Тройное спаривание

Тройное спаривание - это форма бактериальной конъюгации , при которой конъюгативная плазмида, присутствующая в одном бактериальном штамме, способствует переносу мобилизуемой плазмиды, присутствующей во втором бактериальном штамме, в третий бактериальный штамм. ^{[ 1 ]} Плазмиды вводятся в бактерии для таких целей, как трансформация , клонирование или мутагенез транспозонов . Спаривание трех родителей может помочь преодолеть некоторые препятствия на пути эффективной мобилизации плазмид. Например, если конъюгатная плазмида и мобилизуемая плазмида являются членами одной и той же группы несовместимости, им не обязательно стабильно сосуществовать во втором бактериальном штамме для переноса мобилизуемой плазмиды.

История

Трехродительское спаривание было обнаружено у дрожжей в 1960 году, а затем у Escherichia coli в 1962 году. ^{[ 2 ]}

Процесс

Требования

Штамм -помощник , несущий конъюгативную плазмиду (например, F-плазмиду ), которая кодирует гены, необходимые для конъюгации и переноса ДНК .
Донорский штамм , несущий мобилизуемую плазмиду, которая может использовать функции переноса конъюгативной плазмиды.
Штамм -реципиент , в который вы хотите ввести мобилизуемую плазмиду.

Требуется пять-семь дней, чтобы определить, является ли плазмида была успешно внедрена в новую бактериальную напрягите и убедитесь, что нет переноса помощника или донорский штамм.

Напротив, электропорация не требует помощника или донорский штамм. Это помогает избегать возможного заражения другими штаммами. Введение плазмиды можно проверить у реципиента штамм за два дня, что делает электропорацию более быстрой и более эффективный метод трансформации. Однако электропорация работает не со всеми бактериями и в основном ограничивается хорошо охарактеризованными модельными организмами.

См. также

Внешние ссылки

Протокол для P. aeruginosa

Ссылки

^ Уайз, Арлин А.; Лю, Чжэньин; Биннс, Эндрю Н. (2006), Ван, Кан (ред.), «Три метода введения чужеродной ДНК в агробактерии» , Agrobacterium Protocols , vol. 343, Тотова, Нью-Джерси: Humana Press, стр. 43–54, doi : 10.1385/1-59745-130-4:43 , ISBN. 978-1-59745-130-7 , PMID 16988332 , получено 13 июня 2022 г.
^ Фишер-Фантуцци, Л; Ди Джироламо, М (25 октября 1961). «Трёхродительские спаривания у Escherichia Coli» . Генетика . 46 (10): 1305–1315. дои : 10.1093/генетика/46.10.1305 . ISSN 1943-2631 . ПМК 1210142 . ПМИД 13893172 .

[1] Уайз, Арлин А.; Лю, Чжэньин; Биннс, Эндрю Н. (2006), Ван, Кан (ред.), «Три метода введения чужеродной ДНК в агробактерии» , Agrobacterium Protocols , vol. 343, Тотова, Нью-Джерси: Humana Press, стр. 43–54, doi : 10.1385/1-59745-130-4:43 , ISBN. 978-1-59745-130-7 , PMID 16988332 , получено 13 июня 2022 г.

[2] Фишер-Фантуцци, Л; Ди Джироламо, М (25 октября 1961). «Трёхродительские спаривания у Escherichia Coli» . Генетика . 46 (10): 1305–1315. дои : 10.1093/генетика/46.10.1305 . ISSN 1943-2631 . ПМК 1210142 . ПМИД 13893172 .

[ 1 ]

[ 2 ]