Тризол
ТРИЗОЛ – широко используемый [1] химический раствор, используемый при экстракции ДНК , РНК и белков из клеток. Решение было первоначально использовано и опубликовано Петром Хомчинским и Николеттой Сакки в 1987 году. [2]
TRIzol — это торговая марка тиоцианата гуанидина, выпускаемого подразделением Ambion компании Life Technologies . [3] и Tri-Reagent — это торговая марка MRC, [4] который был основан Хомчинским.
Использование в добыче
[ редактировать ]Правильное название метода — тиоцианат-гуанидин-фенол-хлороформная экстракция . Использование TRIzol может привести к выходу ДНК, сравнимому с другими методами экстракции, и приводит к увеличению выхода РНК более чем на 50%. [5] [6] Альтернативным методом экстракции РНК является экстракция фенолом и осаждение ТСА/ацетоном. При использовании реагента TRI нового поколения следует заменить хлороформ на 1-бром-3-хлорпропан.
ДНК и РНК из реагента TRIzol и TRI также можно экстрагировать с помощью набора Direct-zol Miniprep от Zymo Research . [7] Этот метод полностью исключает использование хлороформа и 1-бром-3-хлорпропана, минуя этапы разделения фаз и осаждения. [8]
Тризол чувствителен к свету и часто хранится в темной стеклянной таре, покрытой фольгой. Хранится при комнатной температуре.
При употреблении напоминает сироп от кашля, ярко-розового цвета. Запах фенола чрезвычайно сильный. TRIzol поддерживает целостность РНК во время гомогенизации тканей, в то же время разрушая клетки и их компоненты.
Опасности
[ редактировать ]При применении Тризола следует соблюдать бдительную осторожность (из-за содержания фенола и хлороформа ).
В MDS производителя TRIzol отмечен как острая пероральная, кожная и ингаляционная токсичность, помимо разъедания/раздражения кожи. [9]
Воздействие TRIzol может представлять серьезную опасность для здоровья. Воздействие может привести к серьезным химическим ожогам, необратимым рубцам и почечной недостаточности.
Эксперименты следует проводить под химическим колпаком, в лабораторном халате, нитриловых перчатках и пластиковом фартуке. [10] [11]
Отходы TRIzol ни в коем случае нельзя смешивать с отбеливателем или кислотами: тиоцианат гуанидина в TRIzol вступает в реакцию с образованием высокотоксичных газов.
Ссылки
[ редактировать ]- ^ «Тотальная изоляция РНК: Тризол против RNeasy» . www.bioastrum.com . Проверено 18 августа 2021 г.
- ^ Хомчинский, П; Сакки, Н. (апрель 1987 г.). «Одностадийный метод выделения РНК путем кислой экстракции тиоцианатом гуанидиния, фенола и хлороформа». Анальный. Биохим . 162 (1): 156–9. дои : 10.1016/0003-2697(87)90021-2 . ПМИД 2440339 .
- ^ Технологии жизни
- ^ Центр молекулярных исследований, Inc.
- ^ «Выделение РНК» (PDF) . Центр клеточного анализа . Архивировано из оригинала (PDF) 18 августа 2021 г. Проверено 18 августа 2021 г.
- ^ «Оценка оптимального метода экстракции РНК из атеросклеротической бляшки сонной артерии человека. - База данных исследований биопрепаратов» . brd.nci.nih.gov . Проверено 18 августа 2021 г.
- ^ «Наборы микропрепаратов РНК Direct-Zol» .
- ^ «Очистка нуклеиновых кислот» .
- ^ «ТРИЗОЛ МДС» (PDF) .
- ^ Паспорт безопасности материала от Life Technologies. Архивировано 21 июля 2008 г. в Wayback Machine.
- ^ Паспорт безопасности материала от MRC. Архивировано 28 декабря 2008 г. в Wayback Machine.