ЕвроФлоу

Консорциум EuroFlow был основан в 2005 году как проект, финансируемый 2U-FP6, и запущен весной 2006 года. Первоначально EuroFlow состоял из 18 диагностических исследовательских групп и двух малых и средних предприятий (малых/средних предприятий) из восьми разных европейских стран, обладающих взаимодополняющими знаниями и навыками в области область проточной цитометрии и иммунофенотипирования . В 2012 году оба МСП вышли из проекта, и он получил полную научную независимость. Целью консорциума EuroFlow является внедрение инноваций и стандартизация проточной цитометрии, что приведет к глобальному улучшению и прогрессу в диагностике гематологических злокачественных новообразований и индивидуализации лечения.

Фон

С 90-х годов иммунофенотипирование (окрашивание клеток антителами, конъюгированными с флуорохромами и обнаружение с помощью проточной цитометрии) стало предпочтительным методом диагностики гематологических злокачественных новообразований . Преимуществами этого метода являются скорость и простота, возможность измерения более 6 параметров одновременно, точная фокусировка на злокачественной популяции, а также широкая применимость в диагностике. Поскольку наблюдается большой прогресс в разработке антител , флуорохромов и многоцветных цифровых проточных цитометров, встал вопрос о том, как интерпретировать цитометрические данные и как добиться сопоставимых результатов между учреждениями. Несмотря на то, что был достигнут консенсус в отношении рекомендаций и руководств, стандартизация была лишь частичной, поскольку не учитывались различные клоны антител, флуорохромы и их оптимальные комбинации, а также подготовка образцов. По этой причине цитометрия воспринимается как метод, сильно зависящий от уровня знаний и имеющий ограниченную воспроизводимость в многоцентровых исследованиях.

Цели Еврофлоу

Эти цели были изложены в журнале Leukemia в 2012 году. ^{[ 1 ]}

Разработка и оценка новых антител
Создание новой технологии иммуногранульного анализа.
Разработка новых программных инструментов, а затем новые подходы к анализу для распознавания сложных моделей иммунофенотипов.
Разработка новых многоцветных протоколов и стандартных операционных процедур (СОП)
Разработка и стандартизация быстрой, точной и высокочувствительной проточной цитометрии

Достижения

За прошедшие несколько лет EuroFlow достигла большинства своих целей. восьмицветные панели для диагностики, классификации и наблюдения за гематологическими злокачественными новообразованиями . Были созданы ^{[ 2 ]} Панели, состоящие из пробирок для скрининга и пробирок для дополнительной характеристики, основаны на опыте и знаниях из литературы, но в дальнейшем оптимизированы и протестированы в нескольких исследовательских центрах на больших коллекциях образцов, проверяющих выбор флуорохромов и стандартизацию настроек приборов и СОП . ^{[ 3 ]} Клоны антител, флуорохромы и другие реагенты разных компаний прошли детальное тестирование и сравнение. Одновременно было разработано новое программное обеспечение для анализа более сложных и обширных файлов данных, способное проводить многомерное статистическое сравнение нормальных образцов данных и образцов пациентов. ^{[ 4 ]}^{[ 5 ]} Также были разработаны новые клоны антител против тщательно отобранных эпитопов белков , участвующих в хромосомных транслокациях, для обнаружения наиболее частых слитых белков при остром лейкозе и хроническом миелолейкозе . Также было внедрено обнаружение слитых белков с помощью иммуноферментного анализа. ^{[ 6 ]}^{[ 7 ]}^{[ 8 ]}

Ссылки

^ Ван Донген, JJM; Орфао, А; Европоток, Консорциум (2012). «EuroFlow: Перезапуск иммунофенотипирования лейкемии и лимфомы. Основа для сопутствующей диагностики и персонализированной медицины» . Лейкемия . 26 (9): 1899–907. дои : 10.1038/leu.2012.121 . ПМЦ 3437406 . ПМИД 22948488 .
^ Ван Донген, JJM; Лермитт, Л; Бетчер, С; Алмейда, Дж; Ван дер Велден, VHJ; Флорес-Монтеро, Дж; Роустрон, А; Аснафи, В; Лекревис, Q; Лусио, П; Мейстрикова Е; Щепаньский, Т; Калина, Т; Де Тут, Р; Брюггеманн, М; В то время как Л; Каллен, М; Лангера, AW; Мендонса, А; Макинтайр, Э; Мартин-Аюсо, М; Разрушение, О; Видриалес, МБ; Орфао, А (2012). «Панели антител EuroFlow для стандартизированного n-мерного проточного цитометрического иммунофенотипирования нормальных, реактивных и злокачественных лейкоцитов» . Лейкемия . 26 (9): 1908–75. дои : 10.1038/leu.2012.120 . ПМЦ 3437410 . ПМИД 22552007 .
^ Калина, Т; Флорес-Монтеро, Дж; Ван дер Вельден, VHJ; Мартин-Аюсо, М; Бетчер, С; Ритген, М; Алмейда, Дж; Лермитт, Л; Аснафи, В; Мендонса, А; Де Тут, Р; Каллен, М; В то время как Л; Видриалес, МБ; Перес, Джей-Джей; Те Марвелде, JG; Мейстрикова Е; Разрушение, О; Щепаньский, Т; Ван Донген, JJM; Орфао, А (2012). «Стандартизация EuroFlow настроек приборов проточного цитометра и протоколов иммунофенотипирования» . Лейкемия . 26 (9): 1986–2010. дои : 10.1038/leu.2012.122 . ПМЦ 3437409 . ПМИД 22948490 .
^ Педрейра, Карлос Э.; Коста, Элейн С.; Баррена, Сусана; Лекревис, Квентин; Алмейда, Джулия; Ван Донген, Жак Ж.М.; Орфао, Альберто; Европоток, Консорциум (2008). «Генерация файлов данных проточной цитометрии с потенциально бесконечным числом измерений». Цитометрия Часть А. 73А (9): 834–46. doi : 10.1002/cyto.a.20608 . ПМИД 18629843 . S2CID 12560225 .
^ Коста, ES; Педрейра, CE; Баррена, С; Лекревис, Кью; Флорес, Дж; Кихано, С; Алмейда, Дж; Дель Кармен Гарсиа-Масиас, М; Ботчер, С; Ван Донген, JJM; Орфао, А. (2010). «Автоматизированный анализ главных компонентов на основе шаблонов и экспертная иммунофенотипическая классификация В-клеточных хронических лимфопролиферативных заболеваний: шаг вперед в стандартизации клинического иммунофенотипирования» . Лейкемия . 24 (11): 1927–33. дои : 10.1038/leu.2010.160 . ПМК 3035971 . ПМИД 20844562 .
^ Декинг, Э.; Ван дер Велден, VHJ; Бетчер, С.; Брюггеманн, М.; Зонневельд, Э.; Кинг-Годхер, А.; Бёккс, Н.; Лусио, П.; Седек, Л.; Щепаньский, Т.; Калина Т.; Ковач, М.; Эванс, П.; Хугевен, П.Г.; Флорес-Монтеро, Дж.; Орфао, А.; Команс-Битер, ВМ; Стаал, ФЙТ; Ван Донген, JJM (2010). «Обнаружение слитых генов на уровне белка у больных лейкемией с помощью проточно-цитометрического иммуноферментного анализа» . Передовая практика и исследования в области клинической гематологии . 23 (3): 333–45. дои : 10.1016/j.beha.2010.09.010 . ПМИД 21123134 .
^ Покрытие, EHA; Ван дер Вельден, VHJ; Варрон, Р; Вай, Х; Бетчер, С; Кнеба, М; Зонневельд, Э; Желтый, А; Бёккс, Н.; Ван Поке, Н.; Лусио, П; Мендонса, А; В то время как Л; Щепаньский, Т; Калина, Т; Кандерова, В; Хугевен, П; Флорес-Монтеро, Дж; Шильон, MC; Орфао, А; Алмейда, Дж; Эванс, П; Каллен, М; Нордик, Алабама; Вермюлен, премьер-министр; Де Ман, Монтана; Диксон, EP; Команс-Битер, ВМ; Ван Донген, JJM (2012). «Проточно-цитометрический иммуноферментный анализ для быстрого и простого обнаружения слитых белков PML-RARA для диагностики острого промиелоцитарного лейкоза» . Лейкемия . 26 (9): 1976–85. дои : 10.1038/leu.2012.125 . ПМЦ 3437408 . ПМИД 22948489 .
^ Веркамп, Ф; Декинг, Е; Нг, ГГ; Ван дер Вельден, VHJ; Вай, Х; Бетчер, С; Брюггеманн, М; Ван дер Слейс, AJ; Желтый, А; Бёккс, Н.; Ван Поке, Н.; Лусио, П; Мендонса, А; В то время как Л; Щепаньский, Т; Калина, Т; Ковач, М; Хугевен, П.Г.; Флорес-Монтеро, Дж; Орфао, А; Макинтайр, Э; Лермитт, Л; Чен, Р; Брауэр-Де Кок, KAJ; Ван Дер Линден, А; Нордик, Алабама; Команс-Битер, ВМ; Стаал, ФЙТ; Ван Донген, JJM; Европоток, Консорциум (2009). «Проточно-цитометрический иммуноферментный анализ для обнаружения слитых белков BCR-ABL у пациентов с лейкемией». Лейкемия . 23 (6): 1106–17. дои : 10.1038/leu.2009.93 . ПМИД 19387467 .

Внешние ссылки

ЕвроФлоу

[test-1] Ван Донген, JJM; Орфао, А; Европоток, Консорциум (2012). «EuroFlow: Перезапуск иммунофенотипирования лейкемии и лимфомы. Основа для сопутствующей диагностики и персонализированной медицины» . Лейкемия . 26 (9): 1899–907. дои : 10.1038/leu.2012.121 . ПМЦ 3437406 . ПМИД 22948488 .

[2] Ван Донген, JJM; Лермитт, Л; Бетчер, С; Алмейда, Дж; Ван дер Велден, VHJ; Флорес-Монтеро, Дж; Роустрон, А; Аснафи, В; Лекревис, Q; Лусио, П; Мейстрикова Е; Щепаньский, Т; Калина, Т; Де Тут, Р; Брюггеманн, М; В то время как Л; Каллен, М; Лангера, AW; Мендонса, А; Макинтайр, Э; Мартин-Аюсо, М; Разрушение, О; Видриалес, МБ; Орфао, А (2012). «Панели антител EuroFlow для стандартизированного n-мерного проточного цитометрического иммунофенотипирования нормальных, реактивных и злокачественных лейкоцитов» . Лейкемия . 26 (9): 1908–75. дои : 10.1038/leu.2012.120 . ПМЦ 3437410 . ПМИД 22552007 .

[3] Калина, Т; Флорес-Монтеро, Дж; Ван дер Вельден, VHJ; Мартин-Аюсо, М; Бетчер, С; Ритген, М; Алмейда, Дж; Лермитт, Л; Аснафи, В; Мендонса, А; Де Тут, Р; Каллен, М; В то время как Л; Видриалес, МБ; Перес, Джей-Джей; Те Марвелде, JG; Мейстрикова Е; Разрушение, О; Щепаньский, Т; Ван Донген, JJM; Орфао, А (2012). «Стандартизация EuroFlow настроек приборов проточного цитометра и протоколов иммунофенотипирования» . Лейкемия . 26 (9): 1986–2010. дои : 10.1038/leu.2012.122 . ПМЦ 3437409 . ПМИД 22948490 .

[4] Педрейра, Карлос Э.; Коста, Элейн С.; Баррена, Сусана; Лекревис, Квентин; Алмейда, Джулия; Ван Донген, Жак Ж.М.; Орфао, Альберто; Европоток, Консорциум (2008). «Генерация файлов данных проточной цитометрии с потенциально бесконечным числом измерений». Цитометрия Часть А. 73А (9): 834–46. doi : 10.1002/cyto.a.20608 . ПМИД 18629843 . S2CID 12560225 .

[5] Коста, ES; Педрейра, CE; Баррена, С; Лекревис, Кью; Флорес, Дж; Кихано, С; Алмейда, Дж; Дель Кармен Гарсиа-Масиас, М; Ботчер, С; Ван Донген, JJM; Орфао, А. (2010). «Автоматизированный анализ главных компонентов на основе шаблонов и экспертная иммунофенотипическая классификация В-клеточных хронических лимфопролиферативных заболеваний: шаг вперед в стандартизации клинического иммунофенотипирования» . Лейкемия . 24 (11): 1927–33. дои : 10.1038/leu.2010.160 . ПМК 3035971 . ПМИД 20844562 .

[6] Декинг, Э.; Ван дер Велден, VHJ; Бетчер, С.; Брюггеманн, М.; Зонневельд, Э.; Кинг-Годхер, А.; Бёккс, Н.; Лусио, П.; Седек, Л.; Щепаньский, Т.; Калина Т.; Ковач, М.; Эванс, П.; Хугевен, П.Г.; Флорес-Монтеро, Дж.; Орфао, А.; Команс-Битер, ВМ; Стаал, ФЙТ; Ван Донген, JJM (2010). «Обнаружение слитых генов на уровне белка у больных лейкемией с помощью проточно-цитометрического иммуноферментного анализа» . Передовая практика и исследования в области клинической гематологии . 23 (3): 333–45. дои : 10.1016/j.beha.2010.09.010 . ПМИД 21123134 .

[7] Покрытие, EHA; Ван дер Вельден, VHJ; Варрон, Р; Вай, Х; Бетчер, С; Кнеба, М; Зонневельд, Э; Желтый, А; Бёккс, Н.; Ван Поке, Н.; Лусио, П; Мендонса, А; В то время как Л; Щепаньский, Т; Калина, Т; Кандерова, В; Хугевен, П; Флорес-Монтеро, Дж; Шильон, MC; Орфао, А; Алмейда, Дж; Эванс, П; Каллен, М; Нордик, Алабама; Вермюлен, премьер-министр; Де Ман, Монтана; Диксон, EP; Команс-Битер, ВМ; Ван Донген, JJM (2012). «Проточно-цитометрический иммуноферментный анализ для быстрого и простого обнаружения слитых белков PML-RARA для диагностики острого промиелоцитарного лейкоза» . Лейкемия . 26 (9): 1976–85. дои : 10.1038/leu.2012.125 . ПМЦ 3437408 . ПМИД 22948489 .

[8] Веркамп, Ф; Декинг, Е; Нг, ГГ; Ван дер Вельден, VHJ; Вай, Х; Бетчер, С; Брюггеманн, М; Ван дер Слейс, AJ; Желтый, А; Бёккс, Н.; Ван Поке, Н.; Лусио, П; Мендонса, А; В то время как Л; Щепаньский, Т; Калина, Т; Ковач, М; Хугевен, П.Г.; Флорес-Монтеро, Дж; Орфао, А; Макинтайр, Э; Лермитт, Л; Чен, Р; Брауэр-Де Кок, KAJ; Ван Дер Линден, А; Нордик, Алабама; Команс-Битер, ВМ; Стаал, ФЙТ; Ван Донген, JJM; Европоток, Консорциум (2009). «Проточно-цитометрический иммуноферментный анализ для обнаружения слитых белков BCR-ABL у пациентов с лейкемией». Лейкемия . 23 (6): 1106–17. дои : 10.1038/leu.2009.93 . ПМИД 19387467 .

[ 1 ]

[ 2 ]

[ 3 ]

[ 4 ]

[ 5 ]

[ 6 ]

[ 7 ]

[ 8 ]