Фракционирование полевого потока

Полевое фракционирование , сокращенно FFF , ^[1] — метод разделения, изобретенный Дж. Кэлвином Гиддингсом . Метод основан на разделении коллоидных или высокомолекулярных веществ в жидких растворах, протекающих через разделительную платформу, не имеющую неподвижной фазы . Она похожа на жидкостную хроматографию, поскольку работает с разбавленными растворами или суспензиями растворенного вещества, переносимыми проточным элюентом. Сепарация достигается применением поля (гидравлического, центробежного, ^[2] термический, ^[3] электрический, ^[4] магнитный, ^[5] гравитационный, ...) или поперечный поток, перпендикулярный направлению транспортировки образца, который прокачивается через длинный и узкий ламинарный канал. Поле воздействует на компоненты образца силой, концентрируя их к одной из стенок канала, называемой стенкой накопления. ^[6] Сила взаимодействует со свойствами образца, в результате чего происходит разделение, другими словами, компоненты демонстрируют различную «подвижность» под действием силы, действующей пересекающего поля. Например, для гидравлического метода или метода FFF с перекрестным потоком свойством, определяющим разделение, является коэффициент поступательной диффузии или гидродинамический размер. Для теплового поля (нагревающего одну стенку и охлаждающего другую) это соотношение теплового и поступательного коэффициентов диффузии.

Приложения и методы обнаружения

ФФФ применим в субмикроном диапазоне (от 1 нм до нескольких микрон) в «нормальном» режиме или до 50 микрон в так называемом стерическом режиме. ^[7]^[8] режим. Переход от нормального к стерическому режиму происходит, когда диффузия становится незначительной при размерах выше микрона . FFF уникален своим широким динамическим диапазоном размеров, охватывающим как растворимые макромолекулы, так и растворимые макромолекулы. ^[9] и частицы или коллоиды, которые можно разделить за один анализ.

с высокой молярной массой Типичными областями применения являются полимеры и полимерные композиты , наночастицы , как промышленные, так и экологические, вирусы и вирусоподобные частицы, липидные наночастицы, внеклеточные везикулы и другие типы биологических образцов.

FFF может быть подключен ко всем типам детекторов, известных из ВЭЖХ или ЭХ. Из-за сходства FFF с жидкостной хроматографией, в способах прохождения жидкой подвижной фазы через канал, наиболее распространенными детекторами являются те, которые также используются для ЖХ. Наиболее часто используется детектор UV-VIS из-за его неразрушающего характера. Сочетание многоуглового рассеяния света позволяет рассчитать размер элюируемых фракций и сравнить со значениями, полученными с помощью теории FFF. Еще одним популярным специфическим обнаружением является масс-спектрометрия с индуктивно связанной плазмой, позволяющая характеризовать металлические наночастицы с высокой специфичностью и чувствительностью.

Преимущества

FFF предлагает физическое разделение сложных и неоднородных образцов, которые потенциально невозможно охарактеризовать другими методами разделения, такими как эксклюзионная хроматография . Поскольку неподвижная фаза отсутствует, взаимодействие с поверхностями или материалами насадки колонки меньше. Разделение настраивается путем модуляции силы разделительного поля. FFF является щадящим методом и не оказывает физического воздействия на хрупкие образцы, а раствор-носитель может быть адаптирован с учетом наилучшей стабильности образца. FFF имеет хорошо проработанную теорию, которую можно использовать для нахождения условий разделения для достижения оптимального результата без серии экспериментов методом проб и ошибок. Также можно извлечь информацию о физических параметрах фракций пробы из теории FFF, хотя почти все пользователи в основном полагаются на детекторы светорассеяния для измерения размера элюируемых фракций пробы.

Ограничения

FFF не работает для малых молекул из-за их быстрой диффузии. Для эффективного разделения образец должен быть сконцентрирован очень близко к стенке накопления (на расстоянии менее 10 мкм), что требует, чтобы скорость дрейфа, вызванная силовым полем, была на два порядка выше коэффициента диффузии. Максимальная напряженность поля, которая может быть создана в канале FFF, определяет нижний диапазон разнесения. Для современных приборов это примерно 1 нм.

Хотя FFF является чрезвычайно универсальным методом, не существует универсального метода, подходящего всем. Различные методы FFF требуют специального оборудования. В настоящее время используется только так называемое фракционирование поля-потока с асимметричным потоком (AF4). ^[10] получил широкое распространение. Другие методы, такие как центробежный, термический или электрический FFF, все еще занимают свою нишу.

FFF ведет себя иначе, чем колоночная хроматография, и может быть нелогичным для пользователей ВЭЖХ или ЭХ. Понимание принципа работы FFF жизненно важно для успешного применения метода.

Открытие и общие принципы

FFF был разработан и впервые опубликован Дж. Кэлвином Гиддингсом в 1966 году. ^[11] и в 1976 г. ^[1] Гиддингс опубликовал множество статей о Flow-FFF. ^[12] это самая важная техника FFF на сегодняшний день. Гиддингс, которому приписывают изобретение FFF, был профессором химии и специалистом по хроматографии и методам разделения в Университете Юты .

Анимация иллюстрирует, как разделение в FFF обусловлено диффузией частиц в параболическом профиле потока. Показаны два типа частиц; красные меньше синих. Сила прикладывается сверху (здесь это поперечный поток, используемый при несимметричном потоке fff). Частицы диффундируют против этой силы. В среднем более мелкие красные частицы находятся выше над стенкой накопления по сравнению с синими частицами. Поток элюата в продольном направлении показан стрелками потока, указывающими профиль скорости. Частицы, подпрыгнувшие выше, переносятся быстрее других. В статистическом процессе многих частиц и многих этапов диффузии облако, образованное красными, более мелкими частицами, мигрирует быстрее и отделяется от более медленных синих частиц.

Как уже говорилось выше, при автопоточном фракционировании поле может быть гидравлическим (с поперечным потоком через полупроницаемую мембрану в качестве накопительной стенки), гравитационным , центробежным , тепловым , электрическим или магнитным . Во всех случаях механизм разделения возникает за счет различий в подвижности частиц под действием сил поля, находящихся в стационарном равновесии с силами диффузии : поле вызывает скорость и концентрацию нисходящего дрейфа к стенке накопления, диффузия работает против этого. градиент концентрации. Через определенное время (так называемое время релаксации) две силы уравновешиваются в стационарном равновесии. Лучше всего это представить в виде облака частиц, все компоненты которого находятся в постоянном движении, но с экспоненциальным уменьшением средней концентрации, удаляющейся от стенки накопления вверх в канал. Уменьшение давления воздуха при подъеме от уровня моря имеет такое же экспоненциальное уменьшение, которое описано в барометрической формуле . После достижения релаксации начинается элюирование, поскольку активируется поток в канале. В тонком канале (обычная высота от 250 до 350 мкм) существует параболический профиль скорости ламинарного потока , который характеризуется сильным увеличением скорости потока по мере удаления от стенки аккумуляции. Это определяет скорость конкретной частицы, исходя из ее положения равновесия от стенки канала. Частицы, расположенные ближе к стенке накопления, будут мигрировать медленнее, чем частицы, находящиеся выше. Отношение скорости определенного вида частиц к средней скорости жидкости называется коэффициентом удерживания R. В FFF для эффективного разделения R должен быть ниже 0,2, типичные значения находятся в диапазоне от 0,02 до 0,1.

Теория и метод

Разделение при фракционировании полевого потока происходит в ламинарном канале. Он состоит из верхнего и нижнего блока, разделенных проставкой. В проставке имеется вырезанная полость (прямоугольной или трапециевидной формы), которая создает объем канала при уплотнении проставки между блоками. Альтернативно, канал можно фрезеровать в верхнем блоке в виде полости. Канал спроектирован таким образом, чтобы обеспечить возможность применения силового поля, а это означает, что для каждого метода FFF необходим выделенный канал. Проба вводится в канал в виде разбавленного раствора или суспензии и отделяется во время миграции от входа к выходу, когда раствор-носитель прокачивается через канал. За выходным отверстием канала размещают один или несколько детекторов, анализирующих элюируемые фракции.

Гиддингс и его коллеги разработали теорию, описывающую общее уравнение удерживания, которое является общим для всех методов FFF.

Связь силы (F) со временем удерживания (t _r )

Связь между разделительным силовым полем и временем удерживания может быть выведена из первых принципов. Рассмотрим две популяции частиц внутри канала FFF. Перекрестное поле направляет оба облака частиц к нижней стенке «накопления». Противоположностью этому силовому полю является естественная диффузия частиц, или броуновское движение , которое вызывает противодействующее движение. Когда эти два транспортных процесса достигают равновесия, концентрация частиц c приближается к экспоненциальной функции высоты x над стенкой накопления, как показано в уравнении ( 1 ).

c=c_{0}e^{\frac {-x}{\ell }}

( 1 )

$\ell$ представляет собой характерную высоту облака частиц. Это относится к средней высоте, которую облако частиц достигает внутри канала, и только тогда, когда значение для $\ell$ отличается тем, что произойдет разделение популяций частиц. $\ell$ каждого компонента может быть связана с силой, приложенной к каждой отдельной частице, или с соотношением коэффициента диффузии D и скорости дрейфа U. ^[13]

\ell ={\frac {kT}{F}}={\frac {D}{U}}

( 2 )

k — постоянная Больцмана, T — абсолютная температура, а F — сила, действующая на отдельную частицу силовым полем. Это показывает, как характерное значение возвышения обратно пропорционально приложенной силе. Следовательно, F управляет процессом разделения. Следовательно, изменяя напряженность поля, разделением можно управлять для достижения оптимальных уровней.

Скорость V облака молекул — это просто средняя скорость экспоненциального распределения, заключенного в параболическом профиле потока.

Время удерживания t _r можно записать как:

t_{r}={\frac {L}{V}}

( 3 )

Где L — длина канала.

В FFF удерживание обычно выражается через коэффициент удерживания, который представляет собой время пустоты t ₀ (появление неудерживаемого индикатора), деленное на время удерживания t _r . Уравнение удержания тогда принимает вид:

R={\frac {t_{0}}{t_{r}}}=6\lambda [\operatorname {coth} ({\frac {1}{2\lambda }})-2\lambda ]

( 4 )

где $\lambda$ является $\ell$ разделенное на w, толщину или высоту канала. Заменив kT/F вместо $\ell$ иллюстрирует коэффициент удержания относительно приложенной поперечной силы.

R=6{\frac {kT}{Fw}}[\coth({\frac {Fw}{2kT}})-2{\frac {kT}{Fw}}]

( 5 )

Для эффективной работы значение толщины канала w значительно превышает $\ell$ . В этом случае член в скобках приближается к единице. Следовательно, уравнение 5 можно аппроксимировать следующим образом:

R=6\lambda =6{\frac {kT}{Fw}}

( 6 )

Таким образом, t _r примерно пропорционален F. Разделение полос частиц X и Y, представленное конечным приращением ∆t _r во времени их удерживания, достигается только в том случае, если приращение силы ∆F между ними достаточно. Дифференциал в силе всего 10 ⁻¹⁶ Для этого требуется N.

Величина F и ∆F зависит от свойств частиц, напряженности поля и типа поля. Это позволяет варьировать и адаптировать технику. На основе этого основного принципа возникли многие формы FFF, различающиеся в зависимости от природы приложенной разделительной силы и диапазона размеров молекул, на которые они нацелены.

Фрактограмма

В FFF отображение сигналов детектора как функции времени называется фрактограммой, в отличие от хроматограммы методов колоночной хроматографии. Фрактограмму можно преобразовать в график распределения одного или нескольких физических свойств аналита с использованием теории FFF и/или сигналов детектора. Это может быть размер, молярная масса, заряд и т. д.

Часто эти вещества представляют собой частицы, первоначально суспендированные в небольшом объеме жидкого буфера и проталкиваемые буфером по каналу FFF. Различные скорости частиц определенного вида могут быть обусловлены их размером, массой и/или расстоянием от стенок канала с неоднородной скоростью потока. Таким образом, присутствие различных видов в образце можно идентифицировать путем обнаружения общего свойства на некотором расстоянии вниз по длинному каналу и по полученной фрактограмме, показывающей присутствие различных видов по пикам из-за различного времени прибытия, характерного для каждый вид и его физические и химические свойства.

Формы

Большинство доступных сегодня методов являются усовершенствованием тех, которые были первоначально созданы профессором Гиддингсом почти 4 десятилетия назад.

Симметричный поток

Из этих методов FFF был первым, который был предложен на коммерческой основе. Flow FFF разделяет частицы по размеру, независимо от плотности, и может измерять макромолекулы в диапазоне от 1 нм до 1 мкм. В этом отношении это наиболее универсальный доступный метод FFF. Поперечный поток в Flow FFF входит через пористую фритту в верхней части канала и выходит через выходную фритту из полупроницаемой мембраны на накопительной стенке (т.е. нижней стенке). За последние два десятилетия симметричный поток был заменен асимметричным потоком.

Поток полых волокон

Поток полых волокон FFF (HF5) был разработан Lee et al . (1974). ^[14] HF5 применялся для анализа белков и других макромолекул. HF5 был первой формой проточного FFF, разработанной в 1974 году. Преимущество состоит в том, что HF5 представляет собой одноразовый канальный блок, который можно легко заменить в повседневных условиях. Одним из недостатков HF5 является ограниченный выбор материалов мембраны; доступны только мембраны из полиэфирсульфона (ПЭС). В настоящее время HF5 широко не используется из-за отсутствия гибкости и ограничений по количеству образцов.

Асимметричный поток

С другой стороны, асимметричный поток FFF ( AF4 ) имеет только одну полупроницаемую мембрану на нижней стенке канала. Таким образом, поперечный поток создается жидкостью-носителем, выходящей со дна канала. Это обеспечивает чрезвычайно бережное разделение и «сверхширокий» диапазон разделения. Большинство используемых инструментов FFF представляют собой системы AF4. Основное применение — фармацевтические исследования и разработки белков, вирусов и вирусоподобных частиц, а также липосом. AF4 можно применять в водных и органических растворителях, поэтому этим методом можно разделять и органические полимеры.

Высокотемпературное асимметричное потоковое фракционирование доступно для разделения полимеров с высокой и сверхвысокой молярной массой, растворимых при температуре выше 150 C.

Термальный

Thermal FFF, как следует из названия, создает силу разделения путем приложения температурного градиента к каналу. Верхняя стенка канала нагревается, а нижняя стенка охлаждается, перемещая полимеры и частицы к холодной стенке за счет термодиффузии. Термическое FFF было разработано как метод разделения синтетических полимеров в органических растворителях. Термическое FFF является уникальным среди методов FFF, поскольку оно позволяет разделять макромолекулы как по молярной массе, так и по химическому составу, позволяя разделять фракции полимера с одинаковой молекулярной массой. Сегодня этот метод идеально подходит для характеристики полимеров, гелей и наночастиц.

Одним из основных преимуществ Thermal FFF являются простые и очень четко определенные размеры разделительного канала, что делает возможной межлабораторную или межинструментальную универсальную калибровку, поскольку калибровочные константы Thermal FFF точно описывают соотношение обычной (молекулярной) диффузии. коэффициент D к коэффициенту термодиффузии (или термофоретической подвижности) D _T , которые зависят только от полимера. Таким образом, универсальная калибровка ThFFF может быть перенесена на прибор и в лабораторию, в то время как хорошо известная универсальная калибровка для эксклюзионной хроматографии может быть перенесена с полимера только на один и тот же прибор. ^[15]

Тонкоклеточное фракционирование с разделенным потоком

Тонкоклеточное фракционирование с разделенным потоком (SPLITT) ^[16] это специальный препаративный метод FFF, использующий гравитацию. ^[17] или электрический, ^[18] или диффузионные различия для непрерывного разделения частиц размером более мкм. Система SPLITT имеет два входа и два выхода. Это выполняется путем перекачки образца, погруженного в жидкость, в одно входное отверстие в начале канала с низкой скоростью потока и одновременной закачки жидкости-носителя во второе входное отверстие с гораздо более высокой скоростью потока. Контролируя соотношения скоростей двух входящих потоков и двух выходных потоков, можно контролировать разделение, и компоненты пробы разделяются на две фракции разного размера. Использование только силы тяжести в качестве разделяющей силы делает SPLITT наименее чувствительным методом FFF, ограниченным частицами размером более 1 мкм.

Центробежный

В центробежном FFF поле разделения создается за счет центробежной силы. Канал имеет форму кольца, которое вращается со скоростью вращения, которую можно запрограммировать во время работы. Поток и проба закачиваются в канал и центрифугируются, что позволяет оператору разделить частицы по массе (размеру и плотности). Преимущество центробежного FFF заключается в высоком разрешении по размеру, которого можно достичь путем изменения приложенной силы, поскольку размер частиц пропорционален массе частиц в третьей степени.

Уникальное преимущество центробежного FFF заключается в возможности метода обеспечить высокое разрешение при достаточной плотности плавучести. Это позволяет разделять частицы с разницей в размерах всего 5%.

Преимущество центробежного FFF заключается в том, что частицы и макромолекулы можно разделить по плотности частиц, а не только по размеру частиц. В этом случае две наночастицы золота и серебра одинакового размера могут быть разделены на два пика в соответствии с различиями в плотности наночастиц золота и серебра.

При разделениях AF4 соотношение массы и времени составляет 1:1. При добавлении третьего параметра плотности к центробежному FFF получается соотношение, более похожее на соотношение масса:время в третьей степени. Это приводит к значительно большему различию между пиками и значительному улучшению разрешения. Это может быть особенно полезно для новых продуктов, таких как композиционные материалы и полимеры с покрытием, содержащие наночастицы, т.е. частицы, которые могут не различаться по размеру, но различаются по плотности. Таким образом, две частицы одинакового размера все же могут быть разделены на два пика, при условии, что плотность будет разной.

Ограничение метода заключается в нижнем пределе размера, который зависит от плотности образца. В частности, для биологических образцов предел составляет от 20 до 50 нм в диаметре.

Электрический

В электрическом FFF применяется поперечный электрический ток (постоянный ток), который создает электрическое поле. В зависимости от заряда компонентов образца индуцируется скорость электрофоретического дрейфа, которой противодействует диффузия из броуновского движения, поэтому разделение зависит от соотношения электрофоретической подвижности и размера. Применение электрического FFF ограничено и в настоящее время используется редко. Были разработаны и другие модификации, а именно циклические электрические ФФФ, в которых применяется специальный переменный ток. Это позволяет разделять по электрофоретической подвижности. Другой вариант - электрический асимметричный поток FFF (EAF4), где в дополнение к полю поперечного потока применяется электрическое поле. EAF4 преодолевает ограничение чисто электрического FFF, которое имеет плохое разрешение и страдает от продуктов электролиза и пузырьков, загрязняющих отток канала и ухудшающих сигналы детектора. ^[19]

Ссылки

^ Перейти обратно: ^а ^б Гиддингс, Дж. Кальвин; Ян, Фрэнк Дж. Ф.; Майерс, Маркус Н. (24 сентября 1976 г.). «Фракционирование поток-поле-поток: новый универсальный метод разделения» . Наука . 193 (4259): 1244–1245. дои : 10.1126/science.959835 . ISSN 0036-8075 . ПМИД 959835 .
^ Ян, Фэн-Шян; Колдуэлл, Карин Д; Майерс, Маркус Н; Гиддингс, Дж. Кальвин (май 1983 г.). «Характеристика коллоидов методом седиментационного фракционирования в поле потока. III. Эмульсии» . Журнал коллоидной и интерфейсной науки . 93 (1): 115–125. Бибкод : 1983JCIS...93..115Y . дои : 10.1016/0021-9797(83)90391-0 .
^ Гиддингс, Дж. Кальвин; Юн, Ён Хи; Майерс, Маркус Н. (1 января 1975 г.). «Оценка и сравнение гель-проникающей хроматографии и термического фракционирования в полевом потоке для разделения полимеров» . Аналитическая химия . 47 (1): 126–131. дои : 10.1021/ac60351a035 . ISSN 0003-2700 .
^ Таски, Тонгук О.; Джонсон, Уильям П.; Фернандес, Диего П.; Манангон, Элиана; Гейл, Брюс К. (декабрь 2015 г.). «Моделирование на основе частиц систем фракционирования потока в электрическом поле» . Хроматография . 2 (4): 594–610. doi : 10.3390/хроматография2040594 . ISSN 2227-9075 .
^ Уильямс, П. Стивен; Карпино, Франческа; Зборовский, Мацей (5 октября 2009 г.). «Магнитные наночастицы-переносчики лекарств и их исследование методом квадрупольного фракционирования в магнитном поле» . Молекулярная фармацевтика . 6 (5): 1290–1306. дои : 10.1021/mp900018v . ISSN 1543-8384 . ПМЦ 2757515 . ПМИД 19591456 .
^ Уильямс, П. Стивен; Мун, Мён Хи; Гиддингс, Дж. Кальвин (10 августа 1996 г.). «Влияние стенки аккумуляции и состава несущего раствора на подъемную силу при седиментации/стерическом фракционировании в поле потока» . Коллоиды и поверхности А: Физико-химические и инженерные аспекты . 113 (3): 215–228. дои : 10.1016/0927-7757(96)03669-2 . ISSN 0927-7757 .
^ Гиддингс, Дж. Кальвин; Чен, Сюжун.; Валунд, Карл Густав; Майерс, Маркус Н. (1 августа 1987 г.). «Быстрое разделение частиц методом потокового/стерического фракционирования в поле-потоке» . Аналитическая химия . 59 (15): 1957–1962. дои : 10.1021/ac00142a014 . ISSN 0003-2700 .
^ Гиддингс, Дж. Кальвин; Мун, Мён Хи; Уильямс, П. Стивен; Майерс, Маркус Н. (15 июля 1991 г.). «Распределение частиц по размерам методом седиментации / стерического фракционирования в полевом потоке: разработка процедуры калибровки, основанной на компенсации плотности» . Аналитическая химия . 63 (14): 1366–1372. дои : 10.1021/ac00014a006 . ISSN 0003-2700 . ПМИД 1928720 .
^ Джордани, Стефано; Марасси, Валентина; Плаччи, Анна; Заттони, Андреа; Рода, Барбара; Решильян, Пьерлуиджи (2023). «Фракционирование в полевом потоке в молекулярной биологии и биотехнологии» . Молекулы . 28 (17): 6201. doi : 10,3390/molecules28176201 . ISSN 1420-3049 . ПМЦ 10488451 . ПМИД 37687030 .
^ Йоханнес, Г.; Юсила, М.; Хартонен, К.; Риеккола, М.-Л. (8 июля 2011 г.). «Техника фракционирования в потоке с асимметричным потоком для разделения и определения характеристик биополимеров и биочастиц» . Журнал хроматографии А. Фракционирование поток-поле-поток. 1218 (27): 4104–4116. дои : 10.1016/j.chroma.2010.12.110 . ISSN 0021-9673 . ПМИД 21292269 .
^ Гиддингс, Дж. Кальвин (1966). «Новая концепция разделения, основанная на сочетании неоднородностей концентрации и потока» . Наука разделения . 1 : 123–125. дои : 10.1080/01496396608049439 .
^ Гиддингс, Дж. Кальвин; Ян, Фрэнк Дж.; Майерс, Маркус Н. (1 июля 1976 г.). «Теоретическая и экспериментальная характеристика потокового поля-поточного фракционирования» . Аналитическая химия . 48 (8): 1126–1132. дои : 10.1021/ac50002a016 . ISSN 0003-2700 .
^ Гиддингс, Дж. К., Ян Ф. Дж. и Майерс М. Н. (1976). «Фракционирование в потоке и потоке: новый универсальный метод разделения». Наука 193.4259: 1244–1245.
^ Ли Х.Л., Рейс Дж.Ф.Г. и Лайтфут Э.Н. (1974). Однофазная хроматография: замедление растворения ультрафильтрацией и электрофорезом. Журнал Айше, вып. 20, с. 776.
^ У. Дж. Као, П. С. Уильямс, М. Н. Майерс и Дж. К. Гиддингс, «Универсальная калибровка фракционирования термического поля и потока: расширение для учета изменения температуры холодной стенки», Аналитическая химия, 1999, 71, стр. 1597–1609.
^ Уильямс, Филип Стивен (1 января 2022 г.), Контадо, Катиа (ред.), «Глава 18 - Теоретические принципы фракционирования в полевом потоке и фракционирования SPLITT» , « Методы разделения частиц » , Справочники по разделению, Elsevier, стр. 579–620. , doi : 10.1016/b978-0-323-85486-3.00001-9 , ISBN 978-0-323-85486-3 , получено 14 октября 2023 г.
^ Барман, Бхаджендра Н.; Уильямс, П. Стивен; Майерс, Маркус Н.; Гиддингс, Дж. Кальвин (14 февраля 2018 г.). «Разделение ячеек с разделением потока (SPLITT), работающее в режиме погружения-плавания с использованием центробежных и гравитационных полей» . Исследования в области промышленной и инженерной химии . 57 (6): 2267–2276. doi : 10.1021/acs.iecr.7b04223 . ISSN 0888-5885 .
^ Капуано, Андреа; Адами, Андреа; Муллони, Вивиана; Лоренцелли, Леандро (2017). «Миниатюрная система SPLITT для оперативного разделения белков» . Слушания . 1 (4): 527. doi : 10.3390/proceedings1040527 . ISSN 2504-3900 .
^ Иоганн, Кристоф; Эльсенберг, Стефан; Шух, Хорст; Рёш, Ульрих (21 апреля 2015 г.). «Прибор и метод для определения электрофоретической подвижности наночастиц и белков путем комбинирования электрического и проточного фракционирования в поле-протоке» . Аналитическая химия . 87 (8): 4292–4298. дои : 10.1021/ac504712n . ISSN 0003-2700 . ПМИД 25789885 .

Внешние ссылки

Рода, А. (2005). «На пути к мультианалитным иммуноанализам: проточный твердофазный формат с хемилюминесцентным обнаружением» . Клиническая химия . 51 (10): 1993–1995. дои : 10.1373/clinchem.2005.053108 . ISSN 0009-9147 . ПМИД 16299900 .

[:1-1] Перейти обратно: ^а ^б Гиддингс, Дж. Кальвин; Ян, Фрэнк Дж. Ф.; Майерс, Маркус Н. (24 сентября 1976 г.). «Фракционирование поток-поле-поток: новый универсальный метод разделения» . Наука . 193 (4259): 1244–1245. дои : 10.1126/science.959835 . ISSN 0036-8075 . ПМИД 959835 .

[2] Ян, Фэн-Шян; Колдуэлл, Карин Д; Майерс, Маркус Н; Гиддингс, Дж. Кальвин (май 1983 г.). «Характеристика коллоидов методом седиментационного фракционирования в поле потока. III. Эмульсии» . Журнал коллоидной и интерфейсной науки . 93 (1): 115–125. Бибкод : 1983JCIS...93..115Y . дои : 10.1016/0021-9797(83)90391-0 .

[3] Гиддингс, Дж. Кальвин; Юн, Ён Хи; Майерс, Маркус Н. (1 января 1975 г.). «Оценка и сравнение гель-проникающей хроматографии и термического фракционирования в полевом потоке для разделения полимеров» . Аналитическая химия . 47 (1): 126–131. дои : 10.1021/ac60351a035 . ISSN 0003-2700 .

[4] Таски, Тонгук О.; Джонсон, Уильям П.; Фернандес, Диего П.; Манангон, Элиана; Гейл, Брюс К. (декабрь 2015 г.). «Моделирование на основе частиц систем фракционирования потока в электрическом поле» . Хроматография . 2 (4): 594–610. doi : 10.3390/хроматография2040594 . ISSN 2227-9075 .

[5] Уильямс, П. Стивен; Карпино, Франческа; Зборовский, Мацей (5 октября 2009 г.). «Магнитные наночастицы-переносчики лекарств и их исследование методом квадрупольного фракционирования в магнитном поле» . Молекулярная фармацевтика . 6 (5): 1290–1306. дои : 10.1021/mp900018v . ISSN 1543-8384 . ПМЦ 2757515 . ПМИД 19591456 .

[6] Уильямс, П. Стивен; Мун, Мён Хи; Гиддингс, Дж. Кальвин (10 августа 1996 г.). «Влияние стенки аккумуляции и состава несущего раствора на подъемную силу при седиментации/стерическом фракционировании в поле потока» . Коллоиды и поверхности А: Физико-химические и инженерные аспекты . 113 (3): 215–228. дои : 10.1016/0927-7757(96)03669-2 . ISSN 0927-7757 .

[7] Гиддингс, Дж. Кальвин; Чен, Сюжун.; Валунд, Карл Густав; Майерс, Маркус Н. (1 августа 1987 г.). «Быстрое разделение частиц методом потокового/стерического фракционирования в поле-потоке» . Аналитическая химия . 59 (15): 1957–1962. дои : 10.1021/ac00142a014 . ISSN 0003-2700 .

[8] Гиддингс, Дж. Кальвин; Мун, Мён Хи; Уильямс, П. Стивен; Майерс, Маркус Н. (15 июля 1991 г.). «Распределение частиц по размерам методом седиментации / стерического фракционирования в полевом потоке: разработка процедуры калибровки, основанной на компенсации плотности» . Аналитическая химия . 63 (14): 1366–1372. дои : 10.1021/ac00014a006 . ISSN 0003-2700 . ПМИД 1928720 .

[9] Джордани, Стефано; Марасси, Валентина; Плаччи, Анна; Заттони, Андреа; Рода, Барбара; Решильян, Пьерлуиджи (2023). «Фракционирование в полевом потоке в молекулярной биологии и биотехнологии» . Молекулы . 28 (17): 6201. doi : 10,3390/molecules28176201 . ISSN 1420-3049 . ПМЦ 10488451 . ПМИД 37687030 .

[10] Йоханнес, Г.; Юсила, М.; Хартонен, К.; Риеккола, М.-Л. (8 июля 2011 г.). «Техника фракционирования в потоке с асимметричным потоком для разделения и определения характеристик биополимеров и биочастиц» . Журнал хроматографии А. Фракционирование поток-поле-поток. 1218 (27): 4104–4116. дои : 10.1016/j.chroma.2010.12.110 . ISSN 0021-9673 . ПМИД 21292269 .

[11] Гиддингс, Дж. Кальвин (1966). «Новая концепция разделения, основанная на сочетании неоднородностей концентрации и потока» . Наука разделения . 1 : 123–125. дои : 10.1080/01496396608049439 .

[12] Гиддингс, Дж. Кальвин; Ян, Фрэнк Дж.; Майерс, Маркус Н. (1 июля 1976 г.). «Теоретическая и экспериментальная характеристика потокового поля-поточного фракционирования» . Аналитическая химия . 48 (8): 1126–1132. дои : 10.1021/ac50002a016 . ISSN 0003-2700 .

[:0-13] Гиддингс, Дж. К., Ян Ф. Дж. и Майерс М. Н. (1976). «Фракционирование в потоке и потоке: новый универсальный метод разделения». Наука 193.4259: 1244–1245.

[14] Ли Х.Л., Рейс Дж.Ф.Г. и Лайтфут Э.Н. (1974). Однофазная хроматография: замедление растворения ультрафильтрацией и электрофорезом. Журнал Айше, вып. 20, с. 776.

[15] У. Дж. Као, П. С. Уильямс, М. Н. Майерс и Дж. К. Гиддингс, «Универсальная калибровка фракционирования термического поля и потока: расширение для учета изменения температуры холодной стенки», Аналитическая химия, 1999, 71, стр. 1597–1609.

[16] Уильямс, Филип Стивен (1 января 2022 г.), Контадо, Катиа (ред.), «Глава 18 - Теоретические принципы фракционирования в полевом потоке и фракционирования SPLITT» , « Методы разделения частиц » , Справочники по разделению, Elsevier, стр. 579–620. , doi : 10.1016/b978-0-323-85486-3.00001-9 , ISBN 978-0-323-85486-3 , получено 14 октября 2023 г.

[17] Барман, Бхаджендра Н.; Уильямс, П. Стивен; Майерс, Маркус Н.; Гиддингс, Дж. Кальвин (14 февраля 2018 г.). «Разделение ячеек с разделением потока (SPLITT), работающее в режиме погружения-плавания с использованием центробежных и гравитационных полей» . Исследования в области промышленной и инженерной химии . 57 (6): 2267–2276. doi : 10.1021/acs.iecr.7b04223 . ISSN 0888-5885 .

[18] Капуано, Андреа; Адами, Андреа; Муллони, Вивиана; Лоренцелли, Леандро (2017). «Миниатюрная система SPLITT для оперативного разделения белков» . Слушания . 1 (4): 527. doi : 10.3390/proceedings1040527 . ISSN 2504-3900 .

[19] Иоганн, Кристоф; Эльсенберг, Стефан; Шух, Хорст; Рёш, Ульрих (21 апреля 2015 г.). «Прибор и метод для определения электрофоретической подвижности наночастиц и белков путем комбинирования электрического и проточного фракционирования в поле-протоке» . Аналитическая химия . 87 (8): 4292–4298. дои : 10.1021/ac504712n . ISSN 0003-2700 . ПМИД 25789885 .

[1]

[2]

[3]

[4]

[5]

[6]

[7]

[8]

[9]

[10]

[11]

[12]

[13]

[14]

[15]

[16]

[17]

[18]

[19]