Маркировка белка TimeSTAMP

TimeSTAMP (метка, специфичная для времени для измерения возраста белков) — это метод, изобретенный Майклом З. Линем в лаборатории Роджера Цяня в Калифорнийского университета Сан-Диего в 2008 году. Это метод, который позволяет специфически маркировать вновь синтезированные копии. генетически меченного белка .

Принцип метода TimeSTAMP

Метод TimeSTAMP для мечения вновь синтезированных представляющих интерес белков основан на лекарственно-зависимом сохранении эпитопных меток. ^{[ 1 ]}

В этом методе метка присутствует на всех белках, которые синтезируются после однократного введения низкомолекулярного препарата. Для достижения этой цели включается специфическая протеазная активность, придающая эпитопной метке поведение самоудаления. Затем используется соответствующий ингибитор протеазы , чтобы заблокировать удаление метки. В результате будут помечены только те белки, которые синтезируются после применения ингибитора.

Последующий вариант TimeSTAMP позволяет сохранять метки флуоресцентного белка в зависимости от лекарств. ^{[ 2 ]}

Применение техники TimeSTAMP

Поскольку метод TimeSTAMP может обеспечить контролируемое по времени мечение вновь синтезированных представляющих интерес белков даже в толстых тканях или интактных животных и обеспечить чувствительное и специфическое обнаружение, можно изучить распределение вновь синтезированного белка в живом животном.

Ссылки

^ Лин, МЗ; Гленн, Дж. С.; Цянь, Р.Ю. (2008). «Управляемая лекарствами метка для визуализации вновь синтезированных белков в клетках и целых животных» . Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 105 (22): 7744–9. дои : 10.1073/pnas.0803060105 . ПМК 2402386 . ПМИД 18511556 .
^ Бутко, МТ; Ян, Дж.; Гэн, Ю.; Ким, HJ; Чон, Нидерланды; Шу, Х.; Макки, MR; Эллисман, Миннесота; Цянь, Республика Корея; Лин, МЗ (2012). «Флуоресцентные и фотоокисляющие метки TimeSTAMP отслеживают судьбу белков в световой и электронной микроскопии» . Природная неврология . 15 (12): 1742–51. дои : 10.1038/nn.3246 . ПМК 3509268 . ПМИД 23103964 .

Внешние ссылки

Сайт лаборатории Цянь

[1] Лин, МЗ; Гленн, Дж. С.; Цянь, Р.Ю. (2008). «Управляемая лекарствами метка для визуализации вновь синтезированных белков в клетках и целых животных» . Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 105 (22): 7744–9. дои : 10.1073/pnas.0803060105 . ПМК 2402386 . ПМИД 18511556 .

[2] Бутко, МТ; Ян, Дж.; Гэн, Ю.; Ким, HJ; Чон, Нидерланды; Шу, Х.; Макки, MR; Эллисман, Миннесота; Цянь, Республика Корея; Лин, МЗ (2012). «Флуоресцентные и фотоокисляющие метки TimeSTAMP отслеживают судьбу белков в световой и электронной микроскопии» . Природная неврология . 15 (12): 1742–51. дои : 10.1038/nn.3246 . ПМК 3509268 . ПМИД 23103964 .

[ 1 ]

[ 2 ]