Х., Мен Д., Яни М., Остерхейс Б., Эреди-Сабо К., Крайчи П. (июнь 2008 г.). «Использование препаратов мембранных везикул для изучения взаимодействия лекарственного средства и переносчика ABC». Экспертное заключение по метаболизму и токсикологии лекарственных средств . 4 (6): 721–32. дои : 10.1517/17425255.4.6.721 . ПМИД 18611113 .

[2] Кис Э., Раджнай З., Иоджа Э. и др. (январь 2009 г.). «Анализ АТФазы Bsep на мышах: нерадиоактивный инструмент для оценки холестатического потенциала лекарств» . Журнал биомолекулярного скрининга . 14 (1): 10–5. дои : 10.1177/1087057108326145 . ПМИД 19029016 .

[3] Саркади Б., Прайс Э.М., Баучер Р.К., Германн У.А., Скарборо, Джорджия (март 1992 г.). «Экспрессия кДНК человека с множественной лекарственной устойчивостью в клетках насекомых генерирует высокоактивную мембранную АТФазу, стимулируемую лекарствами» . Журнал биологической химии . 267 (7): 4854–8. ПМИД 1347044 .

[ 1 ]

[ 2 ]

[ 3 ]