Вектор шаттла
Челночный вектор — это вектор (обычно плазмида ), сконструированный таким образом, чтобы он мог размножаться в двух разных видах хозяев. [1] Следовательно, ДНК, встроенную в челночный вектор, можно тестировать или манипулировать ею в двух разных типах клеток. Основное преимущество этих векторов заключается в том, что ими можно манипулировать в E. coli , а затем использовать в системе, которую сложнее или медленнее использовать (например, в дрожжах).
Челночные векторы включают плазмиды, которые могут размножаться в эукариотах и прокариотах (например, Saccharomyces cerevisiae и Escherichia coli ) или в различных видах бактерий (например, E.coli и Rhodococcus erythropolis ). Существуют также аденовирусные челночные векторы, которые могут размножаться в E. coli и млекопитающих.
Челночные векторы часто используются для быстрого создания нескольких копий гена в E. coli (амплификация). Их также можно использовать для in vitro экспериментов и модификаций (например, мутагенеза , ПЦР ).
Одним из наиболее распространенных типов челночных векторов является дрожжевой челночный вектор. [2] Почти все широко используемые векторы S. cerevisiae являются челночными векторами. Дрожжевые челночные векторы содержат компоненты, которые позволяют осуществлять репликацию и селекцию как в клетках E. coli , так и в дрожжевых клетках. Компонент E.coli дрожжевого челночного вектора включает точку начала репликации и селектируемый маркер, например, устойчивость к антибиотикам , бета-лактамазу , бета-галактозидазу. Дрожжевой компонент дрожжевого челночного вектора включает автономно реплицирующуюся последовательность (ARS), дрожжевую центромеру (CEN) и селектируемый дрожжевой маркер (например, URA3 , ген, который кодирует фермент синтеза урацила , Lodish et al. 2007).
Ссылки
[ редактировать ]- ^ "вектор И mcb[книга] - Книги - NCBI" . www.ncbi.nlm.nih.gov .
- ^ «Биохимия и биофизика - Медицинский центр Рочестерского университета» .
- Введение в генетический анализ, Гриффитс и др., 7-е изд. ISBN 0-7167-3771-X
- Принципы генетики, Снустад и Симмонс, 4-е изд. ISBN 0-471-69939-X
- Молекулярно-клеточная биология, Лодиш и др., 6-е изд. ISBN 1-4292-0314-5 Бесплатно в Интернете: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/bv.fcgi?rid=mcb.TOC (по состоянию на 17 октября 2007 г.)
- Шерман, Фред. «9 дрожжевых векторов» http://dbb.urmc.rochester.edu/labs/Sherman_f/yeast/9.html (по состоянию на 30 сентября 2007 г.).
- Ян и др., Характеристика детерминант мобилизации pAN12, небольшого репликона Rhodococcus erythropolis AN12. Плазмида 57, 71-81.