Массив замороженных тканей
Массив замороженных тканей состоит из свежезамороженных тканей, в которых собрано до 50 отдельных ядер тканей, что позволяет проводить одновременный гистологический анализ .
История
[ редактировать ]Массив парафиновых тканей был разработан в конце 1980-х годов; Этот массив может помочь ученым с высокой производительностью анализировать экспрессию генов и белков в нескольких образцах тканей , особенно анализировать различные уровни белка с помощью антител с помощью иммуногистохимии . Различные массивы парафиновых тканей в настоящее время коммерчески доступны во многих биотехнологических компаниях. Большинство матриц можно легко изготовить с помощью прибора для микрочипов (Beecher Instruments Inc.). Однако ткани, залитые парафином, имеют ограничения. Забуференные растворы формалина сшивают белки и нуклеиновые кислоты, когда их используют для фиксации тканей. ДНК, РНК и белок в тканях повреждаются на разных уровнях во время фиксации. Поэтому многие научные экспериментальные результаты, полученные на тканях, фиксированных формалином, не являются надежными. Поскольку срезы замороженных тканей не подвергаются никаким процедурам фиксации, а, следовательно, ДНК, РНК и белок в замороженных тканях сохраняют свои нативные характеристики гораздо лучше, чем в тканях, залитых парафином. Всем ученым, которые разрабатывают антитела для терапевтических целей, нужны предварительные результаты исследований замороженных тканей, чтобы получить одобрение FDA. Следовательно, массив замороженных тканей должен быть лучшим инструментом для высокопроизводительного анализа с этой целью.
Процедура
[ редактировать ]Ядра замороженной ткани диаметром 2 мм из интересующих областей удаляются из блоков ОКТ замороженной ткани при разной температуре замораживания, поскольку каждый тип ткани имеет свои собственные температурные предпочтения на стадии замораживания. Затем все ядра замороженных тканей вставляются в замороженный блок ОКТ реципиента в точно расположенном массиве. Срезы из этого блока вырезают с помощью криостата, монтируют на предметное стекло микроскопа и затем анализируют любым методом стандартного гистологического анализа. Каждый блок массива замороженных тканей можно разрезать на 100–500 срезов, которые можно подвергнуть независимым испытаниям. Тесты, обычно используемые с массивами замороженных тканей, включают иммуногистохимию и гибридизацию in situ.
См. также
[ редактировать ]Ссылки
[ редактировать ]- Баттифора H: Блок мультиопухолевой (колбасной) ткани: новый метод иммуногистохимического тестирования антител. Лаб Инвест 1986, 55:244-248.
- Баттифора Х., Мехта П.: Блок тканей в виде шахматной доски. Улучшенный блок управления несколькими тканями. Лаб Инвест 1990, 63:722-724.
- Кононен Дж., Бубендорф Л., Каллионими А., Барлунд М., Шрамл П., Лейтон С., Торхорст Дж., Михатч М.Дж., Саутер Г., Каллиониеми О.П.: Тканевые микрочипы для высокопроизводительного молекулярного профилирования образцов опухолей. Nat Med 1998, 4:844-847.
- Шенберг Фейзо М., Сламон Дж.: Технология микрочипов замороженной опухолевой ткани для анализа опухолевой РНК, ДНК и белков. Американский журнал патологии 2001, 159 (5): 1645–50.
- Шенберг Фейзо М, Slamon DJ. Тканевые микроматрицы из замороженных тканей – метод ОКТ. Методы Мол Биол. 2010, 664:73-80.
- « Массив замороженных тканей ». Институт Биочейн Инк . Проверено 24 июня 2017 г.