✖


Jump to content

Сортировка ячеек

    Add links

    Сортировка клеток — это процесс, посредством которого определенный тип клеток отделяется от других, содержащихся в образце, на основе их физических или биологических свойств, таких как размер, морфологические параметры, жизнеспособность и как внеклеточная, так и внутриклеточная экспрессия белка. Гомогенная популяция клеток, полученная после сортировки, может быть использована для различных целей, включая исследования, диагностику и терапию. [1]

    Методы

    [ редактировать ]

    Методы сортировки клеток делятся на две основные категории: сортировка клеток, активируемая флуоресценцией (FACS), и иммуномагнитная сортировка клеток. [2] Однако из-за многих лет усовершенствований и возросшего спроса на разделение клеток исследователи работают над разработкой устройств микрофлюидной сортировки, которые имеют много преимуществ по сравнению с основными типами сортировки клеток, активируемой флуоресценцией, и методами иммуномагнитной сортировки клеток.

    Активируемый флуоресценцией

    [ редактировать ]
    Основная статья: Проточная цитометрия
    Диаграмма A: Сортировка клеток с помощью флуоресценции для отрицательной селекции.

    Сортировка клеток, активируемая флуоресценцией, также известна как сортировка клеток с помощью проточной цитометрии или широко известна под аббревиатурой FACS, которая является торговой маркой компании Becton Dickinson and Company . При сортировке клеток с активированной флуоресценцией используется проточная цитометрия для разделения клеток на основе морфологических параметров и экспрессии множества внеклеточных и внутриклеточных белков. Этот метод позволяет осуществлять многопараметрическую сортировку клеток и включает инкапсулирование клеток в небольшие капли жидкости, которым избирательно придаются электрические заряды и которые сортируются внешним электрическим полем. Сортировка клеток, активируемая флуоресценцией, имеет несколько систем, которые работают вместе для достижения успешной сортировки интересующих событий. К ним относятся жидкостные, оптические и электростатические системы. Жидкостная система должна обеспечить точно рассчитанный по времени отрыв от потока жидкости небольших однородных капель, чтобы капли, содержащие отдельные ячейки, могли затем отклоняться электростатически. [2] Основан на изобретении Ричарда Свита. [3] Каплеобразование струи жидкости клеточного сортировщика стабилизируется вибрациями ультразвукового преобразователя на выходе из сопла сопла. Возмущения растут экспоненциально и приводят к дроблению струи на капли с точным временем. Интересующая ячейка, которую необходимо отсортировать, измеряется в зоне обнаружения и перемещается вниз по потоку к точке разрыва. Во время отделения капли с клеткой в ​​ней от неповрежденной струи жидкости к струе жидкости подается импульс напряжения, так что капли, содержащие интересующие клетки, могут отклоняться в электрическом поле между двумя отклоняющими пластинами для сортировки. Затем капли улавливаются коллекторными трубками или сосудами, расположенными под отклоняющими пластинами. [2] Сортировка клеток с помощью проточной цитометрии дает очень высокую специфичность по одному или нескольким поверхностным маркерам, но одно ограничение состоит в количестве клеток, которые могут быть обработаны в течение рабочего дня. По этой причине часто рассматривается предварительное обогащение интересующей популяции путем иммуномагнитной сортировки клеток, особенно когда клетки-мишени сравнительно редки и необходимо обработать большую партию клеток. Кроме того, сортировщики клеток для проточной цитометрии представляют собой сложные инструменты, которые обычно используются только хорошо обученным персоналом в учреждениях проточной цитометрии или в хорошо оснащенных лабораториях, и, поскольку они обычно имеют большие размеры, не всегда возможно разместить их внутри биологической безопасности. кабинет . Таким образом, не всегда возможно обеспечить стерильность образцов, а поскольку жидкостные системы можно очищать, но они не являются одноразовыми, существует вероятность перекрестного загрязнения образцов. Еще один аспект, который следует учитывать, заключается в том, что образование капель внутри инструмента может привести к образованию аэрозолей, опасных для оператора при использовании инфекционных образцов. Эти последние соображения имеют особое значение, когда сортировка клеток используется в клинических целях, например, в клеточной терапии, и поэтому ее следует проводить под Условия надлежащей производственной практики (GMP). Исследователи могут использовать различные флуоресцентные красители для создания многоцветных панелей, позволяющих добиться успешной одновременной сортировки нескольких точно определенных типов клеток. Диаграмма A показывает активируемую флуоресценцией сортировку клеток отрицательного отбора клеток (нежелательная группа), а диаграмма B показывает FACS положительного отбора клеток (желаемая группа).

    Диаграмма B: Сортировка клеток с помощью флуоресценции для положительной селекции.

    Флуоресцентные красители для сортировки клеток

    [ редактировать ]

    Флуоресцентные красители могут действовать по-разному. Обычно флуоресцентный краситель возбуждается источником света (лазером) определенной длины волны и излучает свет с более низкой энергией и большей длиной волны. Наиболее распространенные красители действуют путем связывания с антигенами, присутствующими на клетках. Общие целевые антигены представляют собой кластеры дифференцировки (CD). [4] Они специфичны для определенного типа клеток. Если вы можете определить, какой CD представлен на интересующих вас клетках, вы можете окрасить свой образец специфичным для него флуоресцентным красителем и использовать сортировку клеток, активируемую флуоресценцией, для разделения интересующей популяции. Однако существует множество других механизмов действия флуоресцентных красителей.

    Некоторые красители способны диффундировать через мембраны. Воспользовавшись этим свойством красителя, пользователи могут оценить внутриклеточную активность, а также поверхностную экспрессию белков. Например, в мертвых клетках йодид пропидия (PI) может проникать в ядро, где связывается с ДНК. Флуоресцентный сигнал PI можно использовать для количественной оценки содержания ДНК для анализа клеточного цикла или для идентификации мертвых клеток в образце.

    Некоторые флуоресцентные красители можно использовать для характеристики кинетической внутриклеточной активности, а не для фиксации клеток в формальдегиде и потери жизнеспособных клеток. В таблице ниже указаны красители, которые можно использовать для измерения некоторых параметров цитотоксичности, вызванной окислительным стрессом.

    Краситель Параметр Механизм действия Возбуждение/излучение
    DCFH-DA Активные формы кислорода

    (РОС)

    		Деацетилирован до

    2'7'-дихлорфлуоресцин, который реагирует с АФК в радикальных условиях с образованием 2'7-дихлорфлуоресцеина (DCF).

    		488 нм/525 нм
    Rh123 Мембранный потенциал митохондрий

    (ММП)

    		Секвестрируется активными митохондриями 488 нм/525 нм
    Индо-1 утра Уровни кальция Излучает две разные длины волн в зависимости от присутствия ионов кальция. 350 нм/[400 нм/485 нм]
    ПИ Живой/Мертвый Проникает только в мертвые клетки и связывается с ДНК. 488 нм/675 нм

    Эта экспериментальная установка является лишь одним из примеров возможностей проточной цитометрии. В системах FACS эти охарактеризованные клетки затем можно отсортировать и очистить для дальнейших экспериментов.

    Иммуномагнитная сортировка клеток

    [ редактировать ]
    Основная статья: Сортировка клеток, активируемая магнитом

    МАКС

    Иммуномагнитная сортировка клеток также известна как иммуномагнитная сепарация клеток, иммуномагнитное обогащение клеток или сортировка клеток, активируемая магнитом, и широко известна под аббревиатурой MACS, которая является торговой маркой MilteNY GmbH . Иммуномагнитная сортировка клеток основана на разделении гранул, проходящих через магнитное поле. Множество компаний предлагают различные решения для обогащения или истощения клеточных популяций. Иммуномагнитная сортировка клеток представляет собой метод обогащения гетерогенной смеси клеток на основе экспрессии белков (антигенов) на клеточной поверхности. Эта технология основана на прикреплении небольших инертных супрамагнитных частиц к моноклональным антителам, специфичным к антигенам целевой популяции клеток. Клетки, меченные этими конъюгатами антитело-шарики, затем разделяют через колонку, содержащую ферромагнитную матрицу. При приложении магнитного поля к матрице шарики прилипают к матрице внутри колонки, и ячейки, несущие шарики, удерживаются от прохождения. Немеченые клетки могут проходить через матрицу и собираться в проточном режиме. Чтобы элюировать захваченные клетки из колонки, магнитное поле просто удаляют. Таким образом, иммуномагнитная сортировка клеток позволяет использовать различные стратегии положительного обогащения или истощения клеток. [2] Иммуномагнитные шарики маленькие и обычно не мешают последующим анализам, однако в некоторых случаях может потребоваться их удаление. Использование этого метода разделения для увеличения количества клеток не приводит к значительному увеличению времени обработки, а стерильность образца гарантируется, если сортировка клеток выполняется внутри бокса биобезопасности. С другой стороны, этот метод позволяет разделять клетки только на основе одного маркера и не позволяет различать разные уровни экспрессии белка (количественный анализ). Иммуномагнитная сортировка клеток оказалась полезной, в частности, при использовании с культурами NPC (нейральных клеток-предшественников), поскольку ею легче управлять и она наносит минимальный ущерб живым клеткам. [5]

    С культурами NPC особенно трудно работать, поскольку живые клетки мозга чувствительны и имеют тенденцию загрязнять друг друга. [5] Чтобы получить более четкие результаты, лабораториям нужны более чистые материалы, а это означает более чистые линии NPC. [5] Исследование, проведенное в 2019 году (при финансовой поддержке Нью-Йоркского фонда стволовых клеток и Ассоциации лобно-височной дегенерации), показало, что иммуномагнитная сортировка клеток является дешевым и простым способом достижения такой чистоты с минимальным повреждением клеточных линий и, следовательно, с сохранением лучшего качества. клеток, собирая более однородные NPC и увеличивая их шансы найти эффективные методы лечения неврологических расстройств. [5] Они использовали как иммуномагнитный, так и флуоресцентно-активируемый методы для фильтрации CD271- (полезные маркеры мезенхимальных стволовых клеток ) и CD133 + (маркеры раковых стволовых клеток), чтобы сравнить жизнеспособность каждого метода. [5]

    Иммуномагнитная сортировка клеток также использовалась при репродукции (искусственное оплодотворение) и лечении трансплантации сетчатки. [6] [7] В случае вспомогательной репродукции апоптозные сперматозоиды (мертвые или поврежденные клетки) отделяются, поэтому можно собрать больше неапоптотических (нефрагментированных) сперматозоидов и использовать их для увеличения шансов субъекта на фертильность. [6] Этот тип лечения оказался более эффективным, если его проводить повторно, увеличивая количество неапоптотических клеток, присутствующих во время осеменения. [6]

    Исследование, проведенное в 2018 году во Франции (при поддержке нескольких лиц и агентств, в том числе: Института зрения в Париже и Французской ассоциации сетчатки), использовало крыс и метод иммуномагнитной сортировки клеток, чтобы показать, что фоторецепторы (клетки сетчатки, которые реагируют на свет) можно пересадить для лечения слепоты. [7] В этом процессе микрогранулы были прикреплены к ферменту CD73 , чтобы помочь в отделении PR (фоторецепторов) от органоидов сетчатки. [7] Когда антиген CD73+ экспрессировался клетками RCVRN+ (кальций-связывающие белки в глазу), это показало исследователям, что эта комбинация CD73+ и RCVRN+ может использоваться с постмитотическими предшественниками PR для восстановления. [7] Хотя исследование не смогло подтвердить успех на людях, у них есть основа для дальнейших исследований, основанных на успехе спаривания неповрежденных фоторецепторов с антигеном CD73 и трансплантации крысам. [7] Этот успех в разделении и спаривании клеток посредством трансплантации показывает перспективу потенциального лечения заболеваний сетчатки, включая полную слепоту. До сих пор сообщалось только о частичном восстановлении зрения. [7]

    Микрофлюидные устройства

    [ редактировать ]

    Из-за различных ограничений флуоресцентно-активируемых и иммуномагнитных устройств для сортировки клеток появился широкий спектр микрофлюидных устройств для сортировки клеток. Некоторые из них сейчас коммерчески доступны или находятся в стадии коммерческой разработки. В исследованиях конструкций микрожидкостных сортировщиков клеток часто используются методы мягкой литографии с использованием таких материалов, как полидиметилсилоксан (ПДМС).

    Ключевым преимуществом микрофлюидных сортировщиков является возможность выполнять сортировку клеток, активируемую флуоресценцией, в закрытом одноразовом стерильном картридже. Такой закрытый картридж предотвратил бы воздействие на оператора биологических опасностей через капли, испускаемые системами FACS. Другие преимущества включают снижение воздействия на жизнеспособность клеток из-за снижения гидродинамического стресса на клетках; Некоторые опубликованные устройства демонстрируют потенциал многосторонней сортировки, снижения стоимости картриджа за счет недорогих методов производства, более низкого энергопотребления и меньших размеров, при этом некоторые устройства имеют размер кредитной карты. Некоторые из них достигли высокой чистоты и скорости примерно до 50 000 клеток/с. [8] [9] [10] [11]

    Микрожидкостные сортировщики клеток можно разделить на две категории: активные и пассивные. Активные устройства отклоняют отдельные клетки посредством цитометрических измерений клеток, проводимых в реальном времени. Пассивные устройства используют физические различия между клетками в том, как они взаимодействуют с потоком жидкости или поверхностями.

    Активный

    [ редактировать ]

    Активные микрофлюидные сортировщики клеток включают отклонение отдельных клеток после их измерения с использованием цитометрических методов, включая флуоресцентное мечение, рассеяние света и анализ изображений. Отдельные клетки отклоняются либо силой, действующей непосредственно на клетку, либо силой жидкости, окружающей клетки, так что они перетекают в отдельные выходные сосуды.

    В методах отклонения клеток используются несколько видов макроскопических, оптических или МЭМС (микроэлектромеханических систем) приводов для отклонения частицы или объема жидкости внутри микроканала. Известные недавние примеры основаны на приводах на поверхностных акустических волнах . [12] [13] [14] [15] [16] [17] макроскопические актуаторы (такие как пьезоэлектрические актуаторы), соединенные с микроканалами, [18] [19] [20] [21] диэлектрофорез капель, [22] термические приводы пузырьков пара, [23] [24] [25] [26] [27] переходные микровихри, генерируемые термическими приводами паровых пузырьков, [28] оптические манипуляции, [29] и микромеханические клапаны. Самые быстрые из них продемонстрировали скорость сортировки, превышающую 1000/с, а потенциальную максимальную пропускную способность в некоторых случаях приближающуюся к скорости FACS. [30] [31] [32] [33] [34] [35] Активная микрофлюидная сортировка клеток требует такого же цитометрического оборудования, как и сортировка клеток, активируемая флуоресценцией, описанная выше. [36]

    Активные микрофлюидные сортировщики клеток обладают потенциалом масштабирования пропускной способности за счет распараллеливания на кристалле. [37] Самое быстрое опубликованное активное микрофлюидное сортировочное устройство продемонстрировало пропускную способность 160 000/с. [38]

    Пассивный

    [ редактировать ]

    Пассивная сортировка клеток использует поведение жидкости внутри микроканалов для изменения и разделения клеток в зависимости от размера и морфологии. [39] Жидкость в коллоидном растворе подвержена изменению профиля скорости из-за взаимодействия жидкости со стенками канала; ячейки в растворе подвергаются различным силам сопротивления и инерции, которые зависят от размера ячейки и соответственно балансируются в разных местах профиля скорости. [40] В изогнутых микрофлюидных каналах вихри образуются из-за силы Дина, которая локализует частицы разного размера в разных местах поперечного сечения из-за числа Рейнольдса и радиуса кривизны. [41]

    Например, в прямом канале более крупные клетки в коллоидном растворе находятся ближе к центру микроканала, чем клетки меньшего размера, из-за большей силы сопротивления со стороны стенки, которая отталкивает клетку от стенки, и силы градиента сдвига, обусловленной скоростью. профиль, который уравновешивает силу сопротивления стенки и приводит ячейку в равновесие. [42]

    Другие методы разделения клеток на основе антител

    [ редактировать ]

    До того, как сортировка клеток на основе флуоресценции и иммуномагнитная сортировка приобрели популярность, применялось несколько методов разделения и обогащения клеток с использованием антител. [43] К ним относятся разделение клеток, опосредованное антителами и комплементом, полистироловые иммуноаффинные устройства и система CellPro CEPRATE® SC, в которой используются иммобилизованные антитела в пористой колонке. Последний был первым одобренным FDA медицинским устройством для разделения гемопоэтических стволовых клеток .

    Более новый метод разделения клеток с использованием антител - это сортировка клеток, активируемая плавучестью (BACS), это метод разделения, при котором микропузырьки связываются с клетками посредством антител, связывающихся с поверхностью клеток. Затем целевые клетки удаляются из биологического образца посредством флотации. [44]

    Сортировка отдельных ячеек

    [ редактировать ]

    Сортировка отдельных клеток представляет собой метод сортировки гетерогенной смеси клеток на основе внутриклеточных и внеклеточных свойств. Методы отдельных клеток позволяют понять клеточные свойства, которые могут быть неясными или неочевидными. Существует несколько методов сортировки отдельных ячеек:

    Массив микрорафтов обеспечивает быстрый и экономичный метод выделения клеток, анализа клеток с течением времени и создания клональных популяций с уникальной способностью контролировать все внутри- и внеклеточные свойства. [45] Эта система идеально подходит как для адгезивных, так и для неприлипающих типов клеток.

    Одноклеточный метод наблюдения за ответом на внешний раздражитель (в данном случае клеточный ответ на лиганд) был изучен с использованием микрофлюидного устройства с микроканальными клапанами для улавливания одной клетки в камере. Для активации использовалась 23-клапанная система, а для визуализации стимул-ответ использовался флуоресцентный краситель. [46]

    Методы кластеризации одиночных ячеек — это серия статистических методов, разработанных специалистами по обработке данных на основе внутриклеточных данных.характеристики. Этот процесс включает сбор данных Single Cell RNA-Seq; предварительная обработка данных для кластеризации; кластеризация; и оценки кластеризации. Ученые применяют методы машинного обучения (в основном кластерный анализ) к данным одноклеточной РНК-Seq, чтобы разделить клетки на разные категории. Все методы модифицированы для решения проблем в данных RNA-Seq, таких как выпадение генов с низкой экспрессией и неоднозначных клеточных маркеров при наличии технических ошибок. Современные методы включают SC3., [47] ЦИДР., [48] Сёра, а для получения более подробной информации обратитесь к странице Wiki: Кластеризация одноклеточной РНК-Seq.

    Ссылки

    [ редактировать ]
    1. ^ Стивен А. Сопер, Малгожата А. Витек (7 января 2020 г.). «Разделение и сортировка клеток» . Анальная химия . 92 (1): 105–131. дои : 10.1021/acs.analchem.9b05357 . ПМК   7469080 . ПМИД   31808677 .
    2. ^ Перейти обратно: а б с д Артуро Зихлински, Андреа Коссарицца (октябрь 2019 г.). «Руководство по использованию методов проточной цитометрии и клеточной сортировки в иммунологических исследованиях (второе издание)» . Эур Дж Иммунол . 49 (10): 1457–1973. дои : 10.1002/eji.201970107 . ПМК   7350392 . ПМИД   31633216 .
    3. ^ Ричард Дж. Свит, Ричард Дж. Свит. «Регистратор капель жидкости» .
    4. ^ «Человеческий CD и другие клеточные антигены - США» . www.thermofisher.com . Проверено 11 декабря 2018 г.
    5. ^ Перейти обратно: а б с д и Элисон М. Гоут, Кэтрин Р. Боулз (27 марта 2019 г.). «Уменьшение изменчивости нервных клеток-предшественников и повышение чистоты нейрональных культур с использованием магнитно-активируемой сортировки клеток» . ПЛОС ОДИН . 14 (3): e0213374. дои : 10.1371/journal.pone.0213374 . ПМК   6436701 . ПМИД   30917153 .
    6. ^ Перейти обратно: а б с Дирикан, Энвер Керем (2012), «Сортировка человеческих сперматозоидов с помощью магнитной активации», Практическое руководство по экстракорпоральному оплодотворению , Springer New York, стр. 265–272, номер домена : 10.1007/978-1-4419-1780-5_29 , ISBN.  9781441917799
    7. ^ Перейти обратно: а б с д и ж Гальярди, Джулиана; Бен М'Барек, Карим; Шаффиоль, Антуан; Слембрук-Брек, Амели; Конар, Жан-Батист; Нанто, Селин; Рабесандратана, Ориана; Сахель, Хосе-Ален; Дюбель, Йенс; Орье, Гаэль; Райхман, Саша (сентябрь 2018 г.). «Характеристика и трансплантация CD73-позитивных фоторецепторов, выделенных из органоидов сетчатки человека, полученных из ИПСК» . Отчеты о стволовых клетках . 11 (3): 665–680. дои : 10.1016/j.stemcr.2018.07.005 . ПМК   6135113 . ПМИД   30100409 .
    8. ^ Госсетт Д.Р., Уивер В.М., Мах А.Дж., Хур С.С., Це Х.Т., Ли В., Амини Х., Ди Карло Д. (август 2010 г.). «Разделение и сортировка клеток без меток в микрофлюидных системах» . Аналитическая и биоаналитическая химия . 397 (8): 3249–67. дои : 10.1007/s00216-010-3721-9 . ПМЦ   2911537 . ПМИД   20419490 .
    9. ^ Хулспас Р., Вилла-Комарофф Л., Коксал Э., Этьен К., Роджерс П., Таттл М., Корсгрен О., Шарп Дж.К., Берглунд Д. (октябрь 2014 г.). «Очистка регуляторных Т-клеток с использованием полностью закрытой высокоскоростной микрофлюидной системы». Цитотерапия . 16 (10): 1384–9. дои : 10.1016/j.jcyt.2014.05.016 . ПМИД   25065635 .
    10. ^ Шилдс CW , Рейес CD, Лопес GP (март 2015 г.). «Микрофлюидная сортировка клеток: обзор достижений в разделении клеток от уменьшения объема до выделения редких клеток» . Лаборатория на чипе . 15 (5): 1230–49. дои : 10.1039/C4LC01246A . ПМЦ   4331226 . ПМИД   25598308 .
    11. ^ Дин X, Линь С.К., Лэпсли М.И., Ли С., Го X, Чан С.И., Чан И.К., Ван Л., Маккой Дж.П., Хуан Т.Дж. (ноябрь 2012 г.). «Многоканальная сортировка ячеек на основе стоячей поверхностной акустической волны (SSAW)» . Лаборатория на чипе . 12 (21): 4228–31. дои : 10.1039/C2LC40751E . ПМЦ   3956451 . ПМИД   22992833 .
    12. ^ Дин X, Линь С.К., Лэпсли М.И., Ли С., Го X, Чан С.И., Чан И.К., Ван Л., Маккой Дж.П., Хуан Т.Дж. (ноябрь 2012 г.). «Многоканальная сортировка ячеек на основе стоячей поверхностной акустической волны (SSAW)» . Лаборатория на чипе . 12 (21): 4228–31. дои : 10.1039/c2lc40751e . ПМЦ   3956451 . ПМИД   22992833 .
    13. ^ Шмид Л., Вайц Д.А., Франке Т. (7 октября 2014 г.). «Сортировка капель и клеток с помощью акустики: акустический микрофлюидный сортировщик клеток, активируемый флуоресценцией». Лаборатория на чипе . 14 (19): 3710–3718. дои : 10.1039/c4lc00588k . ISSN   1473-0189 . ПМИД   25031157 .
    14. ^ Ма, З., Чжоу, Ю., Коллинз, Диджей, Ай, Ю. (12 сентября 2017 г.). «Сортировка клеток, активируемая флуоресценцией, с помощью сфокусированного акустического луча, движущегося по поверхности». Лаборатория на чипе . 17 (18): 3176–3185. дои : 10.1039/C7LC00678K . ISSN   1473-0189 . ПМИД   28815231 .
    15. ^ Жэнь, Л., Чен, Ю., Ли, П., Мао, З., Хуан, П.-Х., Руфо, Дж., Го, Ф., Ван, Л., Маккой, Дж.П., Левин, С.Дж. , Хуанг, Ти Джей (7 октября 2015 г.). «Высокопроизводительный акустический сортировщик клеток» . Лаборатория на чипе . 15 (19): 3870–3879. дои : 10.1039/c5lc00706b . ISSN   1473-0189 . ПМЦ   4641751 . ПМИД   26289231 .
    16. ^ Шмид Л., Вайц Д.А., Франке Т. (октябрь 2014 г.). «Сортировка капель и клеток с помощью акустики: акустический микрофлюидный сортировщик клеток, активируемый флуоресценцией». Лаборатория на чипе . 14 (19): 3710–8. дои : 10.1039/c4lc00588k . ПМИД   25031157 . S2CID   9893236 .
    17. ^ Рен Л., Чен Ю, Ли П., Мао З., Хуан П.Х., Руфо Дж., Го Ф, Ван Л., Маккой Дж.П., Левин С.Дж., Хуан Т.Дж. (октябрь 2015 г.). «Высокопроизводительный акустический сортировщик клеток» . Лаборатория на чипе . 15 (19): 3870–3879. дои : 10.1039/c5lc00706b . ПМЦ   4641751 . ПМИД   26289231 .
    18. ^ Чо, Ш., Чен, Ч., Цай, Ф.С., Годин, Ж.М., Ло, Ю.-Х. (21 июня 2010 г.). «Сортировка клеток млекопитающих человека с использованием высокоинтегрированного микрофабриката сортировщика клеток, активируемого флуоресценцией (μFACS)» . Лаборатория на чипе . 10 (12): 1567–1573. дои : 10.1039/c000136h . ISSN   1473-0197 . ПМК   3118392 . ПМИД   20379604 .
    19. ^ Ли, К., Ли, Дж., Ким, Х.Х., Тэ, С.-Ю., Ли, А., Чунг, И.-Ю., Пак, Дж. Я., Шунг, К. К. (7 августа 2012 г.). «Микрофлюидная сортировка капель высокочастотным ультразвуковым лучом» . Лаборатория на чипе . 12 (15): 2736–2742. дои : 10.1039/c2lc21123h . ISSN   1473-0189 . ПМК   3400154 . ПМИД   22643737 .
    20. ^ Хулспас Р., Вилла-Комарофф Л., Коксал Э., Этьен К., Роджерс П., Таттл М., Корсгрен О., Шарп Дж. К., Берглунд Д. (октябрь 2014 г.). «Очистка регуляторных Т-клеток с использованием полностью закрытой высокоскоростной микрофлюидной системы». Цитотерапия . 16 (10): 1384–1389. дои : 10.1016/j.jcyt.2014.05.016 . ISSN   1465-3249 . ПМИД   25065635 .
    21. ^ Чо Ш., Чен Ч., Цай Ф.С., Годин Дж.М., Ло Ю.Х. (июнь 2010 г.). «Сортировка клеток млекопитающих человека с использованием высокоинтегрированного микрофабриката сортировщика клеток, активируемого флуоресценцией (microFACS)» . Лаборатория на чипе . 10 (12): 1567–73. дои : 10.1039/c000136h . ПМК   3118392 . ПМИД   20379604 .
    22. ^ Агрести Дж.Дж., Антипов Э., Абате А.Р., Ан К., Роват А.С., Барет Х.К., Маркес М., Клибанов А.М., Гриффитс А.Д., Вайц Д.А. (март 2010 г.). «Сверхвысокопроизводительный скрининг в капельной микрофлюидике для направленной эволюции» . Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 107 (9): 4004–9. Бибкод : 2010PNAS..107.4004A . дои : 10.1073/pnas.0910781107 . ПМК   2840095 . ПМИД   20142500 .
    23. ^ Чен Ю, Чунг А.Дж., Ву Т.Х., Тейтел М.А., Ди Карло Д., Чиу П.Ю. (май 2014 г.). «Импульсная лазерная активация сортировки клеток с трехмерной безоболочной инерционной фокусировкой» . Маленький . 10 (9): 1746–51. дои : 10.1002/smll.201302885 . ПМЦ   4324602 . ПМИД   24536017 .
    24. ^ Ву, Т.-Х., Чен, Ю., Парк, С.-Ю., Хонг, Дж., Теслаа, Т., Чжун, Дж. Ф., Ди Карло, Д., Тейтел, М. А., Чиу, П.- Ю. (2012). «Импульсный лазер запускает высокоскоростной микрофлюидный флуоресцентный сортировщик клеток» . Лаборатория на чипе . 12 (7): 1378–1383. дои : 10.1039/c2lc21084c . ISSN   1473-0197 . ПМЦ   3965373 . ПМИД   22361780 .
    25. ^ Хофеманн Х., Уодл С., Бахтина Н., Кондрашов В., Ванглер Н., Ценгерле Р. (июнь 2012 г.). «Сортировка и лизис одиночных клеток с помощью технологии BubbleJet». Датчики и исполнительные механизмы B: Химические вещества . 168 : 442–445. дои : 10.1016/j.snb.2012.04.005 . ISSN   0925-4005 .
    26. ^ Вайс, К. де, Лю, К., Дуса, А., Веркруйсс, Д., Маджид, Б., Тескан, Д.С., Блашкевич, К., Лу, Дж., Лага, Л. (2017). «Струйный поток с микропаровыми пузырьками для безопасной и высокоскоростной сортировки клеток, активируемой флуоресценцией» . Лабораторный чип . 17 (7): 1287–1296. дои : 10.1039/C6LC01560C . ISSN   1473-0197 . ПМИД   28252674 . Проверено 14 марта 2017 г.
    27. ^ Чен, К.С., Ван, Дж.С., Солгаард, О. (октябрь 2006 г.). «Микромашинный пузырькоструйный сортировщик клеток с несколькими режимами работы». Датчики и исполнительные механизмы B: Химические вещества . 117 (2): 523–529. дои : 10.1016/j.snb.2006.05.011 . ISSN   0925-4005 .
    28. ^ Причард, Р.Х., Жуков, А.А., Фуллертон, Дж.Н., Уотт, Эй.Дж., Хуссейн, Ф., Кур, М.Ф., Баштанов, М.Э., Голд, Р.Д., Хейлс, А., Бэнэм-Холл, Э., Роджерс, С.С. ( 18 июня 2019 г.). «Сортировка клеток, приводимая в действие микрожидкостным инерционным вихрем» . Лаборатория на чипе . 19 (14): 2456–2465. дои : 10.1039/C9LC00120D . ISSN   1473-0189 . ПМИД   31210196 . S2CID   190538792 .
    29. ^ Чен Ю, Чунг А.Дж., Ву Т.Х., Тейтел М.А., Ди Карло Д., Чиу П.Ю. (май 2014 г.). «Импульсная лазерная активация сортировки клеток с трехмерной безоболочной инерционной фокусировкой» . Маленький . 10 (9): 1746–51. дои : 10.1002/smll.201302885 . ПМЦ   4324602 . ПМИД   24536017 .
    30. ^ Вайс, К. де, Лю, К., Дуса, А., Веркруйсс, Д., Маджид, Б., Тескан, Д.С., Блашкевич, К., Лу, Дж., Лага, Л. (2017). «Струйный поток с микропаровыми пузырьками для безопасной и высокоскоростной сортировки клеток, активируемой флуоресценцией» . Лабораторный чип . 17 (7): 1287–1296. дои : 10.1039/C6LC01560C . ISSN   1473-0197 . ПМИД   28252674 . Проверено 14 марта 2017 г.
    31. ^ Ма, З., Чжоу, Ю., Коллинз, Диджей, Ай, Ю. (12 сентября 2017 г.). «Сортировка клеток, активируемая флуоресценцией, с помощью сфокусированного акустического луча, движущегося по поверхности». Лаборатория на чипе . 17 (18): 3176–3185. дои : 10.1039/C7LC00678K . ISSN   1473-0189 . ПМИД   28815231 .
    32. ^ Ву, Т.-Х., Чен, Ю., Парк, С.-Ю., Хонг, Дж., Теслаа, Т., Чжун, Дж. Ф., Ди Карло, Д., Тейтел, М. А., Чиу, П.- Ю. (2012). «Импульсный лазер запускает высокоскоростной микрофлюидный флуоресцентный сортировщик клеток» . Лаборатория на чипе . 12 (7): 1378–1383. дои : 10.1039/c2lc21084c . ISSN   1473-0197 . ПМЦ   3965373 . ПМИД   22361780 .
    33. ^ Чо, Ш., Чен, Ч., Цай, Ф.С., Годин, Ж.М., Ло, Ю.-Х. (21 июня 2010 г.). «Сортировка клеток млекопитающих человека с использованием высокоинтегрированного микрофабриката сортировщика клеток, активируемого флуоресценцией (μFACS)» . Лаборатория на чипе . 10 (12): 1567–1573. дои : 10.1039/c000136h . ISSN   1473-0197 . ПМК   3118392 . ПМИД   20379604 .
    34. ^ Шмид Л., Вайц Д.А., Франке Т. (7 октября 2014 г.). «Сортировка капель и клеток с помощью акустики: акустический микрофлюидный сортировщик клеток, активируемый флуоресценцией». Лаборатория на чипе . 14 (19): 3710–3718. дои : 10.1039/c4lc00588k . ISSN   1473-0189 . ПМИД   25031157 .
    35. ^ Жэнь, Л., Чен, Ю., Ли, П., Мао, З., Хуан, П.-Х., Руфо, Дж., Го, Ф., Ван, Л., Маккой, Дж.П., Левин, С.Дж. , Хуанг, Ти Джей (7 октября 2015 г.). «Высокопроизводительный акустический сортировщик клеток» . Лаборатория на чипе . 15 (19): 3870–3879. дои : 10.1039/c5lc00706b . ISSN   1473-0189 . ПМЦ   4641751 . ПМИД   26289231 .
    36. ^ Шилдс CW, Охири К.А., Сотт Л.М., Лопес Г.П. (март 2017 г.). «Перевод микрофлюидики: технологии разделения клеток и их барьеры для коммерциализации» . Цитометрия Часть Б. 92 (2): 115–125. дои : 10.1002/cyto.b.21388 . ПМК   5149119 . ПМИД   27282966 .
    37. ^ Хулспас Р., Вилла-Комарофф Л., Коксал Э., Этьен К., Роджерс П., Таттл М., Корсгрен О., Шарп Дж. К., Берглунд Д. (октябрь 2014 г.). «Очистка регуляторных Т-клеток с использованием полностью закрытой высокоскоростной микрофлюидной системы». Цитотерапия . 16 (10): 1384–1389. дои : 10.1016/j.jcyt.2014.05.016 . ISSN   1465-3249 . ПМИД   25065635 .
    38. ^ Жуков А.А., Причард Р.Х., Уизерс М.Дж., Хейлз Т., Голд Р.Д., Хейс К., Кур М.Ф., Хусейн Ф., Роджерс С.С. (апрель 2021 г.). «Чрезвычайно высокопроизводительная параллельная микрожидкостная сортировка клеток с вихревым приводом» . Микромашины . 12 (4). Многопрофильный институт цифровых издательств: 389. doi : 10.3390/mi12040389 . ISSN   2072-666X . ПМК   8066247 . ПМИД   33918161 .
    39. ^ Чжоу Дж., Каспер С., Папаутский И. (ноябрь 2013 г.). «Улучшенное улавливание частиц в зависимости от размера с помощью микровихрей» . Микрофлюидика и нанофлюидика . 15 (5): 611–623. дои : 10.1007/s10404-013-1176-y . ПМК   3810988 . ПМИД   24187531 .
    40. ^ Мартель Дж. М., Тонер М. (июль 2014 г.). «Инерционная фокусировка в микрофлюидике» . Ежегодный обзор биомедицинской инженерии . 16 (1): 371–96. doi : 10.1146/annurev-bioeng-121813-120704 . ПМЦ   4467210 . ПМИД   24905880 .
    41. ^ Мартель Дж. М., Тонер М. (26 ноября 2013 г.). «Фокусировка частиц в изогнутых микрофлюидных каналах» . Научные отчеты . 3 : 3340. Бибкод : 2013NatSR...3E3340M . дои : 10.1038/srep03340 .
    42. ^ Гейслингер Т.М., Франке Т. (июнь 2014 г.). «Гидродинамический подъем везикул и эритроцитов в потоке - от Фореуса и Линдквиста до микрофлюидной сортировки клеток». Достижения в области коллоидной и интерфейсной науки . 208 : 161–76. дои : 10.1016/j.cis.2014.03.002 . ПМИД   24674656 .
    43. ^ Ректенвальд, Д. (4 ноября 1997 г.). Методы разделения клеток и их применение . ЦРК Пресс. ISBN  978-0-8247-9864-2 .
    44. ^ «Терминология, использование, методы и технологии разделения клеток» . Академия наук о жизни . Проверено 4 мая 2022 г.
    45. ^ «Система Изорафт» (сайт) . Клеточные микросистемы . Проверено 19 марта 2013 г.
    46. ^ Тан С.Дж., Ки М.З., Матуру А.С., Буркхолдер В.Ф., Джесутасан С.Дж. (08 ноября 2013 г.). «Микрофлюидное устройство для сортировки клеток на основе динамической реакции на стимул» . ПЛОС ОДИН . 8 (11): е78261. Бибкод : 2013PLoSO...878261T . дои : 10.1371/journal.pone.0078261 . ПМЦ   3826715 . ПМИД   24250795 .
    47. ^ Киселев В., Киршнер К., Шауб М. и др. (2017). «SC3: консенсусная кластеризация данных секвенирования одноклеточной РНК» . Природные методы . 483 (486): 483–486. дои : 10.1038/nmeth.4236 . ПМК   5410170 . ПМИД   28346451 .
    48. ^ Лин П., Труппа М., Хо JW (2017). «CIDR: сверхбыстрая и точная кластеризация посредством вменения данных секвенирования одноклеточной РНК» . Геном Биол . 18 (59): 59. дои : 10.1186/s13059-017-1188-0 . ПМЦ   5371246 . ПМИД   28351406 .
    [ редактировать ]
    Ресурсы библиотеки о
    Сортировка ячеек
    Retrieved from "https://en.wikipedia.org/w/index.php?title=Cell_sorting&oldid=1188074964"
    Arc.Ask3.Ru: конец переведенного документа.
    Arc.Ask3.Ru
    Номер скриншота №: 0f2cee7ff9855563cbe2a04d5f01b283__1701570180
    URL1:https://arc.ask3.ru/arc/aa/0f/83/0f2cee7ff9855563cbe2a04d5f01b283.html
    Заголовок, (Title) документа по адресу, URL1:
    Cell sorting - Wikipedia
    Данный printscreen веб страницы (снимок веб страницы, скриншот веб страницы), визуально-программная копия документа расположенного по адресу URL1 и сохраненная в файл, имеет: квалифицированную, усовершенствованную (подтверждены: метки времени, валидность сертификата), открепленную ЭЦП (приложена к данному файлу), что может быть использовано для подтверждения содержания и факта существования документа в этот момент времени. Права на данный скриншот принадлежат администрации Ask3.ru, использование в качестве доказательства только с письменного разрешения правообладателя скриншота. Администрация Ask3.ru не несет ответственности за информацию размещенную на данном скриншоте. Права на прочие зарегистрированные элементы любого права, изображенные на снимках принадлежат их владельцам. Качество перевода предоставляется как есть. Любые претензии, иски не могут быть предъявлены. Если вы не согласны с любым пунктом перечисленным выше, вы не можете использовать данный сайт и информация размещенную на нем (сайте/странице), немедленно покиньте данный сайт. В случае нарушения любого пункта перечисленного выше, штраф 55! (Пятьдесят пять факториал, Денежную единицу (имеющую самостоятельную стоимость) можете выбрать самостоятельно, выплаичвается товарами в течение 7 дней с момента нарушения.)