Термоцикл

Термальный циклер (также известный как термоциклер , машина ПЦР или усилитель ДНК ) является лабораторным аппаратом, чаще всего используемым для амплификации сегментов ДНК посредством полимеразной цепной реакции (ПЦР). ^{[ 1 ]} Тепловые циклеры также могут использоваться в лабораториях для облегчения других чувствительных к температуре реакций, включая переваривание рестрикционного фермента или быстрая диагностика. ^{[ 2 ]} Устройство имеет тепловой блок с отверстиями, где можно вставить трубки, удерживающие реакционные смеси. Затем циклер повышает и снижает температуру блока на дискретных, заранее запрограммированных этапах.

История

Самые ранние тепловые циклеры были разработаны для использования с Klenow ДНК -полимеразы I. фрагментом Поскольку этот фермент разрушается во время каждой стадии нагрева процесса амплификации, новый фермент должен был добавлять каждый цикл. Это привело к громоздкой машине на основе автоматизированного пипеттора , с открытыми реакционными трубками. Позже, процесс ПЦР был адаптирован к использованию термостабильной ДНК -полимеразы из Thermus Aquaticus , который значительно упростил конструкцию термоциклового цикла. В то время как на некоторых старых машинах блок погружается в масляную ванну для контроля температуры, в современных машинах ПЦР элемент пельтье обычно используется . Качественные тепловые циклеры часто содержат серебряные блоки для достижения быстрых изменений температуры и равномерной температуры по всему блоку. Другие велосипеды имеют несколько блоков с высокой теплоемкостью, каждый из которых сохраняется при постоянной температуре, а реакционные трубки перемещаются между ними посредством автоматического процесса. Были созданы миниатюрные термические велосипеды, в которых реакционная смесь перемещается через канал через горячие и холодные зоны на Микрофлюидный чип. Тепловые циклеры, разработанные для количественной ПЦР, имеют оптические системы, которые позволяют контролировать флуоресценцию во время реакционного цикла.

Современные инновации

Современные тепловые циклеры оснащены нагретой крышкой, которая прижимает крышки реакционных труб. Это предотвращает конденсацию воды из реакционных смесей на внутренних веществах крышек. слой минерального масла Традиционно для этой цели использовался . Некоторые термические велосипеды оснащены полностью регулируемой нагретой крышкой, чтобы обеспечить нестандартные или разнообразные типы ПЦР. ^{[ 3 ]}

Некоторые термические циклеры оснащены несколькими блоками, позволяющими несколько различных ПЦР одновременно выполнять . Некоторые модели также имеют градиентную функцию, чтобы обеспечить различные температуры в разных частях блока. Это особенно полезно при тестировании подходящих температур отжига для праймеров ПЦР .

Ссылки

^ Вейер, Ху; Грей, JW (Jul - Aug 1988). «Программируемая система для выполнения полимеразной цепной реакции». ДНК (Мэри Энн Либерт, Inc.) . 7 (6): 441–7. PMID 3203600 .
^ Хиггинс, Джеймс А.; Насарабади, Шанаваз; Карнс, Джеффри С.; Шелтон, Даниэль Р.; Купер, Мэри; Gbakima, AIAH; Купман, Рональд П. (1 августа 2003 г.). «Руковочный термоцикл в реальном времени для обнаружения бактериальных патогенов». Биосенсоры и биоэлектроника . 18 (9): 1115–1123. doi : 10.1016/s0956-5663 (02) 00252-x .
^ «Самый« самый «продвинутый» термоциклер еще - получить информированные » . Получите информацию . 2014-09-29 . Получено 2017-05-31 .

Внешние ссылки

OpenPCR , ПЦР с открытым исходным кодом
ПЦР -поставщик услуг (Великобритания)

[1] Вейер, Ху; Грей, JW (Jul - Aug 1988). «Программируемая система для выполнения полимеразной цепной реакции». ДНК (Мэри Энн Либерт, Inc.) . 7 (6): 441–7. PMID 3203600 .

[2] Хиггинс, Джеймс А.; Насарабади, Шанаваз; Карнс, Джеффри С.; Шелтон, Даниэль Р.; Купер, Мэри; Gbakima, AIAH; Купман, Рональд П. (1 августа 2003 г.). «Руковочный термоцикл в реальном времени для обнаружения бактериальных патогенов». Биосенсоры и биоэлектроника . 18 (9): 1115–1123. doi : 10.1016/s0956-5663 (02) 00252-x .

[3] «Самый« самый «продвинутый» термоциклер еще - получить информированные » . Получите информацию . 2014-09-29 . Получено 2017-05-31 .

[ 1 ]

[ 2 ]

[ 3 ]