Примосома
Эта статья нуждается в дополнительных цитатах для проверки . ( декабрь 2009 г. ) |
В молекулярной биологии примосома — это белковый комплекс, ответственный за создание РНК праймеров на одноцепочечной ДНК во время репликации ДНК .
Примосома состоит из семи белков: DnaG -примазы , DnaB-геликазы , DnaC- хеликазы-помощника, DnaT , PriA , PriB и PriC . В каждой репликационной вилке примосома используется один раз на ведущей цепи ДНК и повторно, инициируя каждый фрагмент Оказаки , на отстающей цепи ДНК . Первоначально комплекс, образованный PriA, PriB и PriC, связывается с ДНК. Затем вместе с DnaT присоединяется хеликазный комплекс DnaB-DnaC. Эта структура называется препримосомой. Наконец, DnaG связывается с препримосомой, образуя полную примосому. Примосома присоединяет 1–10 нуклеотидов РНК к одноцепочечной ДНК, образуя гибрид ДНК-РНК. Эта последовательность РНК используется в качестве праймера для инициации ДНК-полимеразы III . Основания РНК в конечном итоге заменяются основаниями ДНК с помощью нуклеазы РНКазы H (эукариоты) или нуклеазы ДНК-полимеразы I (прокариоты). Затем ДНК-лигаза соединяет два конца вместе.
Для сборки примосомы Escherichia coli требуется шесть белков: PriA, PriB, PriC, DnaB, DnaC и DnaT, действующих в месте сборки примосомы (pas) на одноцепочечной (8s) ДНК, покрытой SSB. Сборка инициируется взаимодействием PriA и PriB с оцДНК и па. Затем PriC, DnaB, DnaC и DnaT действуют на комплекс PriAPriB-ДНК, образуя примосому. [ 1 ]
Примосомы представляют собой сборки нуклеопротеинов, которые активируют вилки репликации ДНК. Их основная роль — рекрутировать репликативную хеликазу на одноцепочечную ДНК. Примосома «перезапуска репликации», определенная у Escherichia coli , участвует в реактивации остановленных репликационных вилок. Связывание белка PriA с раздвоенной ДНК запускает ее сборку. PriA консервативен у бактерий, а его примосомальные партнеры — нет. У Bacillus subtilis генетический анализ выявил три примосомальных белка: DnaB , DnaD и DnaI , которые не имеют явных гомологов в E. coli . Они участвуют в функции примосом как на остановленных репликационных вилках, так и на уровне хромосомного происхождения. Наш биохимический анализ белков DnaB и DnaD раскрывает их роль в сборке примосом. Они оба мультимерны и индивидуально связываются с ДНК. Более того, DnaD стимулирует активность связывания DnaB. Один только DnaD и пара DnaD/DnaB специфически взаимодействуют с PriA B. subtilis на нескольких субстратах ДНК. Это предполагает, что сборка нуклеопротеинов происходит последовательно в порядке PriA, DnaD, DnaB. Предпочтительный ДНК-субстрат имитирует остановленную репликационную вилку ДНК с нереплицируемой отстающей цепью, структурно идентичную продукту рекомбинационной репарации остановившейся репликационной вилки.
Ссылки
[ редактировать ]- ^ Аллен, GC; Корнберг, А (1993). «Сборка примосомы репликации ДНК у Escherichia coli» . Ж. Биол. Хим . 268 (26): 19204–9. дои : 10.1016/S0021-9258(19)36500-7 . ПМИД 8366072 .