Микродиссекция хромосом
Микродиссекция хромосом — это метод, при котором физически удаляется большой участок ДНК из полной хромосомы . Наименьшая часть ДНК, которую можно выделить с помощью этого метода, включает 10 миллионов пар оснований — сотни или тысячи отдельных генов .
Учёных, изучающих хромосомы, называют цитогенетиками . Они способны идентифицировать каждую хромосому по уникальному рисунку темных и светлых полос. Однако некоторые аномалии приводят к тому, что хромосомы имеют необычный рисунок полос. Например, в одну хромосому может быть вставлен фрагмент другой хромосомы, создавая дополнительные полосы. Или часть хромосомы может повторяться снова и снова, в результате чего образуется необычно широкая темная полоса (известная как область гомогенного окрашивания ). Некоторые хромосомные аберрации связаны с раком и наследственными генетическими нарушениями, а хромосомы многих опухолевых клеток имеют неправильные полосы. Чтобы лучше понять, что вызывает эти состояния, ученые надеются определить, какие гены и последовательности ДНК расположены рядом с этими необычными полосами. Микродиссекция хромосом — это специализированный способ выделения этих областей путем удаления ДНК из полосы и предоставления этой ДНК для дальнейшего изучения.
Чтобы подготовить клетки к микродиссекции хромосом, ученый сначала обрабатывает их химическим веществом, которое переводит их в метафазу : фазу жизненного цикла клетки, когда хромосомы плотно свернуты и хорошо видны. Затем клетки помещают на предметное стекло микроскопа, так что ядро, которое удерживает весь генетический материал вместе, разрывается и высвобождает хромосомы на предметное стекло. Затем под микроскопом учёный находит конкретную интересующую полосу и с помощью очень тонкой иглы отрывает эту полосу от остальной части хромосомы. Затем исследователь производит несколько копий выделенной ДНК, используя процедуру, называемую ПЦР ( полимеразная цепная реакция ). Ученый использует эти копии для изучения ДНК необычного участка рассматриваемой хромосомы.
Ссылки
[ редактировать ]- Скаленге Ф., Турко Э., Эдстром Дж. Э., Пирротта В., Мелли М.: Микродиссекция и клонирование ДНК из определенной области политенных хромосом Drosophila melanogaster. Хромосома. 1981;82(2):205-16.