Термический циклер

Термоциклер термоциклер (также известный как аппарат , , машина ПЦР или усилитель ДНК ) — это лабораторный чаще всего используемый для амплификации сегментов ДНК посредством полимеразной цепной реакции (ПЦР). ^[1] Термоциклеры также могут использоваться в лабораториях для облегчения других чувствительных к температуре реакций, включая расщепление ферментами рестрикции или быструю диагностику. ^[2] Устройство имеет термоблок с отверстиями, куда можно вставлять пробирки с реакционными смесями. Затем циклер повышает и понижает температуру блока дискретными, заранее запрограммированными шагами.

История

Самые ранние термоциклеры были разработаны для использования с фрагментом Кленова ДНК -полимеразы I. Поскольку этот фермент разрушается на каждом этапе нагревания процесса амплификации, каждый цикл приходилось добавлять новый фермент. Это привело к созданию громоздкой машины, основанной на автоматизированном пипетке , с открытыми реакционными трубками. Позже процесс ПЦР был адаптирован к использованию термостабильной ДНК-полимеразы Thermus aquaticus , что значительно упростило конструкцию термоциклера. В то время как в некоторых старых машинах блок погружается в масляную ванну для контроля температуры, в современных машинах для ПЦР элемент Пельтье обычно используется . Качественные термоциклеры часто содержат серебряные блоки для достижения быстрого изменения температуры и равномерной температуры по всему блоку. Другие циклеры имеют несколько блоков с высокой теплоемкостью, в каждом из которых поддерживается постоянная температура, а реакционные трубки перемещаются между ними посредством автоматизированного процесса. Созданы миниатюрные термоциклеры, в которых реакционная смесь движется по каналам через горячие и холодные зоны по микрофлюидный чип. Термоциклеры, предназначенные для количественной ПЦР, оснащены оптическими системами, которые позволяют контролировать флуоресценцию во время циклической реакции.

Современные инновации

Современные термоциклеры оснащены подогреваемой крышкой, которая прижимается к крышкам реакционных трубок. Это предотвращает конденсацию воды из реакционных смесей на внутренней стороне крышек. слой минерального масла Традиционно для этой цели использовался . Некоторые термоциклеры оснащены полностью регулируемой крышкой с подогревом, что позволяет использовать нестандартные или разнообразные типы пластиковой посуды для ПЦР. ^[3]

Некоторые термоциклеры оснащены несколькими блоками, позволяющими несколько разных ПЦР одновременно проводить . Некоторые модели также имеют функцию градиента , позволяющую поддерживать разную температуру в разных частях блока. Это особенно полезно при тестировании подходящих температур отжига для праймеров для ПЦР .

Ссылки

^ Вейер, Ху; Грей, JW (июль – август 1988 г.). «Программируемая система для проведения полимеразной цепной реакции». ДНК (Mary Ann Liebert, Inc.) . 7 (6): 441–7. ПМИД 3203600 .
^ Хиггинс, Джеймс А.; Насарабади, Шанаваз; Карнс, Джеффри С.; Шелтон, Дэниел Р.; Купер, Мэри; Гбакима, Айя; Купман, Рональд П. (1 августа 2003 г.). «Портативный термоциклер реального времени для обнаружения бактериальных патогенов». Биосенсоры и биоэлектроника . 18 (9): 1115–1123. дои : 10.1016/S0956-5663(02)00252-X .
^ «Самый «продвинутый» термоциклер — будьте в курсе» . Получите информацию . 29 сентября 2014 г. Проверено 31 мая 2017 г.

Внешние ссылки

OpenPCR , термоциклер ПЦР с открытым исходным кодом
Поставщик услуг ПЦР-аппарата (Великобритания)

[1] Вейер, Ху; Грей, JW (июль – август 1988 г.). «Программируемая система для проведения полимеразной цепной реакции». ДНК (Mary Ann Liebert, Inc.) . 7 (6): 441–7. ПМИД 3203600 .

[2] Хиггинс, Джеймс А.; Насарабади, Шанаваз; Карнс, Джеффри С.; Шелтон, Дэниел Р.; Купер, Мэри; Гбакима, Айя; Купман, Рональд П. (1 августа 2003 г.). «Портативный термоциклер реального времени для обнаружения бактериальных патогенов». Биосенсоры и биоэлектроника . 18 (9): 1115–1123. дои : 10.1016/S0956-5663(02)00252-X .

[3] «Самый «продвинутый» термоциклер — будьте в курсе» . Получите информацию . 29 сентября 2014 г. Проверено 31 мая 2017 г.

[1]

[2]

[3]