Поперечная релаксация-оптимизированная спектроскопия

Оптимизированная спектроскопия поперечной релаксации (TROSY) является экспериментом в спектроскопии ЯМР белка , который позволяет исследованиям больших молекул или комплексов.

Применение ЯМР к большим молекулам обычно ограничено тем фактом, что ширина линии обычно увеличивается с молекулярной массой . Большие молекулы имеют более длительное время вращательной корреляции и, следовательно, более короткое время поперечного релаксации (T ₂ ). Другими словами, сигнал ЯМР из более крупных молекул распадается быстрее, что приводит к расширению линий в спектре ЯМР и плохом разрешении .

В спектре HSQC , в котором развязка не была применена, пики появляются в виде мультиплетов из-за J-связки . Важно отметить, что различные мультиплентные компоненты имеют разные ширины. Это связано с конструктивным или разрушительным взаимодействием между различными релаксации механизмами . Как правило, для больших белков при высокой прочности магнитного поля , в поперечной (T ₂ ) релаксации преобладают механизм диполь-диполя (DD) и механизм химического сдвига анизотропии (CSA). Поскольку механизмы релаксации, как правило, коррелируют, но способствуют общей скорости релаксации данного компонента с различными признаками, множественные компоненты расслабляются с очень разными общими скоростями. Трози эксперимент предназначен для выбора компонента, для которого различные механизмы релаксации практически отменены, что приводит к одному резкому пику в спектре. Это значительно увеличивает как спектральное разрешение, так и чувствительность, оба из которых находятся на премии при изучении крупных и сложных биомолекул.

Этот подход значительно расширяет диапазон молекулярной массы, который может быть изучен с помощью ЯМР, но обычно он требует высоких магнитных полей для достижения необходимого баланса между механизмами релаксации CSA и DD; CSAS масштабируют с высокой силой, в то время как диполь-дипольные муфты зависят от поля.