Реакция амплификации никующего фермента

Реакция амплификации никелевого фермента (NEAR) — это метод in vitro, амплификации ДНК аналогичный полимеразной цепной реакции (ПЦР). NEAR является изотермическим, реплицируя ДНК при постоянной температуре с использованием полимеразы (и никующего фермента ) для экспоненциальной амплификации ДНК в диапазоне температур от 55 ° C до 59 ° C.

Одним из недостатков ПЦР является то, что на раскручивание двухцепочечной ДНК под действием тепла в одиночные нити требуется время (процесс, называемый денатурацией ). Это приводит к тому, что время амплификации обычно составляет тридцать минут или более для получения значительного количества амплифицированных продуктов. ^{[ 1 ]}^{[ циклическая ссылка ]}

Потенциальными преимуществами NEAR перед ПЦР являются повышенная скорость и более низкие требования к энергии, характеристики, которые являются общими с другими схемами изотермической амплификации. ^{[ 2 ]} Основным недостатком NEAR по сравнению с ПЦР является то, что образование неспецифических продуктов амплификации является распространенной проблемой при изотермических реакциях амплификации. ^{[ 3 ]}

В реакции NEAR используются встречающиеся в природе или сконструированные эндонуклеазы, которые разрывают цепь только на одной цепи сайта расщепления двухцепочечной ДНК. Способность некоторых из этих ферментов катализировать изотермическую амплификацию ДНК была раскрыта, но не заявлена в патентах, выданных на сами ферменты. ^{[ 4 ]}^{[ 5 ]}

Ссылки

^ Полимеразная цепная реакция
^ Биосенсоры 2013, 3, 18-43; дои: 10.3390/bios3010018
^ Биохимия. 23 сентября 2008 г.; 47(38): 9987-99. дои: 10.1021/bi800746p.
^ Патент США 6 191 267. 20 февраля 2001 г.
^ Патент США 6660475. 9 декабря 2003 г.

Заявка на патент США 20090081670. 26 марта 2009 г. РЕАКЦИЯ НИКИРУЮЩЕГО И РАСШИРЯЮЩЕГО УСИЛЕНИЯ ДЛЯ ЭКСПОНЕНЦИАЛЬНОГО УСИЛЕНИЯ НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ.

Эта по биохимии статья незавершена . Вы можете помочь Википедии, расширив ее .

[1] Полимеразная цепная реакция

[2] Биосенсоры 2013, 3, 18-43; дои: 10.3390/bios3010018

[3] Биохимия. 23 сентября 2008 г.; 47(38): 9987-99. дои: 10.1021/bi800746p.

[4] Патент США 6 191 267. 20 февраля 2001 г.

[5] Патент США 6660475. 9 декабря 2003 г.

[ 1 ]

[ 2 ]

[ 3 ]

[ 4 ]

[ 5 ]