ЕНА101

EHA101 была одной из первых и наиболее широко используемых Agrobacterium плазмид-хелперов для переноса генов растений. Созданный в 1985 году в лаборатории Мэри-Делл Чилтон Вашингтонского университета в Сент-Луисе , он был назван в честь аспиранта, который его сконструировал. EH означает «Элизабет Худ», а A — « Agrobacterium ». Штамм-помощник EHA101 является производным A281, гипервирулентного штамма A. tumefaciens , вызывающего крупные быстрорастущие опухоли на пасленовых растениях. ^{[ 1 ]}^{[ 2 ]} Этот штамм используется для переноса интересующих генов во многие сотни видов растений по всему миру.

Для устойчивых культур, таких как кукуруза , пшеница и рис , для переноса генов часто используются штаммы-помощники EHA. ^{[ 3 ]}^{[ 4 ]}^{[ 5 ]} Эти штаммы эффективно способствуют переносу Т-ДНК из-за гипервирулентности генов vir. ^{[ 2 ]} предполагая, что более высокий уровень успеха может быть достигнут на этих «трудно трансформируемых» культурах или сортах .

Хромосомный фон EHA101 представляет собой C58C1, вылеченный штамм нопалина . ^{[ 1 ]} Штаммы-хелперы были получены из A281, который представляет собой A136(pTiBo542). A281 был генетически модифицирован посредством двойного кроссовера и сайт-направленной делеции с получением EHA101, штамма с удаленной Т-ДНК, пригодного для переноса целевого гена в растения. ^{[ 2 ]} EHA101 устойчив к канамицину благодаря гену npt I вместо Т-ДНК. Родительский штамм A281 не проявляет устойчивости к антибиотикам более высокой , чем нормальные штаммы A. tumefaciens . Более того, другие трансконъюгантные штаммы на фоне C58C1 не проявляют такой повышенной устойчивости к антибиотикам. Следовательно, эти характеристики являются не просто проявлением хромосомного фона, а, скорее всего, взаимодействием этой Ti-плазмиды и хромосомного фона С58.

Ген npt I вместо Т-ДНК в EHA101 требует, чтобы бинарные плазмиды, введенные в штамм, кодировали устойчивость к лекарственным средствам, отличную от канамицина. Штаммы EHA105 были получены из EHA101 посредством сайт-направленной делеции гена устойчивости к канамицину из Ti-плазмиды, в остальном штаммы идентичны. ^{[ 6 ]} Этот последний штамм оказался полезен биотехнологам по выращиванию растений, которые используют канамицин в качестве селектируемого маркера в своих бинарных плазмидах.

Ссылки

^ Перейти обратно: ^а ^б Скиаки, Д.; Монтойя, А.Л. и Чилтон, доктор медицинских наук. (1991). «Компетентная к трансформации ДНК геномная библиотека Arabidopsis в Agrobacterium». Природная биотехнология . 9 (10): 963–967. дои : 10.1038/nbt1091-963 . ПМИД 1368724 . S2CID 205272224 .
^ Перейти обратно: ^а ^б ^с Худ, Э.Э.; Хелмер, Г.Л.; Фрэли, Р.Т. и Чилтон, доктор медицины (1986). «Гипервирулентность Agrobacterium tumefaciens A281 кодируется в участке pTiBo542 вне T=ДНК» . Журнал бактериологии . 168 (3): 1291–1301. дои : 10.1128/jb.168.3.1291-1301.1986 . ПМК 213636 . ПМИД 3782037 .
^ Хиэй, Ю.; Охта, С.; Комари Т. и Кумасиро Т. (1994). «Эффективная трансформация риса (Oryza sativa L.) при помощи Agrobacerium и анализ последовательности границ Т-ДНК» . Заводской журнал . 6 (2): 271–282. дои : 10.1046/j.1365-313x.1994.6020271.x . ПМИД 7920717 .
^ Исида, Ю.; Сайто, Х.; Охта, С.; Хиэй, Ю.; Комари Т. и Кумасиро Т. (1996). «Высокоэффективная трансформация кукурузы (Zea mays L.) с помощью Agrobacterium tumefaciens». Природная биотехнология . 14 (6): 745–750. дои : 10.1038/nbt0696-745 . ПМИД 9630983 . S2CID 21631342 .
^ Рама, БР; Шу, Х.; Чиквамба, РК; Чжан, З.; Сян, К.; Фонгер, ТМ; Пегг, шведские кроны; Ли, Б.; Неттлтон, Д.С. и Пей, Д. (2002). «Трансформация эмбрионов кукурузы, опосредованная Agrobacterium tumefaciens, с использованием стандартной бинарной векторной системы» . Физиология растений . 129 (1): 13–22. дои : 10.1104/стр.000653 . ПМК 1540222 . ПМИД 12011333 .
^ Худ, Э.Э.; Гельвин, С.Б.; Мельчерс, Л.С. и Хукема, А. (1993). «Новые плазмиды-помощники Agrobacterium для переноса генов растениям». Трансгенные исследования . 2 (4): 208–218. дои : 10.1007/BF01977351 . S2CID 23507928 .

Эта о генетике статья незавершена . Вы можете помочь Википедии, расширив ее .

[sciaky1-1] Перейти обратно: ^а ^б Скиаки, Д.; Монтойя, А.Л. и Чилтон, доктор медицинских наук. (1991). «Компетентная к трансформации ДНК геномная библиотека Arabidopsis в Agrobacterium». Природная биотехнология . 9 (10): 963–967. дои : 10.1038/nbt1091-963 . ПМИД 1368724 . S2CID 205272224 .

[hood1986-2] Перейти обратно: ^а ^б ^с Худ, Э.Э.; Хелмер, Г.Л.; Фрэли, Р.Т. и Чилтон, доктор медицины (1986). «Гипервирулентность Agrobacterium tumefaciens A281 кодируется в участке pTiBo542 вне T=ДНК» . Журнал бактериологии . 168 (3): 1291–1301. дои : 10.1128/jb.168.3.1291-1301.1986 . ПМК 213636 . ПМИД 3782037 .

[3] Хиэй, Ю.; Охта, С.; Комари Т. и Кумасиро Т. (1994). «Эффективная трансформация риса (Oryza sativa L.) при помощи Agrobacerium и анализ последовательности границ Т-ДНК» . Заводской журнал . 6 (2): 271–282. дои : 10.1046/j.1365-313x.1994.6020271.x . ПМИД 7920717 .

[ishida1996-4] Исида, Ю.; Сайто, Х.; Охта, С.; Хиэй, Ю.; Комари Т. и Кумасиро Т. (1996). «Высокоэффективная трансформация кукурузы (Zea mays L.) с помощью Agrobacterium tumefaciens». Природная биотехнология . 14 (6): 745–750. дои : 10.1038/nbt0696-745 . ПМИД 9630983 . S2CID 21631342 .

[frame2002-5] Рама, БР; Шу, Х.; Чиквамба, РК; Чжан, З.; Сян, К.; Фонгер, ТМ; Пегг, шведские кроны; Ли, Б.; Неттлтон, Д.С. и Пей, Д. (2002). «Трансформация эмбрионов кукурузы, опосредованная Agrobacterium tumefaciens, с использованием стандартной бинарной векторной системы» . Физиология растений . 129 (1): 13–22. дои : 10.1104/стр.000653 . ПМК 1540222 . ПМИД 12011333 .

[hood1993-6] Худ, Э.Э.; Гельвин, С.Б.; Мельчерс, Л.С. и Хукема, А. (1993). «Новые плазмиды-помощники Agrobacterium для переноса генов растениям». Трансгенные исследования . 2 (4): 208–218. дои : 10.1007/BF01977351 . S2CID 23507928 .

[ 1 ]

[ 2 ]

[ 3 ]

[ 4 ]

[ 5 ]

[ 6 ]