Захват экзона
Эта статья нуждается в дополнительных цитатах для проверки . ( декабрь 2009 г. ) |
Захват экзонов — это метод молекулярной биологии, позволяющий идентифицировать потенциальные экзоны во фрагменте эукариот ДНК с неизвестной структурой интрон - экзон . [ 1 ] Это делается для того, чтобы определить, является ли фрагмент частью экспрессируемого гена .
Геномный фрагмент встраивают в интрон « вектора сплайсинга », состоящего из известной последовательности ДНК экзон-интрон-экзон, а затем вектор встраивают в эукариотическую клетку. Если фрагмент не содержит экзонов (т.е. состоит исключительно из интронной ДНК), он будет сращен вместе с исходным интроном вектора. С другой стороны, если экзоны присутствуют, они будут частью зрелой мРНК после транскрипции (со всем удалением интронного материала). Присутствие «захваченных экзонов» можно обнаружить по увеличению размера мРНК или с помощью RT-PCR для амплификации интересующей ДНК.
Этот метод в значительной степени был вытеснен подходом секвенирования кДНК , полученной из мРНК , а затем использования инструментов биоинформатики, таких как NCBI, для сервер BLAST определения источника последовательности, тем самым определяя соответствующие сайты сплайсинга экзонов и интронов.
Ссылки
[ редактировать ]- ^ Дуйк, Г.М., С.В. Ким, Р.М. Майерс и Д.Р. Кокс. 1990. «Захват экзонов: генетический скрининг для выявления потенциальных транскрибируемых последовательностей в клонированной геномной ДНК млекопитающих». Труды Национальной академии наук 87 (22): 8995.