Клонирование в разведении
Клонирование разбавлением или клонирование путем лимитирующего разведения [ 1 ] [ 2 ] описывает процедуру получения популяции моноклональных клеток, исходя из поликлональной массы клеток. Это достигается путем создания серии возрастающих разведений родительской (поликлональной) культуры клеток. родительских Готовят суспензию клеток. Затем делают соответствующие разведения в зависимости от количества клеток в исходной популяции, а также жизнеспособности и характеристик клонируемых клеток. После получения окончательных разведений аликвоты суспензии высевают на чашки. [ 1 ] или помещают в колодцы [ 2 ] и инкубировали. Если все работает правильно, будет создана колония моноклональных клеток. Приложения для процедуры включают клонирование паразитов , [ 3 ] Т-клетки , [ 4 ] трансгенные клетки, [ 5 ] макрофаги . [ 6 ] и гемопоэтические стволовые клетки . [ 7 ]
Ссылки
[ редактировать ]- ^ Перейти обратно: а б Фрешни, Р. Ян (2010). Культура клеток животных: руководство по базовой технике и специализированным приложениям (6-е изд.). Хобокен, Нью-Джерси: Уайли-Блэквелл. стр. 208–211. ISBN 9780470528129 .
- ^ Перейти обратно: а б Дэвис, Джон М., изд. (2011). Культура клеток животных . Оксфорд: Уайли-Блэквелл. стр. 239–240 . ISBN 978047066658-6 .
- ^ Баттерворт, Элис С; Робертсон, Алан Дж; Хо, Мэй-Фонг; Гаттон, Мишель Л; Маккарти, Джеймс С.; Тренхолм, Кэтрин Р. (2011). «Улучшенный метод проведения анализов с предельным разведением для клонирования in vitro паразитов Plasmodium falciparum» . Журнал малярии . 10 (1): 95. дои : 10.1186/1475-2875-10-95 . ISSN 1475-2875 . ПМК 3089786 . ПМИД 21496350 .
- ^ Раут, Намита; Еще, Джеймс Дж.; Юэ, Саймон; Коннол, Мишель; Эксли, Марк А.; Каур, Амитиндер (2 июля 2010 г.). «Гетерогенность фенотипа и функции CD8+ и CD4/CD8 двойных негативных Т-клеток естественных киллеров у сажистых мангабеев» . Журнал медицинской приматологии . 39 (4): 224–234. дои : 10.1111/j.1600-0684.2010.00431.x . ПМК 2904642 . ПМИД 20618588 .
- ^ Лилиенфельд, Бенджамин Г.; Экипаж, Марк Д.; Форте, Пьетро; Бауманн, Беттина С.; Зеебах, Йорг Д. (1 марта 2007 г.). «Трансгенная экспрессия одноцепочечного тримера HLA-E защищает эндотелиальные клетки свиньи от цитотоксичности, опосредованной естественными киллерными клетками человека». Ксенотрансплантация . 14 (2): 126–134. дои : 10.1111/j.1399-3089.2007.00378.x . ПМИД 17381687 . S2CID 1433274 .
- ^ Секи, Ёсихиро; Сузуки, Сатоши О.; Масуи, Кента; Харада, Сиори; Накамура, Сейджи; Канба, Сигэнобу; Иваки, Тору (1 июня 2011 г.). «Простой и высокопроизводительный метод приготовления культур микроглии крыс с использованием пластиковой пленки Aclar». Невропатология . 31 (3): 215–222. дои : 10.1111/j.1440-1789.2010.01163.x . ПМИД 21092060 . S2CID 26016732 .
- ^ Зибург, Ганс Б; Чо, Ребекка Х; Мюллер-Зибург, Криста Э (2002). «Анализ предельных разведений для оценки частоты гемопоэтических стволовых клеток: неопределенность и значимость» . Эксп Гематол . 39 (12): 1436–1443. doi : 10.1016/s0301-472x(02)00963-3 – через ISEH.
Внешние ссылки
[ редактировать ]- Роберт Сташевски «Клонирование путем предельного разведения: улучшенная оценка того, что интересная культура является моноклональной» [1]
- Джон А. Райан «Клонирование клеток путем серийного разведения в 96-луночных планшетах».
- Вилма Мальдонадо, Хорхе Мелендес-Зайгла «Модифицированный метод клонирования прикрепившихся клеток млекопитающих».
- «Клонирование путем предельного разведения». [ постоянная мертвая ссылка ]
- «Клонирование путем ограничения разведения».
- Нэнси Донаки «Клонирование путем ограничения разведения гибридомы».