Метод флуоресценции Фалька-Хилларпа
( Метод флуоресценции Фалька-Хилларпа метод FH ) — это метод, который позволяет с уникальной точностью и чувствительностью демонстрировать и изучать определенные моноамины , в том числе три катехоламина — дофамин , норадреналин и адреналин , а также серотонин и родственные вещества. [ 1 ] [ 2 ]
Метод основан на важном и решающем открытии того, что эти соединения способны вступать в реакцию с формальдегидом – при почти полном отсутствии воды – с образованием флуорофоров , то есть молекул, которые при облучении невидимым для глаза светом излучают видимый свет. Это происходит в «сухом» состоянии, без извлечения моноаминов из клеток в течение всей процедуры. Этот процесс начинается с отделения образца ткани и заканчивается получением тонкого среза ткани, который можно исследовать в флуоресцентном микроскопе.
Метод FH впервые позволил исследователю наблюдать за свечением этих моноаминов в микроскоп и точно определить, в каких клетках они присутствуют, и тем самым понять их функции. [ 3 ] Метод был разработан Бенгтом Фальком и Нильсом-Оке Хилларпом в 1960-х годах на факультете гистологии Лундского университета . В ходе интенсивных нейробиологических исследований удалось доказать наличие моноаминов в нервных клетках центральной и периферической нервной системы и впервые понять, что эти вещества действуют как сигнальные вещества, т. е. медиаторы.
Первая публикация, написанная уже в 1961 г. [ 4 ] описал широкомасштабное исследование нервов, снабжающих большое количество органов тела. Эта работа подтвердила концепцию лауреата Нобелевской премии Ульфа фон Эйлера о том, что норадреналин является сигнальным веществом в периферических вегетативных нервах. В том же году за этой первой публикацией последовало объяснение химической основы метода F – H.
Очень тонкие мембраны, такие как радужная оболочка или брыжейка крысы, не требуют разрезания для микроскопических исследований, их можно просто разложить на стекле, высушить, а затем подвергнуть воздействию газообразного формальдегида для последующего исследования с помощью флуоресцентного микроскопа.
Публикация по химической тематике позже была включена в число «200 наиболее цитируемых статей всех времен». [ нужна ссылка ]
В 2012 году медицинский факультет Лундского университета организовал симпозиум «От нерва к таблеткам», посвященный 50-летию первой публикации метода FH.
Ссылки
[ редактировать ]- ^ Фальк, Б. (1962). «Наблюдения за возможностями клеточной локализации моноаминов методом флуоресценции». Акта Физиол. Скан . 56 (приложение 197): 1–25.
- ^ Фальк, Б.; Хилларп, Северная Каролина; Тиме, Г.; Торп, А. (1982). «Флуоресценция катехоламинов и родственных соединений, конденсированных с формальдегидом». Бюллетень исследований мозга . 9 (1–6): xi–xv. дои : 10.1016/0361-9230(82)90113-7 . ПМИД 7172023 . S2CID 4706681 .
- ^ «Метод Фалька-Хилларпа – революция в изучении моноаминовых систем ЦНС» . Неврологический центр Валленберга, Лундский университет . 09.01.2019.
- ^ ФАЛЬК Б; ТОРП А (1962). «Новые доказательства локализации норадреналина в адренергических нервных окончаниях». Медицина Эксперименталис . 6 (3): 169–72. дои : 10.1159/000135153 . ПМИД 13891409 .