Суправитальное окрашивание
Суправитальное окрашивание — это метод окрашивания , используемый в микроскопии для изучения живых клеток, удаленных из организма. Оно отличается от прижизненного окрашивания , которое осуществляется путем инъекции или иного введения красителя в организм. Таким образом, прижизненное окрашивание может иметь большую токсичность , поскольку лишь немногим клеткам необходимо пережить его в течение короткого времени. Термин « витальное пятно » используется некоторыми авторами для обозначения прижизненного окрашивания, а другие — как синоним наджизненного окрашивания, при этом основная концепция заключается в том, что исследуемая клетка все еще жива. Поскольку клетки живы и незафиксированы, вне тела наджизненные пятна носят временный характер. [1] [2]
выполняется Наиболее распространенное прижизненное окрашивание ретикулоцитов с использованием нового метиленового синего или блестящего крезилового синего , что позволяет увидеть ретикулофиламентный рисунок рибосом , характерно осаждаемых в этих живых незрелых эритроцитах при прижизненном окрашивании. Подсчитав количество таких клеток, можно определить скорость образования эритроцитов, что дает представление об активности костного мозга и анемии . [3] В этом отличие от витального окрашивания , когда используемый краситель исключен из живых клеток, так что положительно окрашиваются только мертвые клетки. (Жизненно важные красители включают такие красители, как трипановый синий и йодид пропидия , которые либо слишком объемны, либо слишком заряжены, чтобы проникнуть через клеточную мембрану, либо активно и быстро выводятся живыми клетками.)
Суправитальное окрашивание можно комбинировать с окрашиванием антителами на клеточной поверхности ( иммунофлуоресценция ) для таких применений, как анализ FACS . [4] Иммунофлуоресценцию также можно проводить внутри живых клеток путем обратимой пермеабилизации клеток с использованием детергента Triton X-100 . Тщательно подобранная концентрация, соответствующая количеству клеток, предварительная обработка может обеспечить доступ молекул массой от 1 до 150 килодальтон внутрь клетки. [5] Хотя в этом контексте антитела можно использовать аналогичным образом, термин «суправитальное пятно» обычно применяется к более мелким химическим веществам, которые сами по себе обладают подходящими свойствами.
Примеры распространенных суправитальных красителей
[ редактировать ]Суправитальные красители для эритроцитов: [6]
- Новый метиленовый синий
- Блестящий крезиловый синий
- Кристаллический фиолетовый
- Метиловый фиолетовый
- Нил синий
Ссылки
[ редактировать ]- ^ «Английский медицинский словарь» .
- ^ Н. Чендлер Фут (1954). «Витальное окрашивание». Анналы Нью-Йоркской академии наук . 59 (2): 259–267. дои : 10.1111/j.1749-6632.1954.tb45936.x . ПМИД 13229212 .
- ^ Джон П. Грир; Максвелл Майер Винтроб (2008). Клиническая гематология Винтроба . ISBN 9780781765077 .
- ^ Тина Карлсен; Ричард Ланглуа; Эрин Бисселл. «Заключительный отчет по проверке концепции системы иммуноанализа/окрашивания (IVSS)» (PDF) . Ливерморская национальная лаборатория Лоуренса.
- ^ Энн Л. ван де Вен, Карен Адлер-Сторц и Ребекка Ричардс-Кортум (2009). «Доставка оптических контрастных веществ с использованием Triton-X100, Часть 1: обратимая проницаемость живых клеток для внутриклеточного мечения» . J Биомед Опц . 14 (2): 021012. дои : 10.1117/1.3090448 . ПМЦ 2748244 . ПМИД 19405725 .
{{cite journal}}: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка ) - ^ Глоссарий гематологии, клинической микроскопии и жидкостей организма, 2011 г., CAP.