Синтез разделения и пула
Синтез разделения и пула (сплит-микс) - это метод комбинаторной химии , который можно использовать для приготовления библиотек комбинаторных соединений. Это поэтапный , высокоэффективный процесс, реализуемый в повторяющихся циклах. Эта процедура позволяет готовить миллионы или даже триллионы соединений в виде смесей, которые можно использовать в исследованиях лекарств .
История
[ редактировать ]Согласно традиционным методам, большинство органических соединений синтезируются одно за другим из строительных блоков, соединяющих их друг за другом поэтапно. До 1982 года никто даже не мечтал о производстве сотен или тысяч соединений за один процесс. Не говоря уже о миллионах или даже триллионах. Таким образом, продуктивность метода разделения и объединения, изобретенного проф. Фурка (Университет Этвеша Лоранда в Будапеште, Венгрия) в 1982 году показался невероятным на первый взгляд. Метод был описан в документе, нотариально заверенном в том же году. Документ написан на венгерском языке и переведен на английский язык. [1] Мотивы, которые привели к изобретению, можно найти в статье 2002 года. [2] и метод был впервые опубликован на международных конгрессах в 1988 году. [3] затем в печати в 1991 году. [4]
Сплит- и пул-синтез и его особенности.
[ редактировать ]
Сплит-пул-синтез (S&P-синтез) отличается от традиционных синтетических методов. Важным новшеством является использование в процессе смесей соединений. В этом причина его беспрецедентно высокой производительности. Используя этот метод, один химик может получить за неделю больше соединений, чем все химики, произведенные за всю историю химии.Синтез S&P применяется поэтапно, повторяя три операции на каждом этапе процесса:
- Разделение составной смеси на равные части
- Соединение одного отдельного строительного блока (BB) с каждой частью
- Соединяем и тщательно перемешиваем порции.
Оригинальный метод основан на твердофазном синтезе Меррифилда. [5] Процедура иллюстрируется на рисунке блок-схемой двухтактного синтеза с использованием одних и тех же трех ББ в обоих циклах.Выбор твердофазного метода при синтезе S&P целесообразен, поскольку в противном случае удаление побочных продуктов из смеси соединений будет весьма затруднительно.
Эффективность
[ редактировать ]Высокая эффективность – важнейшая особенность метода. В многоэтапном (n) синтезе с использованием одинакового количества ББ (k) на каждом этапе количество компонентов в формирующейся комбинаторной библиотеке (N) равно:
Н=к н
Это означает, что количество компонентов увеличивается экспоненциально с увеличением количества шагов (циклов), тогда как количество необходимых связей увеличивается только линейно. Если в циклах используется разное количество строительных ББ (к1, к2, к3....кн), то количество образуемых компонентов составляет:
N=k 1 .k 2 .k 3 ...k n .
Эта особенность метода дает возможность синтезировать практически неограниченное количество соединений. Например, если использовать 1000 ББ в четырех циклах, ожидается образование 1 триллиона соединений. Количество необходимых муфт всего 4000!
Причина высокой эффективности
[ редактировать ]
Объяснением необычайной эффективности является использование смесей на этапах синтеза. Если в традиционной реакции одно соединение соединяется с одним реагентом, образуется одно новое соединение. Если смесь соединений, содержащую n компонентов, соединяется с одним реагентом, количество новых соединений, образующихся при однократном сочетании, равно n.Разница между традиционным и расщепленно-пул-синтезом убедительно проявляется в количестве стадий сочетания в традиционном и расщепленно-пул-синтезе 3,2 миллиона пентапептидов.
Обычный синтез: 3 200 000x5 = 16 000 000 шагов соединения примерно 40 000 лет.Синтез S&P: 20x5=100 шагов сопряжения примерно 5 дней
Можно провести традиционный синтез рациональным способом, как показано на рисунке. В этом случае количество циклов сцепления составляет:
20+400+8000+160000+3200000=3368420 около 9200 лет
Теоретический верхний предел количества компонентов
[ редактировать ]Как часто упоминалось, метод разделения и объединения позволяет синтезировать неограниченное количество соединений. Фактически теоретическое максимальное количество компонентов зависит от количества библиотеки, выраженного в молях. Если, например, синтезируется 1 моль библиотеки, максимальное количество компонентов равно числу Авогадро:
6,02214076·10 23
В такой библиотеке каждый компонент будет представлен одной молекулой.
Компоненты библиотеки формы в равных молярных количествах.
[ редактировать ]Насколько позволяет химия соединений, компоненты библиотек образуются примерно в равных молярных количествах. Это становится возможным за счет разделения смесей на равные пробы и гомогенизации объединенных проб путем их тщательного перемешивания. Равное молярное количество компонентов библиотеки очень важно с точки зрения их применимости. Наличие соединений в неравных количествах может привести к трудностям в оценке результатов скрининга. Твердофазный метод позволяет использовать избыток реагентов, чтобы довести реакции до конца, поскольку излишки легко удаляются фильтрованием.
Возможность использования двух смесей при синтезе
[ редактировать ]В принципе, использование двух смесей при синтезе S&P может привести к той же комбинаторной библиотеке, которая образуется при обычном методе S&P. Однако различия в реакционной способности ББ приводят к большим различиям в концентрациях компонентов, и ожидается, что различия будут увеличиваться после каждого этапа. Хотя значительное количество труда можно сэкономить, используя подход двух смесей, когда в каждой позиции связано большое количество BB, желательно придерживаться обычно используемой процедуры S&P.
Наличие всех структурных разновидностей в библиотеке
[ редактировать ]Формирование всех структурных вариантов, которые можно вывести из ББ, является важной особенностью синтеза S&P. Только метод S&P может достичь этого за один процесс. С другой стороны, наличие в библиотеке всех возможных структурных разновидностей гарантирует, что библиотека является комбинаторной и получена путем комбинаторного синтеза.
Формирование одного соединения в шариках
[ редактировать ]
Следствием использования одного ВВ в муфтах является образование одного соединения в каждом борте. Формирование библиотек OBOC является неотъемлемым свойством синтеза S&P. Причина пояснена на рисунке. Структура соединения, образующегося в шарике, зависит от реакционных сосудов, в которых шарик встречается в процессе синтеза.От решения химика зависит использовать библиотеку в связанной (OBOC) форме или отщепить соединения от шариков и использовать в виде раствора.
Реализация синтеза разделения и пула
[ редактировать ]
Сплит- и пул-синтез впервые был применен для приготовления пептидных библиотек на твердой основе. Синтез был реализован в самодельном ручном устройстве, показанном на рисунке. Устройство имеет трубку с 20 отверстиями, к которой можно прикрепить реакционные сосуды. Один конец трубки соединен с контейнером для отходов и водяным насосом. Слева — загрузка и фильтрация, справа — положение встряхивания муфты.На заре комбинаторной химии в компании AdvancedChemTech (Луисвилл, Кентукки, США) была сконструирована и коммерциализирована автоматическая машина. Все операции синтеза S&P выполняются автоматически под контролем компьютера. В настоящее время автоматический синтезатор Titan 357 доступен в магазине aapptec (Луисвилл, Кентукки, США). [6]
Закодированный синтез разделения и пула
[ редактировать ]Хотя при синтезе S&P на каждой бусине образуется одно соединение, его структура неизвестна. По этой причине были введены методы кодирования, помогающие определить идентичность соединения, содержащегося в выбранной грануле. Кодирующие молекулы соединяются с шариками параллельно с соединением ББ. Структуру кодирующей молекулы определить легче, чем структуру члена библиотеки на шарике.Олмейер и др. опубликовал метод двоичного кодирования. [7] Они использовали смеси из 18 меченых молекул, которые после отделения их от шариков можно было идентифицировать с помощью электронно-захватной газовой хроматографии.Николаев и др. примененные пептидные последовательности для кодирования [8] Саркар и др. описали хиральные олигомеры пентеновых амидов (COPA), которые можно использовать для создания массово-кодируемых библиотек OBOC. [9] Керр и др. представил инновационный вид кодирования. [10] К шарикам был прикреплен ортогонально защищенный съемный бифункциональный линкер. Один конец линкера использовался для присоединения неприродных BB библиотеки, тогда как к другому концу были присоединены триплеты кодирующих аминокислот. Один из самых ранних и очень успешных методов кодирования был предложен Бреннером и Лернером. [11] в 1992 году они предложили прикреплять к шарикам олигомеры ДНК для кодирования их содержимого.Метод был реализован Нильсеном, Бреннером и Яндой. [12] с использованием бифункционального линкера Kerr et al. для присоединения кодирующих ДНК-олигомеров. Это позволило расщепить соединение с прикрепленным к нему олигомером, кодирующим ДНК.
Сплит- и пул-синтез в растворе
[ редактировать ]Хан и др. описал метод, который позволил сохранить преимущества как высокой эффективности синтеза S&P, так и гомогенности сред в химических реакциях. [13] В их методе полиэтиленгликоль (ПЭГ) использовался в качестве растворимой подложки при синтезе пептидных библиотек S&P.
MeO-CH 2 -CH 2 -O-(CH 2 -CH 2 -O)n-CH 2 -CH 2 -OH
ПЭГ оказался подходящим для этой цели, поскольку он растворяется в широком спектре водных и органических растворителей, а его растворимость обеспечивает гомогенные условия реакции, даже когда сама присоединенная молекула нерастворима в реакционной среде. Отделение от раствора полимера и связанных с ним синтезированных соединений может быть достигнуто осаждением и фильтрованием. Осаждение требует концентрирования реакционных растворов с последующим разбавлением диэтиловым эфиром или трет-бутилметиловым эфиром. В тщательно контролируемых условиях осаждения полимер со связанными продуктами выпадает в кристаллическую форму, а нежелательные реагенты остаются в растворе.В твердофазном синтезе S&P на каждой бусине образуется одно соединение, и, как следствие, количество соединений не может превышать количество бусинок. Итак, теоретическое максимальное количество соединений зависит от количества твердого носителя и размера шариков. Например, на 1 г полистирольной смолы можно синтезировать максимум 2 миллиона соединений, если диаметр шариков смолы составляет 90 мкм, и 2 миллиарда, если размер шариков составляет 10 мкм. На практике твердый носитель используется в избытке (часто в десятикратном количестве), чтобы быть уверенным в образовании всех ожидаемых компонентов. Вышеупомянутое ограничение полностью снимается, если отказаться от твердого носителя и проводить синтез в растворе. В этом случае верхнего предела количества компонентов библиотеки не существует. Как количество компонентов, так и количество библиотеки можно свободно выбирать, исходя только из практических соображений.Важная модификация была внесена в синтез комбинаторных библиотек, кодируемых ДНК, Харбери и Халпином. [14] Твердая подложка в них заменена кодирующими ДНК-олигомерами. Это позволяет синтезировать библиотеки, содержащие даже триллионы компонентов, и экранировать их методами аффинного связывания. Другой способ проведения синтеза S&P в растворе - это применение смол-поглотителей для удаления побочных продуктов. Смолы-поглотители представляют собой полимеры, имеющие функциональные группы, которые позволяют вступать в реакцию и связывать компоненты избытка реагентов с последующей фильтрацией их из реакционной смеси. [15] Два примера: смола, содержащая первичные аминогруппы, может удалять избыток ацилхлоридов из реакционных смесей, тогда как ацилхлоридная смола удаляет амины. Фтористая технология была описана Карраном. [16] В синтезе фтора используются функционализированные перфторалкильные (Rf) группы, такие как 4,4,5,5,6,6,7,7,8,8,9,9,9-тридекафторонил {CF 3 (CF 2 ) 4 CF 2 CH 2 Группа CH 2 -} присоединена к субстратам или реагентам. Группы Rf позволяют удалить из реакционной смеси либо продукт, либо реагенты. По окончании процедуры группы Rf, прикрепленные к подложке, могут быть удалены из продукта. Присоединяя группы Rf к подложке, синтез можно проводить в растворе, а продукт можно отделить от реакционной смеси путем жидкостной экстракции с использованием фтористого растворителя, такого как перфторметилциклогексан или перфторгексан. Видно, что функция групп Rf в синтезе аналогична функции твердого или растворимого носителя. Если к реагенту прикреплена метка Rf, ее избыток можно удалить из реакционной смеси экстракцией.Реагенты на полимерной основе также используются в синтезе S&P. [17]
Особенности синтеза комбинаторных библиотек, кодируемых ДНК
[ редактировать ]Самособирающиеся библиотеки, закодированные ДНК
[ редактировать ]
Одним из лучших примеров особенностей, обусловленных кодированием ДНК, является синтез самосборочной библиотеки, представленный Mlecco et al. [18] Сначала синтезируются две подбиблиотеки. В одной из подбиблиотек BB присоединены к 5'-концу олигонуклеотида, содержащего домен димеризации, за которым следуют коды BB. В другой подбиблиотеке ББ присоединены к 3'-концу олигонуклеотидов, также содержащих домен димеризации и коды другого набора ББ. Две подбиблиотеки смешивают в эквимолярных количествах, нагревают до 70 ° C, затем дают остыть до комнатной температуры, гетеродимеризуются и образуют самособирающуюся комбинаторную библиотеку. Один член такой двух фармакофорной библиотеки показан на рисунке. При скрининге аффинности два BB фармакофора могут взаимодействовать с двумя соседними сайтами связывания целевого белка.
Библиотеки шаблонов ДНК
[ редактировать ]
Gartner et al. При синтезе комбинаторных библиотек с шаблоном ДНК способность двойной спирали ДНК направлять химические реакции в конкретных регионах используется Gartner et al. [19] [20] Реагенты, связанные с ДНК, хранятся в непосредственной близости. Это эквивалентно виртуальному увеличению локальной концентрации, которая практически постоянна на расстоянии 30 нуклеотидов. Эффект близости помогает реакциям протекать. Синтезированы две библиотеки. Библиотека шаблонов, содержащая на одном конце один из BB и его код, за которыми следуют две области отжига для кодов BB двух библиотек реагентов. Каждая из двух библиотек реагентов содержит кодирующий олигонуклеотид, связанный расщепляемыми связями с реагентом (BB), способный образовывать связь с уже связанным BB, используя эффект близости. Синтез реализуется в два этапа, как показано на рисунке. Каждый этап имеет три операции: смешивание, отжиг, соединение-расщепление.
Синтез в Yoctoreactor
[ редактировать ]Йоктореакторный метод, предложенный Hansen et al. [21] основан на геометрии и стабильности трехмерной структуры ДНК, которая создает йоктолитр (10 −24 L) химический реактор такого размера, в котором близость ББ вызывает реакции между ними. ДНК-олигомеры составляют ДНК-штрих-код присоединенных ББ и образуют структурные элементы реактора. Один из видов формата йореактора показан на рисунке.
Маршрутизация с последовательным кодированием
[ редактировать ]
Харбери и Халпин разработали библиотеки шаблонов ДНК, которые, подобно генам, управляют синтезом органических библиотек, кодируемых ДНК. [22] [23] Члены комбинаторной библиотеки шаблонов содержат коды всех ББ и порядок их связей. На рисунке показан один член простой библиотеки шаблонов оцДНК (А), содержащий коды трех ББ (2, 4, 6), которые планировалось последовательно прикреплять. Кодирующие области разделены одинаковыми некодирующими областями (1, 3, 5, 7) во всех членах.В процедуре, ориентированной на последовательность, используется серия столбцов смоляных шариков, каждый из которых покрыт антикодоном одного из BB (B). Когда библиотеку шаблонов переносят в столбец антикодонов, соответствующий элемент шаблона захватывается гибридизацией, а затем соединяется с соответствующим BB. После завершения работы со всеми антикодоновыми колонками положения связывания (CP) библиотеки элюируют из смешанных шариков антикодоновых колонок и повторяют упомянутые операции с серией антикодоновых колонок следующего CP. На рисунке C показан один член библиотеки шаблонов, захваченный «желтой» второй библиотекой антикодонов CP. Шаблон содержит «красный» ББ, уже связанный в CP1, и «желтый» ББ, прикрепленный после его захвата. Окончательная библиотека содержит все синтезированные органические соединения, присоединенные к их кодирующим ДНК-олигомерам.
Пошаговое соединение и кодирование
[ редактировать ]Один из наиболее перспективных методов, обычно используемых для кодирования ДНК, применяется при синтезе библиотек одиночных фармакофоров. [24] Как видно из рисунка, библиотека построена, повторяя обычные циклы синтеза S&P. Вторая операция цикла модифицирована: помимо связывания с ББ кодирующий олигомер ДНК удлиняется за счет присоединения кода ББ путем лигирования.
Синтез с использованием макроскопических единиц твердого носителя.
[ редактировать ]Разработаны модификации, позволяющие методом расщепленного и пул-синтеза получать известные соединения в количествах, превышающих содержание шарика твердого носителя, сохраняя при этом высокую эффективность исходного метода. Согласно публикации Moran et al. [25] и Николау и др. [26] смолу, обычно используемую при твердофазном синтезе, помещали в проницаемые капсулы, включающие радиочастотную метку, записывающую ББ в порядке их соединения. Для сортировки капсул в соответствующие реакционные сосуды были сконструированы как ручные, так и автоматические машины. Другой тип меченой макроскопической единицы твердого носителя был представлен Xiao et al. [27] Опоры представляют собой привитые квадратные пластины из полистирола размером 1х1 см. Носителем кода является керамическая пластина размером 3х3 мм в центре подложки для синтеза. Код выгравирован на керамической подставке с помощью CO 2 -лазера в виде двумерного штрих-кода, считываемого специальным сканером.
Синтез струн
[ редактировать ]
Синтез струн, представленный Фуркой и др. [28] использует струнные макроскопические твердые опорные блоки (коронки), и эти блоки идентифицируются по их положению, занимаемому на струне. Каждому строительному блоку синтеза назначается одна строка. На этапе соединения нить находится в соответствующем реакционном сосуде. Содержимое строк, полученных на этапе синтеза, должно быть перераспределено на строки следующего шага. Единицы не объединяются. Перераспределение, продемонстрированное на рисунке, соответствует правилу комбинаторного распределения: все продукты, образующиеся на этапе синтеза, поровну распределяются между всеми реакционными сосудами следующего этапа синтеза. Можно использовать различные форматы распределения, что позволяет идентифицировать содержимое каждой короны в зависимости от положения на новой цепочке и реакционного сосуда назначения цепочки. [29]
На рисунке показаны струнные коронки и лотки, используемые при ручной сортировке. Целевой лоток постепенно перемещается в направлении стрелки. Коронки переносят группами из слотов исходного лотка во все противоположные слоты лотка-приемника. Передачи управляются компьютером, а изделия идентифицируются по положению коронок на последних струнах. Также была описана быстрая автоматическая сортировочная машина. [30] Сортировщик показан на рисунке. Он имеет два набора совмещенных трубок. Нижние шаг за шагом движутся в направлении, указанном стрелкой, и монетообразные блоки сбрасываются из верхних трубок-источников в нижние приемные. Трубки также могут служить реакционными сосудами.Также было разработано программное обеспечение, которое может осуществлять сортировку: если не синтезирована полная комбинаторная библиотека, то подготавливается только набор ее компонентов, выбранных из полной библиотеки. [31]
Ссылки
[ редактировать ]- ^ Фурка А. Исследование возможности систематического поиска фармацевтически полезных пептидов https://mersz.hu/mod/object.php?objazonosito=matud202006_f42772_i2
- ^ А. Фурка, Комбинаторная химия: 20 лет спустя… Открытие лекарств сегодня, 2002, 7, 1-2.
- ^ А. Фурка, Ф. Себастьен, М. Асгедом, Г. Дибо, «Рог изобилия пептидов путем синтеза в основных моментах современной биохимии», материалы 14-го Международного биохимического конгресса, ВСП. Утрехт, Нидерланды, 1988 г., Том. 5, стр. 47.
- ^ Фурка А., Себастьен Ф., Асгедом М., Дибо Г. (1991) Общий метод быстрого синтеза многокомпонентных пептидных смесей, Int J Peptide Protein Res 37; 487-93.
- ^ Merrifield RB Твердофазный синтез пептидов. I. Синтез тетрапептида (1963) J. Am. хим. Соц. 85, 2149–2154.
- ^ «Титан» .
- ^ Олмейер MHJ, Суонсон Р.Н., Диллард Л.В., Ридер Дж.К., Асулин Г., Кобаяши Р., Виглер М., Стилл В.К. (1993) Сложные синтетические химические библиотеки, индексированные молекулярными метками, Proc Natl Acad Sci USA 90; 10922–10926.
- ^ В. Николаев, А. Стерандова, В. Крчнах, Б. Селигман, К. С. Лам, С. Е. Салмон, М. Лебл Пепт. Рез. 1993, 6, 161.
- ^ Саркар М., Паскаль Б.Д., Стеклер С., Акино К., Микалицио Г.К., Кодадек Т., Чалмерс М.Дж. (1993) Декодирование комбинаторных библиотек разделения и пула с помощью тандемной масс-спектрометрии диссоциации с переносом электрона, J Am Soc Mass Spectrom 24 (7): 1026 -36.
- ^ Дж. М. Керр, СК Банвиль, Р. Н. Цукерманн Дж. Ам. Ткань. Соц. 1993, 115, 2529.
- ^ С. Бреннер и Р. А. Лернер Proc. Натл. акад. наук. США 1992, 89, 5381.
- ^ Дж. Нильсен, С. Бреннер, К.Д. Янда Дж. Ам. хим. Соц. 1993, 115, 9812.
- ^ Х. Хан, М. М. Вульф, С. Бреннер, К. Д. Янда Комбинаторный синтез в жидкой фазе Proc Natl Acad Sci USA 1995, 92:6419. https://doi.org/10.1073/pnas.92.14.6419
- ^ Харбери Д.Р., Халпин Д.Р. (2000) WO 00/23458.
- ^ Стивен В. Лей, Ян Р. Баксендейл, Роберт Н. Брим, Филип С. Джексон, Эндрю Дж. Лич, Дебора А. Лонгботтом, Марселла Нези, Джеймс С. Скотт, Р. Ян Сторер и Стивен Дж. Тейлор Мульти- ступенчатый органический синтез с использованием реагентов и поглотителей на твердой основе: новая парадигма в создании химической библиотеки J. Chem. Soc., Перкин Транс. 1, 2000, 3815–4195. https://doi.org/10.1039/B006588I
- ^ Деннис П. Карран. Разделение на уровне стратегии в органическом синтезе: от планирования к практике Ангью. хим. Межд. Эд. 1998, 37, 1174–1196. https://onlinelibrary.wiley.com/doi/epdf/10.1002/%28SICI%291521-3773%2819980518%2937%3A9%3C1174%3A%3AAID-ANIE1174%3E3.0.CO %3B2-P
- ^ Стивен В. Калдор, Майлз Дж. Сигел Комбинаторная химия с использованием реагентов на полимерной основе. Текущее мнение в области химической биологии (1997) 101–106. два : 10.1016/S1367-5931(97)80115-9 .
- ^ Мелькко С., Шойерманн Дж., Дюмелин CE, Нери Д. (2004) Закодированные самособирающиеся химические библиотеки Nat Biotechnol 22; 568-574.
- ^ Gartner ZJ, Liu DR (2001)Общность синтеза ДНК как основа для развития неприродных малых молекул. J Am Chem Soc 123, 6961–3,0 два : 10.1021/ja015873n .
- ^ Сяоюй Ли и Дэвид Р. Лю Органический синтез с использованием шаблона ДНК: природная стратегия контроля химической реактивности применительно к синтетическим молекулам Ангью. хим. Межд. Эд. 2004, 43,4848 – 4870.
- ^ Маргит Хаар Хансен, Питер Блакшер, Ларс Кольстер Петерсен, Тара Хейтнер Хансен, Йонас Вестергаард Хойфельдт, Курт Вестерагер Готелф, Нильс Якоб, Вест Хансен Реактор ДНК в масштабе йоктолитра для эволюции малых молекул J. AM. ХИМ. СОЦ. 2009, 131, 1322–1327.
- ^ Д. Р. Халпин, П. Б. Харбери. Дисплей ДНК I. Закодированная последовательность маршрутизации популяций ДНК PLoS Biology. 2004, 2, 1015–1021.
- ^ Д-р Халпин, П. Б. Харбери, Дисплей ДНК II. Генетические манипуляции с библиотеками комбинаторной химии для эволюции малых молекул - PLoS Biology 2004, 2, 1022-1030.
- ^ Манноччи Л., Чжан Ю., Шойерманн Дж., Леймбахер М., Де Беллис Г., Рицци Э., Думелин С., Мелькко С., Нери Д. Высокопроизводительное секвенирование позволяет идентифицировать связывающие молекулы, выделенные из химических библиотек, закодированных ДНК. Труды Национальной академии наук. 2008 г.; 105:17670–17675.
- ^ Э. Дж. Моран, С. Саршар, Дж. Ф. Каргилл, М. Шахбаз, А Лио, АММ Мьялли, Р. В. Армстронг Дж. Ам. хим. Соц. 1995, 117, 10787.
- ^ KC Николас, X –Y. Сяо, З. Парандуш, А. Сеньей, член парламента Нова Ангью. Ткань. Межд. Эд. англ. 1995, 36, 2289.
- ^ X.-Y. Сяо, К. Чжао, Х. Поташ, депутат Нова Ангью. хим. Межд. Эд. англ., 1997, 36, 780.
- ^ А. Фурка, Дж. Кристенсен, Э. Хили, Х. Р. Таннер, Х. Саней. Синтез струн. Пространственно адресуемая процедура разделения Дж. Комб. хим. 2000, 2, 220.
- ^ Фурка Á Перераспределение в комбинаторном синтезе. Теоретический подход. Комбинаторная химия и высокопроизводительный скрининг 2000, 3, 197–209.
- ^ Вкл. Патент США Фурка от 16.07.2002.
- ^ Á Фурка, Г. Дибо, Н. Гомбосурен. Подготовка выбранных комбинаторных библиотек с помощью StringSynthesis. Современные технологии открытия лекарств, 2005, 2, 23–27.