Диагностическая электронная микроскопия
Трансмиссионный электронный микроскоп (ТЕМ) используется в качестве важного диагностического инструмента для скрининга тканей человека при большом увеличении и высоком разрешении (ультраструктурный уровень), часто в сочетании с другими методами, особенно световой микроскопией и методами иммунофлуоресценции. Впервые TEM широко использовался для этой цели в 1980-х годах, особенно для выявления маркеров клеточной дифференцировки для выявления опухолей и при заболеваниях почек . Методы иммуномаркирования в настоящее время обычно используются вместо TEM для диагностики опухолей, но этот метод сохраняет решающую роль в диагностике заболеваний почек и ряда других состояний. Одним из примеров является первичная цилиарная дискинезия (ПЦД), редкая цилиопатия , которая влияет на действие ресничек . TEM-изображения цилиарных аксонем исследуются с помощью TEM, и аномалии структуры в некоторых случаях могут обеспечить положительный диагноз. [1]
В частности, ТЭМ следует использовать в диагностических целях, когда она: (1) предоставляет полезную (дополнительную) информацию в контексте тщательно продуманного дифференциального диагноза ; (2) обеспечивает «улучшенную» диагностику, что приводит к разработке более эффективных стратегий лечения и; (3) является эффективным по времени и затратам по сравнению с альтернативными методами. В диагностических целях твердые ткани готовят к ТЭМ так же, как и другие биологические ткани: их фиксируют в глутаровом альдегиде и четырехокисье осмия, затем обезвоживают и заливают в эпоксидную смолу . Блок эпоксидной смолы обрезают и целевую ткань выбирают с помощью светового микроскопа, просматривая полутонкие срезы, окрашенные толуидиновым синим. Затем блок повторно обрезается и на конкретной области наблюдения делается ультратонкий срез, предпочтительно с использованием алмазного ножа. Ультратонкие срезы собираются на медных сетках толщиной 3 мм и окрашиваются ацетатом уранила и цитратом свинца, чтобы сделать содержимое ткани электронно-плотным (и, таким образом, видимым в электронном микроскопе). ). [2]
Ссылки
[ редактировать ]- ^ Шумарк, Амелия; Бун, Мике; Броххаузен, Кристоф; Букови-Биерилло, Зузанна; Санти, Мария М. Де; Гоггин, Патрисия; Гриффин, Пол; Гегеле, Ричард Г.; Херст, Роберт А.; Ли, Маргарет В.; Луптон, Элисон; Маккенни, Карен; Омран, Хеймут; Паш, Жан-Клод; Пинто, Андрея (01 апреля 2020 г.). «Международное консенсусное руководство по сообщению о результатах трансмиссионной электронной микроскопии в диагностике первичной цилиарной дискинезии (критерии BEAT PCD TEM)» . Европейский респираторный журнал . 55 (4). дои : 10.1183/13993003.00725-2019 . ISSN 0903-1936 . ПМИД 32060067 .
- ^ Вудс А.Э., Стерлинг Дж.В. 2008. Электронная микроскопия. В книге «Теория и практика гистологических методов» . Эдс, Бэнкрофт Дж. Д. и Гэмбл М., 6-е издание. Черчилль Ливингстон: страницы 601–640.
- ^ Стерлинг, Джон; Карри, Алан; Эйден, Брайан (2013). Диагностическая электронная микроскопия. Практическое руководство по интерпретации и технике (1-е изд.). Чичестер, Великобритания: ISBN John Wiley & Sons Ltd. 978-1-119-97399-7 .