Перколл
Percoll — это инструмент для эффективного разделения по плотности в клеточной биологии , который впервые был сформулирован Пертофтом и его коллегами. [2] Он используется для выделения клеток , органелл и/или вирусов плотности центрифугированием . Перколл состоит из коллоидных частиц диоксида кремния диаметром 15–30 нм (23% по весу в воде), покрытых поливинилпирролидоном ( ПВП).Перколл хорошо подходит для экспериментов с градиентом плотности, поскольку он обладает низкой вязкостью по сравнению с альтернативами, низкой осмолярностью и отсутствием токсичности по отношению к клеткам и их компонентам.
Percoll является зарегистрированной торговой маркой GE Healthcare .
Характеристики
[ редактировать ]Перколл практически не диффундирует с течением времени, что приводит к образованию очень стабильных градиентов. Таким образом, как прерывистые, так и непрерывные градиенты плотности Перколла можно подготовить за несколько недель, что обеспечивает высокую воспроизводимость и простоту использования. [3]
Прошлое использование в искусственном воспроизводстве
[ редактировать ]Перколл ранее использовался во вспомогательных репродуктивных технологиях (ВРТ) для отбора сперматозоидов из спермы путем центрифугирования в градиенте плотности для использования в таких методах, как экстракорпоральное оплодотворение или внутриматочная инсеминация . Однако в 1996 году Pharmacia разослала лабораториям письмо, в котором говорилось, что Перколл следует использовать только в исследовательских целях, а не в клинических. Pharmacia не продавала его как средство для подготовки спермы; он был переупакован и продан как таковой сторонними производителями. Предупреждающее письмо FDA было вызвано опасениями, что PVP может вызвать повреждение спермы (неизвестная проблема), а также тем, что некоторые партии Percoll содержали высокие уровни эндотоксина ( известная проблема). Последнее беспокойство также относится к использованию Перколла с любыми другими клетками, которые могут быть введены обратно пациенту, поскольку эндотоксин может вызвать серьезное воспаление и лихорадку. его заменили другими коллоидами . С тех пор в индустрии ВРТ [4]
Ссылки
[ редактировать ]- ^ Руссманн Л., Юнг А., Гейдрих Х.Г. (1982). «Использование градиентов Перколла, элютриатора роторного элюирования и окрашивания митрамицином для выделения и идентификации внутриэритроцитарных стадий Plasmodium berghei ». Zeitschrift für Parasitenkunde . 66 (3): 273–280. дои : 10.1007/BF00925344 . ПМИД 6177116 .
- ^ Пертофт, Х.; Лоран, TC; Лаас, Т.; Кагедал, Л. (1978). «Градиенты плотности, полученные из частиц коллоидного кремнезема, покрытых поливинилпирролидоном (Percoll)». Аналитическая биохимия . 88 (1): 271–282. дои : 10.1016/0003-2697(78)90419-0 .
- ^ «Среды для разделения клеток» . Цитива . Проверено 24 июня 2023 г.
- ^ Мортимер, Д. (май – июнь 2000 г.). «Методы подготовки спермы» . Журнал андрологии . 21 (3): 357–66. ПМИД 10819443 . Проверено 5 мая 2010 г.