Снятие крыши с камеры

Снятие крыши с клеток методов изоляции и обнажения клеточной мембраны клеток — это любой из различных . В отличие от более распространенных протоколов экстракции мембран , выполняемых с помощью нескольких стадий центрифугирования (цель которого состоит в том, чтобы отделить мембранную фракцию от клеточного лизата ), при снятии крыши с клеток цель состоит в том, чтобы разорвать и сохранить участки плазматической мембраны, чтобы выполнить операцию in situ. эксперименты с использованием (микроскопии и биомедицинской спектроскопии ).

История

Первое наблюдение двухслойной клеточной мембраны было сделано в 1959 году. ^{[ 1 ]} на срезе клетки с помощью электронного микроскопа. Но первая микрофотография внутренней стороны клетки датируется 1977 годом. ^{[ 2 ]} М.В. Нермута. Профессор Джон Хойзер внес существенный вклад в эту область, визуализировав детальную внутреннюю структуру мембраны и связанного с ней цитоскелета с помощью широкого использования электронного микроскопа.

Лишь после разработки атомно -силового микроскопа, работающего в жидкости, стало возможным получать изображения клеточных мембран почти в физиологических условиях. ^{[ 3 ]} и проверить его механические свойства. ^{[ 4 ]}

Методы

Замораживание разрушения монослоев ^{[ 5 ]}
глубокого травления с быстрой заморозкой Электронная микроскопия и криофиксация. ^{[ 6 ]}
Обработка ультразвуком для атомно-силовой микроскопии ^{[ 7 ]}
Однокамерный демонтаж крыши ^{[ 4 ]}

См. также

Ссылки

^ Робертсон, доктор юридических наук (1959). «Ультраструктура клеточных мембран и их производных». Биохим. Соц. Симп .
^ Нермут, М.В.; Уильямс, Линн Д. (1977). «Замораживание монослоев (капиллярных слоев) клеток, мембран и вирусов: некоторые технические соображения». Журнал микроскопии . 110 (2): 121–132. дои : 10.1111/j.1365-2818.1977.tb00023.x . ISSN 1365-2818 . ПМИД 335072 . S2CID 8682569 .
^ Чо, Сан-Джун; Ан, Джонхун; Юн, Дэхван; Минаката, Сихо; Ёсимура, Азуми; Усукура, Дзиро (01 октября 2012 г.). «Использование метода снятия крыши для атомно-силовой микроскопии внутриклеточного цитоскелета в водных условиях» . Журнал электронной микроскопии . 61 (5): 321–326. doi : 10.1093/jmicro/dfs055 . ISSN 0022-0744 . ПМИД 22872282 .
^ Jump up to: ^а ^б Гальванетто, Никола (01 декабря 2018 г.). «Одноклеточное снятие крыши: исследование топологии и наномеханики нативных мембран». Biochimica et Biophysical Acta (BBA) – Биомембраны . 1860 (12): 2532–2538. arXiv : 1810.01643 . дои : 10.1016/j.bbamem.2018.09.019 . ISSN 0005-2736 . ПМИД 30273580 . S2CID 52897823 .
^ Нермут, М.В.; Уильямс, Линн Д. (1977). «Замораживание монослоев (капиллярных слоев) клеток, мембран и вирусов: некоторые технические соображения». Журнал микроскопии . 110 (2): 121–132. дои : 10.1111/j.1365-2818.1977.tb00023.x . ISSN 1365-2818 . ПМИД 335072 . S2CID 8682569 .
^ Хойзер, Джон (2000). «Производство «клеточной коры» для световой и электронной микроскопии» . Трафик . 1 (7): 545–552. дои : 10.1034/j.1600-0854.2000.010704.x . ISSN 1600-0854 . ПМИД 11208142 .
^ Усукура, Дзиро; Ито, Шуичи; Яги, Акира; Нарита, Акихиро; Усукура, Эйдзи (07.06.2016). «Метод снятия крыши для наблюдения за цитоскелетом непосредственно с молекулярным разрешением с использованием атомно-силовой микроскопии» . Научные отчеты 6 : 27472. дои : 10.1038/srep27472 . ISSN 2045-2322 . ПМЦ 4895337 . ПМИД 27273367 .

[1] Робертсон, доктор юридических наук (1959). «Ультраструктура клеточных мембран и их производных». Биохим. Соц. Симп .

[2] Нермут, М.В.; Уильямс, Линн Д. (1977). «Замораживание монослоев (капиллярных слоев) клеток, мембран и вирусов: некоторые технические соображения». Журнал микроскопии . 110 (2): 121–132. дои : 10.1111/j.1365-2818.1977.tb00023.x . ISSN 1365-2818 . ПМИД 335072 . S2CID 8682569 .

[3] Чо, Сан-Джун; Ан, Джонхун; Юн, Дэхван; Минаката, Сихо; Ёсимура, Азуми; Усукура, Дзиро (01 октября 2012 г.). «Использование метода снятия крыши для атомно-силовой микроскопии внутриклеточного цитоскелета в водных условиях» . Журнал электронной микроскопии . 61 (5): 321–326. doi : 10.1093/jmicro/dfs055 . ISSN 0022-0744 . ПМИД 22872282 .

[:0-4] Jump up to: ^а ^б Гальванетто, Никола (01 декабря 2018 г.). «Одноклеточное снятие крыши: исследование топологии и наномеханики нативных мембран». Biochimica et Biophysical Acta (BBA) – Биомембраны . 1860 (12): 2532–2538. arXiv : 1810.01643 . дои : 10.1016/j.bbamem.2018.09.019 . ISSN 0005-2736 . ПМИД 30273580 . S2CID 52897823 .

[5] Нермут, М.В.; Уильямс, Линн Д. (1977). «Замораживание монослоев (капиллярных слоев) клеток, мембран и вирусов: некоторые технические соображения». Журнал микроскопии . 110 (2): 121–132. дои : 10.1111/j.1365-2818.1977.tb00023.x . ISSN 1365-2818 . ПМИД 335072 . S2CID 8682569 .

[6] Хойзер, Джон (2000). «Производство «клеточной коры» для световой и электронной микроскопии» . Трафик . 1 (7): 545–552. дои : 10.1034/j.1600-0854.2000.010704.x . ISSN 1600-0854 . ПМИД 11208142 .

[7] Усукура, Дзиро; Ито, Шуичи; Яги, Акира; Нарита, Акихиро; Усукура, Эйдзи (07.06.2016). «Метод снятия крыши для наблюдения за цитоскелетом непосредственно с молекулярным разрешением с использованием атомно-силовой микроскопии» . Научные отчеты 6 : 27472. дои : 10.1038/srep27472 . ISSN 2045-2322 . ПМЦ 4895337 . ПМИД 27273367 .

[ 1 ]

[ 2 ]

[ 3 ]

[ 4 ]

[ 5 ]

[ 6 ]

[ 7 ]