Иммунохирургия
Иммунохирургия — это метод избирательного удаления внешнего клеточного слоя ( трофобласта ) бластоцисты посредством процедуры цитотоксичности . Протокол иммунохирургии включает предварительную инкубацию с антисывороткой , промывку ее средой, полученной из эмбриональных стволовых клеток, для удаления антител, воздействие комплемента , а затем удаление лизированной трофоэктодермы с помощью пипетки. [ 1 ] Этот метод используется для выделения внутренней клеточной массы бластоцисты. трофоэктодермы Клеточные соединения и плотный эпителий «защищают» ICM от связывания антител, эффективно делая клетку непроницаемой для макромолекул . [ 2 ] [ 3 ]
Иммунохирургия может быть использована для получения больших количеств чистых внутренних клеточных масс за относительно короткий период времени. Полученный ICM затем можно использовать для исследования стволовых клеток , и его лучше использовать, чем взрослые или фетальные стволовые клетки, поскольку на ICM не влияют внешние факторы, такие как ручное разделение клетки пополам. [ 4 ] [ 5 ] Однако, если структурная целостность бластоцисты нарушена до эксперимента, ICM восприимчив к иммунологической реакции. Таким образом, качество используемого эмбриона имеет решающее значение для успеха эксперимента. Кроме того, при использовании комплемента, полученного из животных, имеет значение источник животного происхождения. Их следует содержать в среде, свободной от специфических патогенов, чтобы повысить вероятность того, что у животного не выработались естественные антитела против бактериальных углеводов, присутствующих в сыворотке (которые можно получить от другого животного). [ 6 ]
Солтер и Ноулз разработали первый метод иммунохирургии в своей статье 1975 года «Иммунохирургия мышиных бластоцист» . В основном они использовали его для изучения раннего эмбрионального развития . [ 4 ] [ 7 ] Хотя иммунохирургия является наиболее распространенным методом изоляции ICM, различные эксперименты улучшили этот процесс, например, за счет использования лазеров (выполненных Танакой и др. ) и микроманипуляторов (выполненных Дином и др. ). [ 8 ] [ 9 ] Эти новые методы снижают риск заражения эмбриональными стволовыми клетками, полученными из ICM, материалами животного происхождения, что может вызвать осложнения в дальнейшем, если эмбриональные стволовые клетки будут трансплантированы человеку для клеточной терапии .
Ссылки
[ редактировать ]- ^ Jump up to: а б Хэггстрем, Микаэль (2014). «Аллогенный компонент преодоления отторжения при межвидовой беременности» . Викижурнал медицины . 1 (1). дои : 10.15347/wjm/2014.004 .
- ^ Круз, Ю.П.; Трейхель, РС; Харсей, Э.; Чи, К.Д. (1 января 1993 г.). «Иммунохирургия бластоцист мышей с использованием коммерческой антисыворотки к мышиным эритроцитам». Клеточная биология и биология развития in vitro. Животное . 29А (8): 671–675. дои : 10.1007/BF02634557 . JSTOR 4294104 . ПМИД 8376320 . S2CID 7019136 .
- ^ Николс, Дженнифер; Боровяк, Торстен (2015). «Максимизация клонального происхождения эмбриональных стволовых клеток путем ингибирования пути ERK». Протоколы эмбриональных стволовых клеток . Методы молекулярной биологии. Том. 1341. стр. 1–13. дои : 10.1007/7651_2015_253 . ISBN 978-1-4939-2953-5 . ПМИД 26026883 .
- ^ Jump up to: а б Солтер, Д; Ноулз, BB (1975). «Иммунохирургия бластоцисты мыши» . Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 72 (12): 5099–102. Бибкод : 1975PNAS...72.5099S . дои : 10.1073/pnas.72.12.5099 . ПМЦ 388883 . ПМИД 1108013 .
- ^ Крук, Джереми М.; Кравец, Люси; Пеура, Тейя; Фирпо, Мери Т. (2017). «Происхождение эмбриональных стволовых клеток человека». Банк стволовых клеток . Методы молекулярной биологии. Том. 1590. стр. 115–129. дои : 10.1007/978-1-4939-6921-0_8 . ISBN 978-1-4939-6919-7 . ПМИД 28353265 .
- ^ «Производство химер», глава 11, в книге «Манипулирование мышиным эмбрионом» , 3-е издание, Андраш Надь, Марина Герценштайн, Кристина Винтерстен и Ричард Берингер. Лабораторный пресс Колд-Спринг-Харбор, Колд-Спринг-Харбор, Нью-Йорк, США, 2003 г.
- ^ Амит, Михал (2013). «Источники и получение эмбриональных стволовых клеток человека». Плюрипотентные стволовые клетки . Методы молекулярной биологии. Том. 997. стр. 3–11. дои : 10.1007/978-1-62703-348-0_1 . ISBN 978-1-62703-347-3 . ПМИД 23546743 .
- ^ Танака, Норико; Такеучи, Такуми; Нери, Куини В.; Силлс, Эрик Скотт; Палермо, Джанпьеро Д. (1 января 2006 г.). «Лазерная диссекция бластоцисты и последующее культивирование эмбриональных стволовых клеток в системе сыворотки/бесклеточной культуры: применение и предварительные результаты на мышиной модели» . Журнал трансляционной медицины . 4:20 . дои : 10.1186/1479-5876-4-20 . ISSN 1479-5876 . ПМЦ 1479373 . ПМИД 16681851 .
- ^ Ян Дин, И Ган, Цзин Бо Фэн, Шао Хуа Ци, Руй Мин Ли, Донг Шэн Ли. «Эффективное выделение внутренней клеточной массы из бластоцист с помощью усовершенствованной микрохирургической техники». Клеточные исследования (2008) 18:s39. дои: 10.1038/cr.2008.129; опубликовано в Интернете 4 августа 2008 г.
 | Эта по иммунологии статья незавершена . Вы можете помочь Википедии, расширив ее . |
 | Эта о хирургии статья незавершена . Вы можете помочь Википедии, расширив ее . |