Гомогенизация (биология)
Гомогенизация в клеточной биологии или молекулярной биологии — это процесс, при котором различные фракции биологического образца становятся равными по составу. Это может быть признаком заболевания в гистопатологии или преднамеренным процессом в исследовании: гомогенизированный образец имеет одинаковый состав во всем, так что удаление фракции не меняет общий молекулярный состав оставшегося образца и идентичен фракции. удаленный. За индуцированной гомогенизацией в биологии часто следует молекулярная экстракция и различные аналитические методы, включая ELISA и вестерн-блоттинг. [ 1 ]
Методы
[ редактировать ]Гомогенизацию ткани в растворе часто проводят одновременно с лизисом клеток . Однако, чтобы предотвратить лизис, ткань (или коллекцию клеток, например, из клеточной культуры ) можно хранить при температуре немного выше нуля, чтобы предотвратить аутолиз , и в изотоническом растворе, чтобы предотвратить осмотическое повреждение. [ 2 ]
Если возможно замораживание ткани, криогомогенизацию можно проводить в «сухих» условиях, и этот метод часто является методом выбора, когда желательно собрать несколько различных молекулярных классов (например, белков и РНК ) из одного образца или комбинированного набора образцов. проб или когда желательно долгосрочное хранение части пробы. Криогомогенизацию можно проводить с использованием переохлажденной ступки и пестика (классический подход), или ткань можно гомогенизировать, измельчив ее в мелкий порошок внутри чистого пластикового пакета, прислоненного к переохлажденному твердому металлическому блоку. [ 3 ] (недавно разработанный и более эффективный метод).
Для выделения содержимого грамположительных бактерий применяют гомогенизацию под высоким давлением , поскольку эти клетки исключительно устойчивы к лизису, и ее можно сочетать с высокотемпературной стерилизацией. [ 4 ]
Гомогенизация Даунса — метод, подходящий для мягких тканей млекопитающих, а лизис клеток млекопитающих также был продемонстрирован с помощью центрифугирования. [ 5 ]
Ссылки
[ редактировать ]- ^ Шмидт С.Д., Никсон Р.А., Мэтьюз П.М. (2012). «Обработка тканей перед анализом белков и метаболитов, связанных с болезнью Альцгеймера, включая Aβ». Амилоидные белки . Методы молекулярной биологии. Том. 849. стр. 493–506. дои : 10.1007/978-1-61779-551-0_33 . ISBN 978-1-61779-550-3 . ПМИД 22528111 .
- ^ Чанг, Та-Юань; Лиманек, Джеймс С.; Чанг, Кэтрин С.И. (1 сентября 1981 г.). «Простая и эффективная процедура быстрой гомогенизации культивируемых клеток животных, выращенных в монослое». Аналитическая биохимия . 116 (2): 298–302. дои : 10.1016/0003-2697(81)90360-2 . ПМИД 6119045 .
- ^ фон Циглер, Лукас М.; Сааб, Бечара Дж.; Мансуи, Изабель М. (27 марта 2013 г.). «Простой и быстрый метод криогомогенизации тканей, позволяющий проводить разнообразную молекулярную экстракцию». Журнал методов нейробиологии . 216 (2): 137–41. doi : 10.1016/j.jneumeth.2013.03.005 . ПМИД 23541735 . S2CID 34417825 .
- ^ Вуйтак, Эльке Ю; Дильс, Энн М.Дж.; Михилс, Крис В. (1 августа 2002 г.). «Бактериальная инактивация путем гомогенизации под высоким давлением и высокого гидростатического давления». Международный журнал пищевой микробиологии . 77 (3): 205–212. дои : 10.1016/S0168-1605(02)00054-5 . ПМИД 12160080 .
- ^ Сингх, Каустуб; Гупта, Анкур; Бюхнер, Абель Джон; Ибис, Фатма; Пронк, Иоахим В.; Тэм, Дэниел; Эрал, Гусейн Бурак (1 июля 2019 г.). «Анализ центробежной гомогенизации и ее применения для эмульгирования и механического лизиса клеток» . Журнал коллоидной и интерфейсной науки . 547 : 127–135. дои : 10.1016/j.jcis.2019.03.036 . ПМИД 30952074 . S2CID 96448552 .