Техника выбора
 |
Селекторный метод — это метод амплификации и мультиплексирования геномной ДНК.
Процесс
[ редактировать ]Геномная ДНК расщепляется ферментами рестрикции , циркулирует путем гибридизации с селекторами и затем присоединяется к векторной последовательности путем лигирования . В результате процедуры получаются кольцевые молекулы ДНК с включенным в них общим мотивом пары праймеров , которые можно использовать для амплификации с помощью ПЦР или RCA .
Конструкция селектора
[ редактировать ]Селектор состоит из двух олигонуклеотидов: одного векторного олигонуклеотида и одного селекторного зонда . Вместе они образуют один селектор с целевыми концами на каждой стороне общего мотива праймера.
Механизмы отбора
[ редактировать ]- Селекторный зонд гибридизуется с обоими концами выбранной мишени.
- Селекторный зонд гибридизуется одним концом с 3'-концом мишени, а другим концом - с внутренней последовательностью мишени. Выступающий 5'-конец отщепляется с помощью Taq-полимеразы .