Аналитическое центрифугирование полос

Аналитическое полосовое центрифугирование (ABC) (также известное как аналитическое полосовое ультрацентрифугирование или полосовая скорость седиментации) представляет собой специализированную процедуру ультрацентрифугирования , в которой, в отличие от типичного использования (граничной) скорости седиментации, аналитическое ультрацентрифугирование (SV-AUC), при котором гомогенный объемный раствор центрифугируется, в ABC тонкий (~15 мкл, ~500 мкм) [ 1 ] образец наслаивается поверх объемного растворителя, а затем центрифугируется. Этот метод отличается от зонного осаждения тем, что стабилизирующий градиент плотности создается автоматически во время центрифугирования за счет использования объемного «бинарного растворителя» с более высокой плотностью (чем образец), содержащего как растворитель (т. е. H 2 O), так и растворитель. и второй компонент (малые молекулы, т.е. CsCl ), который будет осаждаться, образуя стабилизирующий градиент плотности образца. [ 2 ]
ABC также требует специально разработанных аналитических ультрацентрифужных ячеек, поскольку образец не наносится вручную с помощью пипетки, а вместо этого автоматически доставляется через капилляр под действием низких перегрузок в начале цикла из резервуара внутри ячейки. Впервые он был продемонстрирован в 1963 году. [ 2 ] и не использовался широко в течение многих десятилетий, [ 3 ] [ 4 ] но в последнее время он стал более широко использоваться из-за его применимости для измерения контроля качества терапевтических вирусов, таких как аденоассоциированные вирусы (AAV) . [ 1 ] Профили, полученные в результате анализа ABC, по своей интерпретации аналогичны профилям электрофоретического разделения («электроферограммы») и поэтому получили название «центрифуграммы». [ 1 ]
См. также
[ редактировать ]Ссылки
[ редактировать ]- ^ Jump up to: а б с Хаса, Харшит; Килби, Грег; Чен, Сяоюй; Ван, Чунлей (2021). «Аналитическое полосовое центрифугирование для разделения и количественного определения пустых и полных частиц AAV» . Молекулярная терапия – методы и клинические разработки . 21 . Эльзевир Б.В.: 585–591. дои : 10.1016/j.omtm.2021.04.008 . ISSN 2329-0501 . ПМК 8142049 . ПМИД 34095342 .
- ^ Jump up to: а б Виноград, Джером; Брунер, Роберт; Кент, Ребекка; Вейгл, Жан (1963). «Ленточное центрифугирование макромолекул и вирусов в самогенерирующихся градиентах плотности» . Труды Национальной академии наук . 49 (6): 902–910. дои : 10.1073/pnas.49.6.902 . ISSN 0027-8424 . ПМК 300030 . ПМИД 13997382 .
- ^ Шнайдер, Корнелия М.; Кёльфен, Хельмут (21 июня 2018 г.). «Возврат к центрифугированию аналитических групп». Европейский биофизический журнал . 47 (7). ООО «Спрингер Сайенс энд Бизнес Медиа»: 799–807. дои : 10.1007/s00249-018-1315-1 . ISSN 0175-7571 . ПМИД 29931388 .
- ^ Шнайдер, Корнелия М.; Хаффке, Дирк; Кёльфен, Хельмут (30 августа 2018 г.). «Возвращение к эксперименту по ленточному осаждению при аналитическом ультрацентрифугировании» . Аналитическая химия . 90 (18). Американское химическое общество (ACS): 10659–10663. дои : 10.1021/acs.analchem.8b02768 . ISSN 0003-2700 . ПМИД 30160111 .