Термоцикл

Термальный циклер (также известный как термоциклер , машина ПЦР или усилитель ДНК ) является лабораторным аппаратом, чаще всего используемым для амплификации сегментов ДНК посредством полимеразной цепной реакции (ПЦР). [ 1 ] Тепловые циклеры также могут использоваться в лабораториях для облегчения других чувствительных к температуре реакций, включая переваривание рестрикционного фермента или быстрая диагностика. [ 2 ] Устройство имеет тепловой блок с отверстиями, где можно вставить трубки, удерживающие реакционные смеси. Затем циклер повышает и снижает температуру блока на дискретных, заранее запрограммированных этапах.
История
[ редактировать ]
Самые ранние тепловые циклеры были разработаны для использования с Klenow ДНК -полимеразы I. фрагментом Поскольку этот фермент разрушается во время каждой стадии нагрева процесса амплификации, новый фермент должен был добавлять каждый цикл. Это привело к громоздкой машине на основе автоматизированного пипеттора , с открытыми реакционными трубками. Позже, процесс ПЦР был адаптирован к использованию термостабильной ДНК -полимеразы из Thermus Aquaticus , который значительно упростил конструкцию термоциклового цикла. В то время как на некоторых старых машинах блок погружается в масляную ванну для контроля температуры, в современных машинах ПЦР элемент пельтье обычно используется . Качественные тепловые циклеры часто содержат серебряные блоки для достижения быстрых изменений температуры и равномерной температуры по всему блоку. Другие велосипеды имеют несколько блоков с высокой теплоемкостью, каждый из которых сохраняется при постоянной температуре, а реакционные трубки перемещаются между ними посредством автоматического процесса. Были созданы миниатюрные термические велосипеды, в которых реакционная смесь перемещается через канал через горячие и холодные зоны на Микрофлюидный чип. Тепловые циклеры, разработанные для количественной ПЦР, имеют оптические системы, которые позволяют контролировать флуоресценцию во время реакционного цикла.
Современные инновации
[ редактировать ]
Современные тепловые циклеры оснащены нагретой крышкой, которая прижимает крышки реакционных труб. Это предотвращает конденсацию воды из реакционных смесей на внутренних веществах крышек. слой минерального масла Традиционно для этой цели использовался . Некоторые термические велосипеды оснащены полностью регулируемой нагретой крышкой, чтобы обеспечить нестандартные или разнообразные типы ПЦР. [ 3 ]
Некоторые термические циклеры оснащены несколькими блоками, позволяющими несколько различных ПЦР одновременно выполнять . Некоторые модели также имеют градиентную функцию, чтобы обеспечить различные температуры в разных частях блока. Это особенно полезно при тестировании подходящих температур отжига для праймеров ПЦР .
Ссылки
[ редактировать ]- ^ Вейер, Ху; Грей, JW (Jul - Aug 1988). «Программируемая система для выполнения полимеразной цепной реакции». ДНК (Мэри Энн Либерт, Inc.) . 7 (6): 441–7. PMID 3203600 .
- ^ Хиггинс, Джеймс А.; Насарабади, Шанаваз; Карнс, Джеффри С.; Шелтон, Даниэль Р.; Купер, Мэри; Gbakima, AIAH; Купман, Рональд П. (1 августа 2003 г.). «Руковочный термоцикл в реальном времени для обнаружения бактериальных патогенов». Биосенсоры и биоэлектроника . 18 (9): 1115–1123. doi : 10.1016/s0956-5663 (02) 00252-x .
- ^ «Самый« самый «продвинутый» термоциклер еще - получить информированные » . Получите информацию . 2014-09-29 . Получено 2017-05-31 .
Внешние ссылки
[ редактировать ]- OpenPCR , ПЦР с открытым исходным кодом
- ПЦР -поставщик услуг (Великобритания)