Ячейки КБМ-7

Клетки KBM-7 представляют собой хронического миелогенного лейкоза (ХМЛ), клеточную линию используемую для биомедицинских исследований. Как и все линии раковых клеток , они бессмертны и могут делиться бесконечно. Уникальным аспектом клеточной линии KBM-7 является то, что она почти гаплоидна , то есть содержит только одну копию большинства своих хромосом. ^[1] Хромосомы человека обычно диплоидны, что означает наличие двух копий каждой хромосомы.

Источник

Клетки KBM-7 были получены от 39-летнего мужчины с хроническим миелолейкозом в стадии бластного криза. ^[1] Исходная клеточная линия содержала как почти гаплоидные , так и гипердиплоидные клоны. Последующее субклонирование дало чистую, почти гаплоидную клеточную линию. ^[2] Анализ генома показал, что помимо дисомной хромосомы 8, в двух копиях присутствует фрагмент хромосомы 15 размером 30 мегабаз. ^[3] Подобно другим линиям клеток CML (например, K562 ), клетки KBM-7 положительны по филадельфийской хромосоме, содержащей онкогенный слитый белок BCR-ABL. Клетки KBM-7 были перепрограммированы для получения клеточной линии HAP1 , которая также является моносомной по хромосоме 8. ^[4]

Выращивание и применение

Клетки KBM-7 растут в суспензии и поддерживаются в модифицированной среде Дульбекко Искова (IMDM), дополненной 10% фетальной бычьей сывороткой . Они делятся примерно каждые 24 часа. ^{[ нужна ссылка ]}

КБМ-7 нашел применение в различных геномных исследованиях; линия клеток была исследована в экспериментах по подавлению генов , была перепрограммирована в линию стволовых клеток и послужила тестовой моделью для новых кандидатов на лекарства. ^[5]

Значение

Один из методов изучения функции гена включает «выбивание» гена путем индукции мутации. Это приводит к тому, что полученный генный продукт становится нефункциональным, и тогда исследователи смогут увидеть, как это влияет на функцию клетки в целом. Многие процедуры редактирования генов имеют очень низкую эффективность, и часто необходимо удалить обе копии хромосом млекопитающих, чтобы увидеть фенотипический эффект. Наличие почти гаплоидной клеточной линии, такой как KBM-7, значительно повышает эффективность этих исследований, поскольку необходимо выключить только один ген. ^[6]

Ссылки

^ Перейти обратно: ^а ^б Андерссон Б.С., Беран М., Патхак С., Гудакр А., Барлоги Б. и МакКреди К.Б. (1987). «Ph-положительный хронический миелолейкоз с почти гаплоидной конверсией in vivo и созданием постоянно растущей клеточной линии со схожим цитогенетическим паттерном». Рак Генет. Цитогенет . 24 (2): 335–343. дои : 10.1016/0165-4608(87)90116-6 . ПМИД 3466682 . {{cite journal}}: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка )
^ Котецкий М., Редди П.С., Кокран Б.Х. (1999). «Выделение и характеристика почти гаплоидной клеточной линии человека». Эксп. Сотовый Res . 252 (2): 273–80. CiteSeerX 10.1.1.24.783 . дои : 10.1006/excr.1999.4656 . ПМИД 10527618 .
^ Бюркштюммер Т, Баннинг С, Хайнцль П., Шобсбергер Р., Керцендорфер С., Паулер Ф.М., Чен Д., Они Н., Шишлик Ф., Ребсамен М., Смида М., Фесе де ла Крус Ф., Лапао А., Лист М., Эйзингер Б., Гуенцль П.М. , Бломен В.А., Конопка Т., Гапп Б., Парапатикс К., Майер Б., Штёкль Дж., Фишль В., Салич С., Таба Казари М.Р., Кнапп С., Беннетт К.Л., Бок С., Колинг Дж., Краловичс Р., Аммерер Г., Казари Г., Бруммелькамп Т.Р., Суперти-Фурга Г., Нейман С.М. (2013). «Коллекция обратимых генных ловушек усиливает гаплоидную генетику в клетках человека» . НатМетоды . 10 (10): 965–71. дои : 10.1038/nmeth.2609 . ПМК 6342250 . ПМИД 24161985 .
^ Каретт Дж.Э., Раабен М., Вонг А.С., Герберт А.С., Оберностерер Г., Мулхеркар Н., Кюне А.И., Кранцуш П.Дж., Гриффин А.М., Рутель Г., Дал Син П., Дай Дж.М., Уилан С.П., Чандран К., Бруммелькамп Т.Р. (2011). «Для проникновения вируса Эбола необходим переносчик холестерина Ниманна-Пика C1» . Природа . 477 (7364): 340–3. Бибкод : 2011Natur.477..340C . дои : 10.1038/nature10348 . ПМК 3175325 . ПМИД 21866103 .
^ Эсслетцбихлер, Патрик; и др. (декабрь 2014 г.). «Мегабазовая делеция с использованием CRISPR/Cas9 для создания полностью гаплоидной клеточной линии человека» . Геномные исследования . 24 (12): 2059–206. дои : 10.1101/гр.177220.114 . ПМЦ 4248322 . ПМИД 25373145 .
^ Дункан, Лидия М.; Тиммс, Ричард Т.; Заводски, Эстер; Кано, Флоренция; Дуган, Гордон; Рандоу, Феликс; Ленер, Пол Дж. (22 июня 2012 г.). «Фенотипический отбор на основе флуоресценции позволяет осуществлять прямой генетический скрининг гаплоидных клеток человека» . ПЛОС ОДИН . 7 (6): e39651. Бибкод : 2012PLoSO...739651D . дои : 10.1371/journal.pone.0039651 . ISSN 1932-6203 . ПМК 3382162 . ПМИД 22745803 .

Внешние ссылки

Запись о целлозавре для КБМ-7

[andersson-1] Перейти обратно: ^а ^б Андерссон Б.С., Беран М., Патхак С., Гудакр А., Барлоги Б. и МакКреди К.Б. (1987). «Ph-положительный хронический миелолейкоз с почти гаплоидной конверсией in vivo и созданием постоянно растущей клеточной линии со схожим цитогенетическим паттерном». Рак Генет. Цитогенет . 24 (2): 335–343. дои : 10.1016/0165-4608(87)90116-6 . ПМИД 3466682 . {{cite journal}}: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка )

[2] Котецкий М., Редди П.С., Кокран Б.Х. (1999). «Выделение и характеристика почти гаплоидной клеточной линии человека». Эксп. Сотовый Res . 252 (2): 273–80. CiteSeerX 10.1.1.24.783 . дои : 10.1006/excr.1999.4656 . ПМИД 10527618 .

[3] Бюркштюммер Т, Баннинг С, Хайнцль П., Шобсбергер Р., Керцендорфер С., Паулер Ф.М., Чен Д., Они Н., Шишлик Ф., Ребсамен М., Смида М., Фесе де ла Крус Ф., Лапао А., Лист М., Эйзингер Б., Гуенцль П.М. , Бломен В.А., Конопка Т., Гапп Б., Парапатикс К., Майер Б., Штёкль Дж., Фишль В., Салич С., Таба Казари М.Р., Кнапп С., Беннетт К.Л., Бок С., Колинг Дж., Краловичс Р., Аммерер Г., Казари Г., Бруммелькамп Т.Р., Суперти-Фурга Г., Нейман С.М. (2013). «Коллекция обратимых генных ловушек усиливает гаплоидную генетику в клетках человека» . НатМетоды . 10 (10): 965–71. дои : 10.1038/nmeth.2609 . ПМК 6342250 . ПМИД 24161985 .

[4] Каретт Дж.Э., Раабен М., Вонг А.С., Герберт А.С., Оберностерер Г., Мулхеркар Н., Кюне А.И., Кранцуш П.Дж., Гриффин А.М., Рутель Г., Дал Син П., Дай Дж.М., Уилан С.П., Чандран К., Бруммелькамп Т.Р. (2011). «Для проникновения вируса Эбола необходим переносчик холестерина Ниманна-Пика C1» . Природа . 477 (7364): 340–3. Бибкод : 2011Natur.477..340C . дои : 10.1038/nature10348 . ПМК 3175325 . ПМИД 21866103 .

[5] Эсслетцбихлер, Патрик; и др. (декабрь 2014 г.). «Мегабазовая делеция с использованием CRISPR/Cas9 для создания полностью гаплоидной клеточной линии человека» . Геномные исследования . 24 (12): 2059–206. дои : 10.1101/гр.177220.114 . ПМЦ 4248322 . ПМИД 25373145 .

[6] Дункан, Лидия М.; Тиммс, Ричард Т.; Заводски, Эстер; Кано, Флоренция; Дуган, Гордон; Рандоу, Феликс; Ленер, Пол Дж. (22 июня 2012 г.). «Фенотипический отбор на основе флуоресценции позволяет осуществлять прямой генетический скрининг гаплоидных клеток человека» . ПЛОС ОДИН . 7 (6): e39651. Бибкод : 2012PLoSO...739651D . дои : 10.1371/journal.pone.0039651 . ISSN 1932-6203 . ПМК 3382162 . ПМИД 22745803 .

[1]

[2]

[3]

[4]

[5]

[6]