Использование камеры
(1) эпителиальная ткань
(2) две полукамеры с раствором Рингера
(3)(4) Мосты Агара-Рингера
(5) насыщенный раствор KCl-AgCl
(6) переменный источник постоянного тока
(7) амперметр
(8) насыщенный KCl-каломельный электрод
(9) вольтметр
Камера Уссинга — это прибор для измерения свойств эпителиальных мембран. Он может обнаруживать и количественно оценивать транспортные и барьерные функции живой ткани. Камера Уссинга была изобретена датским зоологом и физиологом Хансом Хенриксеном Уссингом в 1946 году. [1]
Этот метод используется для измерения тока короткого замыкания как индикатора чистого транспорта ионов, происходящего через эпителий . Камеры Уссинга используются для измерения транспорта ионов в нативных тканях , таких как слизистая оболочка кишечника , и в монослое клеток, выращенных на проницаемых подложках.
Функция
[ редактировать ]Камера Уссинга представляет собой систему для измерения транспорта ионов, питательных веществ и лекарств через различные эпителиальные ткани. [2] (хотя может давать ложноотрицательные результаты для липофильных веществ [3] ). Он состоит из двух половин, разделенных эпителием (листом слизистой оболочки или монослоем эпителиальных клеток, выращенных на проницаемых подложках). Эпителии имеют полярную природу, т. е. имеют апикальную или слизистую сторону и базолатеральную или серозную сторону. Камера Уссинга может изолировать апикальную сторону от базолатеральной стороны. Две полукамеры заполнены равными количествами симметричного раствора Рингера для устранения химических, механических или электрических движущих сил. Транспорт ионов происходит через любой эпителий. Транспорт может быть в любом направлении. Транспорт ионов создает разность потенциалов (разность напряжений) в эпителии. Напряжение измеряется с помощью двух электродов напряжения , расположенных рядом с тканью/эпителием. Это напряжение нейтрализуется путем подачи тока с использованием двух других токовых электродов, расположенных вдали от эпителия. Этот ток короткого замыкания (Isc) является мерой чистого переноса ионов.
Измерению транспорта ионов в эпителии помогают камеры Уссинга. Напряжение, возникающее в результате переноса ионов, легко точно измерить. Эпителий перекачивает ионы с одной стороны на другую, и ионы просачиваются обратно через так называемые плотные соединения, расположенные между эпителиальными клетками. Для измерения транспорта ионов применяется внешний ток. Простое отмена напряжения занижает истинное значение. Это исправляется коротким замыканием на электродах измерения напряжения. Необходимо учитывать сопротивление между электродами внешнего напряжения. Isc недооценивает транспорт ионов: ошибка может достигать 10 раз. Тип камер, предложенный Уссингом, дает большие ошибки. Эту ошибку часто оценивают путем измерения напряжения без присутствия ткани, что приводит к неопределенным значениям. Лучшие методы включают использование переменного тока в форме тока извилистой формы с использованием нескольких частот, прямоугольных импульсов, резких импульсов и случайного шума. [1]
Типы
[ редактировать ]Основными типами камерных систем Уссинга являются: [4] [5]
- Классическая камерная система (по проекту Уссинга).
- Автономная камерная система (полный аппарат в одном блоке)
- Многоканальная система камер (от 2 до 24 независимых камер вместе взятых)
Ссылки
[ редактировать ]- ^ Jump up to: а б Проект Ussing Pulse (goto.glocalnet.net)
- ^ Руководство по исследованиям кишечника мышей в камере Уссинга (Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. Июнь 2009 г.; 296 (6): G1151–G1166. Опубликовано в Интернете 2 апреля 2009 г.)
- ^ Итин, Константин; Бараш, Динора; Домб, Авраам; Хоффман, Амнон (2020). «Длительная пероральная трансмукозная доставка высоколипофильного препарата каннабидиола». Инт Джей Фарм . 581 : 119276. doi : 10.1016/j.ijpharm.2020.119276 . ПМИД 32243971 . S2CID 214785913 .
- ^ Системы камер Уссинга (harvardapparatus.com) (PDF)
- ^ Камерные системы Уссинга (физиологические инструменты.com)