Фракционирование клеток

В клеточной биологии фракционирование клеток — это процесс, используемый для разделения клеточных компонентов при сохранении индивидуальных функций каждого компонента. Это метод, который изначально использовался для демонстрации клеточного расположения различных биохимических процессов. Другое применение субклеточного фракционирования заключается в обеспечении обогащенного источника белка для дальнейшей очистки и облегчении диагностики различных болезненных состояний.

Гомогенизация

Ткани обычно гомогенизируют в буферном растворе изотоническом , чтобы остановить осмотическое повреждение. Механизмы гомогенизации включают измельчение, измельчение, измельчение, изменение давления, осмотический шок , замораживание-оттаивание и ультразвук . Затем образцы хранят в холоде, чтобы предотвратить ферментативное повреждение.Это образование однородной массы клеток (клеточного гомогената или клеточной суспензии ). Он включает измельчение клеток в подходящей среде в присутствии определенных ферментов с правильным pH, ионным составом и температурой. Например, пектиназа , которая переваривает среднюю пластинку растительных клеток.

Фильтрация

Этот шаг может не потребоваться в зависимости от источника клеток . животных Однако из тканей может образоваться соединительная ткань, которую необходимо удалить. Обычно фильтрация достигается либо проливом через марлю , либо с помощью всасывающего фильтра и керамического фильтра соответствующего класса.

Очищение

Очистка достигается дифференциальным центрифугированием – последовательное увеличение силы тяжести приводит к последовательному разделению органелл в соответствии с их плотностью .

См. также

• Разрушение клеток

Среды для разделения клеток по плотности:

• Перколл
• Фиколл