✖


Jump to content

Петлевая изотермическая амплификация

Процесс петлевой изотермической амплификации (LAMP) [1]

Петлевая изотермическая амплификация ( LAMP ) — это однопробирочный метод амплификации ДНК. [2] в диагностических целях и как недорогая альтернатива для выявления определенных заболеваний. [3] LAMP — это метод изотермической амплификации нуклеиновых кислот . В отличие от технологии полимеразной цепной реакции (ПЦР), в которой реакция проводится с помощью серии стадий или циклов с переменными температурами, изотермическая амплификация проводится при постоянной температуре и не требует термоциклера . LAMP была изобретена в 1998 году компанией Eiken Chemical Company в Токио. [1] Изотермическая амплификация, опосредованная обратной транскрипцией (RT-LAMP), сочетает в себе LAMP со стадией обратной транскрипции , что позволяет обнаруживать РНК.

Усиление

[ редактировать ]
Праймеры для петлевой изотермической амплификации (LAMP) [1]
Продукт петлевой изотермической амплификации (LAMP) [1]

В LAMP целевая последовательность амплифицируется при постоянной температуре 60–65 ° C (140–149 ° F) с использованием двух или трех наборов праймеров и полимеразоподобного фрагмента Bst Кленова с высокой активностью замещения цепи в дополнение к репликации. активность. Обычно для амплификации 6 различных участков целевого гена используются 4 разных праймера, что повышает специфичность. Дополнительная пара «петлевых праймеров» может еще больше ускорить реакцию. [4] Количество ДНК, полученной с помощью LAMP, значительно выше, чем при амплификации на основе ПЦР . [1] Дизайн праймера можно выполнить с помощью нескольких программ, таких как PrimerExplorer , MorphoCatcher , [5] и инструмент для создания праймера NEB LAMP . Для скрининга консервативных и видоспецифичных нуклеотидных полиморфизмов в большинстве диагностических приложений очень полезна комбинация PrimerExplorer и MorphoCatcher, поскольку она позволяет локализовать видоспецифичные нуклеотиды на 3'-концах праймеров для повышения специфичности реакций. .

Схема LAMP биомаркеров нуклеиновых кислот из необработанных неочищенных образцов сточных вод для быстрого количественного определения специфичной для человека митохондриальной ДНК (мтДНК). [6]

Обнаружение

[ редактировать ]

Продукт амплификации можно обнаружить с помощью фотометрии , измеряя мутность, вызванную осадком пирофосфата магния в растворе как побочным продуктом амплификации. [7] Это позволяет легко визуализировать невооруженным глазом или с помощью простых подходов фотометрического обнаружения для небольших объемов. За реакцией можно следить в режиме реального времени, измеряя мутность. [8] или флуоресценцией с использованием интеркалирующих красителей, таких как SYTO 9. [9]

Красители, такие как SYBR green , можно использовать для создания видимого изменения цвета, которое можно увидеть невооруженным глазом без необходимости использования дорогостоящего оборудования, или для реакции, которую можно более точно измерить с помощью приборов. Молекулы красителя интеркалируют или непосредственно метят ДНК, что, в свою очередь, может коррелировать с количеством изначально присутствующих копий. Следовательно, LAMP также может быть количественным. Обнаружение амплификации ДНК LAMP в пробирке возможно с использованием кальцеина , нагруженного марганцем , который начинает флуоресцировать при комплексообразовании марганца с пирофосфатом во время синтеза ДНК in vitro. [10] Другой метод визуального обнаружения ампликонов LAMP невооруженным глазом был основан на их способности гибридизоваться с комплементарной одноцепочечной ДНК (оцДНК), связанной с наночастицами золота (AuNP), и таким образом предотвращать нормальное изменение цвета от красного к пурпурно-синему, которое могло бы произойти. в противном случае происходят во время агрегации частиц золота, вызванной солью. Таким образом, метод LAMP в сочетании с обнаружением ампликонов с помощью AuNP может иметь преимущества перед другими методами с точки зрения сокращения времени анализа, подтверждения ампликонов путем гибридизации и использования более простого оборудования (т.е. отсутствия необходимости в термоциклере, оборудовании для электрофореза или УФ-транс-иллюминаторе). ). [11] [12]

Колориметрическое обнаружение [13]

Зависимые от pH индикаторы-красители, такие как феноловый красный, вызывают изменение цвета с розового на желтый, когда значение pH реакции снижается при амплификации ДНК. [13] Из-за выраженного изменения цвета это наиболее часто используемый показатель для анализов RT-LAMP. [13] Однако считывание в зависимости от изменения pH требует слабо забуференного реакционного раствора, что представляет собой серьезную проблему при использовании исходных проб сырой нефти с переменным pH. [13] Во втором колориметрическом анализе используются индикаторы ионов металлов , такие как гидроксинафтоловый синий (HNB), который меняет цвет с фиолетового на синий при падении свободного Mg. 2+ ионы, которые при амплификации ДНК образуют осадок Mg- пирофосфата . [13]

Использование и преимущества

[ редактировать ]

LAMP — относительно новый метод амплификации ДНК, который благодаря своей простоте, надежности и низкой стоимости может дать серьезные преимущества. LAMP может использоваться врачами в качестве простого скринингового анализа в полевых условиях или на месте оказания медицинской помощи. [14] Поскольку LAMP является изотермическим методом, что устраняет необходимость в дорогостоящих термоциклерах, используемых в традиционной ПЦР, он может быть особенно полезным методом диагностики инфекционных заболеваний в странах с низким и средним уровнем дохода. [15] LAMP широко изучается для выявления инфекционных заболеваний, таких как филяриатоз, [16] Вирус Зика, [17] туберкулез, [18] малярия, [19] [20] [21] сонная болезнь, [22] и SARS-CoV-2 . [23] [24] В развивающихся регионах его еще предстоит тщательно проверить на предмет других распространенных патогенов. [14]

Было обнаружено, что LAMP менее чувствителен (более устойчив), чем ПЦР, к ингибиторам в сложных образцах, таких как кровь, вероятно, из-за использования другой ДНК-полимеразы (обычно Bst – Bacillus stearothermophilus – ДНК-полимераза, а не Taq -полимеразы, как в ПЦР). В нескольких отчетах описывается успешное обнаружение патогенов в минимально обработанных образцах, таких как термически обработанная кровь, [25] [26] или при наличии матриц клинических образцов. [27] Эта функция LAMP может быть полезна в условиях ограниченных ресурсов или в полевых условиях, где обычное извлечение ДНК или РНК перед диагностическим тестированием может быть непрактичным.

LAMP также используется для идентификации жидкостей организма. Благодаря своей простоте исследователи могут протестировать один или несколько образцов с минимальными затратами времени, что помогает сократить время, необходимое для получения результатов. Исследователи также смогли добавить факторы, которые еще больше упрощают идентификацию, включая металл-индикаторный краситель и феноловый красный, чтобы иметь возможность использовать смартфон и невооруженный глаз соответственно для анализа результатов. [28] [29] [30]

Ограничения

[ редактировать ]

LAMP менее универсален, чем ПЦР, наиболее хорошо зарекомендовавший себя метод амплификации нуклеиновых кислот. LAMP полезна в первую очередь в качестве метода диагностики или обнаружения, но бесполезна для клонирования или многих других приложений молекулярной биологии, реализуемых с помощью ПЦР. Поскольку LAMP использует 4 (или 6) праймеров, нацеленных на 6 (или 8) областей в довольно небольшом сегменте генома, и поскольку дизайн праймеров подвержен многочисленным ограничениям, сложно разработать наборы праймеров для LAMP «на глаз». Бесплатный, с открытым исходным кодом [31] или коммерческие пакеты программного обеспечения обычно используются для помощи в разработке праймера LAMP, хотя ограничения дизайна праймера означают, что существует меньшая свобода выбора целевого сайта, чем при ПЦР.

В диагностическом применении это должно быть сбалансировано с необходимостью выбора подходящей мишени (например, консервативного участка в высоковариабельном вирусном геноме или мишени, специфичной для конкретного штамма патогена). Для охвата различных вариантов штаммов одного и того же вида может потребоваться несколько вырожденных последовательностей. Следствием использования такого коктейля праймеров может быть неспецифическая амплификация при поздней амплификации.

Подходы мультиплексирования для LAMP менее развиты, чем для ПЦР. Большее количество праймеров на мишень в LAMP увеличивает вероятность взаимодействия праймер-праймер для мультиплексированных наборов мишеней. Продукт LAMP представляет собой серию конкатемеров целевой области, образующую характерную «лестницу» или полосатый рисунок на геле, а не одну полосу, как при ПЦР. Хотя это не является проблемой при обнаружении одиночных мишеней с помощью LAMP, «традиционные» (конечные точки) применения мультиплексной ПЦР, в которых идентичность мишени подтверждается размером полосы на геле, невозможны с помощью LAMP. Мультиплексирование в LAMP было достигнуто путем выбора целевой области с сайтом рестрикции и расщепления перед работой на геле, так что каждый продукт дает фрагмент фрагмента разного размера. [32] хотя этот подход усложняет схему и протокол эксперимента.

Использование ДНК-полимеразы, замещающей цепь, в LAMP также исключает использование зондов гидролиза, например зондов TaqMan , которые основаны на 5'-3'- экзонуклеазной активности Taq - полимеразы. Сообщалось об альтернативном подходе мультиплексирования в реальном времени, основанном на тушителях флуоресценции. [33]

Для просмотра LAMP в режиме реального времени можно добавить зеленый краситель SYBR. Однако при поздней амплификации амплификация праймер-димера может способствовать ложноположительному сигналу. Использование неорганической пирофосфатазы в реакционной смеси SYBR позволяет использовать анализ расплава для определения правильной амплификации. [34]

Хотя были предложены различные стратегии смягчения ложноположительных результатов в анализах, основанных на этом методе, неспецифическая амплификация из-за различных факторов, включая отсутствие механизмов температурного стробирования, является одним из основных ограничений петлевой изотермической амплификации. [35] [36]

Наконец, поскольку LAMP требует поддержания повышенной температуры инкубации (60–65 °C), необходим какой-то нагревательный механизм, термостат и/или изолятор (хотя и не обязательно термоциклер). Это требование делает LAMP менее идеальным для полевой диагностики на месте оказания медицинской помощи, которая идеально работает при температуре окружающей среды.

Ссылки

[ редактировать ]
  1. ^ Jump up to: а б с д и М. Сорока, Б. Васович, А. Рымашевска: Петлевая изотермическая амплификация (LAMP): лучший брат ПЦР? В: Клетки. Том 10, выпуск 8, июль 2021 г., с. , doi : 10.3390/cells10081931 , PMID 34440699, PMC   8393631 .
  2. ^ Патент США 6410278 , Notomi T, Hase T, «Способ синтеза нуклеиновой кислоты», опубликован 25 июня 2002 г., передан Эйкену Кагаку Кабусики Кайся.  
  3. ^ Нотоми Т., Окаяма Х., Масубучи Х., Ёнекава Т., Ватанабе К., Амино Н., Хасэ Т. (2000). «Петлевая изотермическая амплификация ДНК» . Нуклеиновые кислоты Рез . 28 (12): 63д–63. дои : 10.1093/нар/28.12.e63 . ПМЦ   102748 . ПМИД   10871386 .
  4. ^ Нагамин К., Хасэ Т., Нотоми Т. (2002). «Ускоренная реакция путем петлевой изотермической амплификации с использованием петлевых праймеров». Мол. Клетка. Зонды . 16 (3): 223–9. дои : 10.1006/mcpr.2002.0415 . ПМИД   12144774 .
  5. ^ Ширшиков Федор Владимирович; Пеков Юрий А.; Мирошников, Константин А. (26 апреля 2019 г.). «MorphoCatcher: веб-инструмент на основе множественного выравнивания для выбора цели и разработки таксон-специфичных праймеров в методе петлевой изотермической амплификации» . ПерДж . 7 : е6801. дои : 10.7717/peerj.6801 . ISSN   2167-8359 . ПМК   6487805 . ПМИД   31086739 .
  6. ^ Ян, Жуген; Сюй, Гаолян; Ребауд, Жюльен; Каспршик-Хордерн, Барбара; Купер, Джонатан М. (19 сентября 2017 г.). «Мониторинг генетических популяционных биомаркеров для эпидемиологии сточных вод» . Аналитическая химия . 89 (18): 9941–9945. дои : 10.1021/acs.analchem.7b02257 . ПМИД   28814081 .
  7. ^ Мори Ю, Нагамин К, Томита Н, Нотоми Т (2001). «Обнаружение реакции изотермической амплификации, опосредованной петлей, по мутности, возникающей в результате образования пирофосфата магния». Биохим. Биофиз. Рез. Коммун . 289 (1): 150–4. дои : 10.1006/bbrc.2001.5921 . ПМИД   11708792 .
  8. ^ Мори Ю, Китао М, Томита Н, Нотоми Т (2004). «Турбидиметрия реакции LAMP в реальном времени для количественного определения матричной ДНК». Дж. Биохим. Биофиз. Методы . 59 (2): 145–57. дои : 10.1016/j.jbbm.2003.12.005 . ПМИД   15163526 .
  9. ^ Нджиру З.К., Микоша А.С., Армстронг Т., Эньяру Дж.К., Ндунгу Дж.М., Томпсон А.Р. (2008). «Метод петлевой изотермической амплификации (LAMP) для быстрого обнаружения Trypanosoma brucei rhodesiense» . PLOS Негль Троп Дис . 2 (1): е147. дои : 10.1371/journal.pntd.0000147 . ПМК   2238707 . ПМИД   18253475 .
  10. ^ Томита Н., Мори Ю., Канда Х., Нотоми Т. (2008). «Петлевая изотермическая амплификация (LAMP) последовательностей генов и простое визуальное обнаружение продуктов». Нат Проток . 3 (5): 877–82. дои : 10.1038/nprot.2008.57 . ПМИД   18451795 . S2CID   19416838 .
  11. ^ Арунрут, Наронг; Джитракорн, Сароча; Саксмерпроме, Ванвимон; Киатпатомчай, Вансика (август 2019 г.). «Двойная петлевая изотермическая амплификация (D-LAMP) с использованием колориметрического зонда из наночастиц золота для быстрого обнаружения инфекционного денсовируса Penaeus stylirostris (PstDNV) с уменьшенным количеством ложноположительных результатов от эндогенных вирусных элементов». Аквакультура . 510 : 131–137. doi : 10.1016/j.aquacultural.2019.05.049 . S2CID   229449403 .
  12. ^ Арунрут, Наронг; Тонди, Беньятип; Кхумван, Пакапреуд; Кампира, Джантана; Киатпатомчай, Вансика (февраль 2021 г.). «Быстрое и чувствительное колориметрическое обнаружение микроспоридий Enterocytozoon hepatopenaei (EHP) на основе гена белка стенки спор (SWP) с использованием петлевой изотермической амплификации в сочетании с функционализированными ДНК наночастицами золота в качестве зондов». Аквакультура . 533 : 736206. doi : 10.1016/j.aquacultural.2020.736206 . S2CID   229449403 .
  13. ^ Jump up to: а б с д и Келлнер, Макс Дж.; Росс, Джеймс Дж.; Шнабль, Якоб; Декенс, Маркус П.С.; Матл, Мартин; и др. (2022). «Быстрый, высокочувствительный анализ открытого доступа для обнаружения SARS-CoV-2 для лабораторных и домашних испытаний» . Границы молекулярной биологии . 9 : 801309. дои : 10.3389/fmolb.2022.801309 . hdl : 10261/269628 . ISSN   2296-889X . ПМК   9011764 . ПМИД   35433827 . В эту статью включен текст из этого источника, доступного по лицензии CC BY 4.0 .
  14. ^ Jump up to: а б Сен К., Эшболт, штат Нью-Джерси (2011). Экологическая микробиология: современные технологии и применение воды . Норфолк, Великобритания: Caister Academic Press . ISBN  978-1-904455-70-7 . [ нужна страница ]
  15. ^ Макартур Дж. (2009). Глобальная диагностика здоровья: исследования, разработки и регулирование. Отчет о семинаре Академии медицинских наук (PDF) . Академия медицинских наук (Великобритания). ISBN  978-1-903401-20-0 . Архивировано из оригинала (PDF) 16 мая 2018 г. Проверено 5 мая 2014 г.
  16. ^ Пул, Кэтрин Б.; Ли, Жиру; Альхассан, Энди; Гуелиг, Дилан; Дисбург, Стивен; Таннер, Натан А.; Чжан, Иньхуа; Эванс, Томас С.; ЛаБарр, Пол; Ванджи, Сэмюэл; Бертон, Роберт А. (2017). «Колориметрические тесты для диагностики филяриозной инфекции и надзора за переносчиками с использованием неинструментальной изотермической амплификации, опосредованной петлей нуклеиновых кислот (NINA-LAMP)» . ПЛОС ОДИН . 12 (2): e0169011. Бибкод : 2017PLoSO..1269011P . дои : 10.1371/journal.pone.0169011 . ISSN   1932-6203 . ПМК   5310896 . ПМИД   28199317 .
  17. ^ Калверт, Аманда Э.; Биггерстафф, Брэд Дж.; Таннер, Натан А.; Лаутербах, Молли; Ланчиотти, Роберт С. (2017). «Быстрое колориметрическое обнаружение вируса Зика в образцах сыворотки и мочи методом изотермической амплификации, опосредованной обратной транскрипцией (RT-LAMP)» . ПЛОС ОДИН . 12 (9): e0185340. Бибкод : 2017PLoSO..1285340C . дои : 10.1371/journal.pone.0185340 . ISSN   1932-6203 . ПМЦ   5612724 . ПМИД   28945787 .
  18. ^ Геоджит Г., Дханасекаран С., Чандран С.П., Кеннет Дж. (2011). «Эффективность анализа петлевой изотермической амплификации (LAMP) для лабораторной идентификации изолятов микобактерий туберкулеза в условиях ограниченных ресурсов». Дж. Микробиол. Методы . 84 (1): 71–3. дои : 10.1016/j.mimet.2010.10.015 . ПМИД   21047534 .
  19. ^ Пун Л.Л., Вонг Б.В., Ма Э.Х., Чан К.Х., Чоу Л.М., Абейвикрем В., Тангпукди Н., Юэнь К.Ю., Гуан Й., Луарисуван С., Пейрис Дж.С. (2006). «Чувствительный и недорогой молекулярный тест на малярию, вызванную falciparum: обнаружение ДНК Plasmodium falciparum непосредственно из термообработанной крови путем петлевой изотермической амплификации» . Клин. Хим . 52 (2): 303–6. дои : 10.1373/clinchem.2005.057901 . ПМИД   16339303 .
  20. ^ Понака, Редди В. и др. | АСТМХ 2015 | Молекулярное обнаружение плазмодия с помощью петлевой изотермической амплификации (LAMP) и сравнение чувствительности с анализом ПЭТ-ПЦР | http://www.ilmar.org.il/diasorin/MBI_MalariaPoster2015-ASTMH_JT_rev3.pdf. Архивировано 20 ноября 2016 г. в Wayback Machine.
  21. ^ Понака, Редди В. и др. | AMP 2015 | http://www.ilmar.org.il/diasorin/MBI_AMP2015_MalariaPoster102715.pdf. Архивировано 20 ноября 2016 г. в Wayback Machine.
  22. ^ [ PubMed ] Нджиру З.К., Микоша А.С., Матову Э, Эньяру Дж.К., Оума Д.О., Кибона С.Н., Томпсон Р.К., Ндунгу Дж.М. (2008). «Африканский трипаносомоз: чувствительное и быстрое обнаружение подрода Trypanozoon с помощью петлевой изотермической амплификации (LAMP) ДНК паразита» . Межд. Дж. Паразитол . 38 (5): 589–99. дои : 10.1016/j.ijpara.2007.09.006 . ПМК   7094514 . ПМИД   17991469 .
  23. ^ Уокер, Питер (21 мая 2020 г.). «В Великобритании тестируют тест на коронавирус с 20-минутным ожиданием» . Хранитель .
  24. ^ Пак, Гун Су; Ку, Кеунбон; Пэк, Сын Хва; Ким, Сон Джун; Ким, Сын Иль; Ким, Бум-Тэ; Маенг, Джин Су (2020). «Разработка методов изотермической амплификации, опосредованной обратной транскрипцией, для борьбы с тяжелым острым респираторным синдромом, вызванным коронавирусом 2 (SARS-CoV-2)» . Журнал молекулярной диагностики . 22 (6): 729–735. дои : 10.1016/j.jmoldx.2020.03.006 . ПМК   7144851 . ПМИД   32276051 .
  25. ^ Кертис К.А., Рудольф Д.Л., Оуэн С.М. (2008). «Быстрое обнаружение ВИЧ-1 с помощью обратной транскрипции, петлевой изотермической амплификации (RT-LAMP)». Дж. Вирол. Методы . 151 (2): 264–70. дои : 10.1016/j.jviromet.2008.04.011 . ПМИД   18524393 .
  26. ^ Саттабонгкот Дж., Цубои Т., Хан Э.Т., Бантучай С., Буатес С. (2014). «Петлевой изотермический анализ амплификации для быстрой диагностики малярийных инфекций в эндемичных районах Таиланда» . Дж. Клин. Микробиол . 52 (5): 1471–7. дои : 10.1128/JCM.03313-13 . ПМЦ   3993686 . ПМИД   24574279 .
  27. ^ Франсуа П., Тангомо М., Хиббс Дж., Бонетти Э.Дж., Беме CC , Нотоми Т., Перкинс М.Д., Шренцель Дж. (2011). «Надежность реакции изотермической амплификации, опосредованной петлей, для диагностических применений» . ФЭМС Иммунол. Мед. Микробиол . 62 (1): 41–8. дои : 10.1111/j.1574-695X.2011.00785.x . ПМИД   21276085 .
  28. ^ Джексон, Кимберли Р.; Лейн, Тиффани; Дент, Дэвид А.; Цуэй, Анчи; Ли, Цзинъи; Хаверстик, Дорис М.; Ландерс, Джеймс П. (март 2020 г.). «Новый метод петлевой изотермической амплификации для идентификации четырех жидкостей организма с помощью смартфона» . Международная судебно-медицинская экспертиза: Генетика . 45 : 102195. doi : 10.1016/j.fsigen.2019.102195 . ISSN   1872-4973 . ПМИД   31835180 . S2CID   209356926 .
  29. ^ Лейн, Тиффани; Джексон, Кимберли; Скотт, Анчи; Таннер, Натан А.; Пиланд, Энни; Хаверстик, Дорис М.; Ландерс, Джеймс П. (2021). «Оптимизация новой петлевой изотермической амплификации с колориметрическим анализом изображений для судебно-медицинской идентификации жидкостей организма» . Журнал судебной медицины . 66 (3): 1033–1041. дои : 10.1111/1556-4029.14682 . ISSN   1556-4029 . ПМИД   33559876 . S2CID   231869975 .
  30. ^ Китамура, Масаси; Кубо, Сейджи; Танака, Джин; Адачи, Тацуши (01 июля 2018 г.). «Метод быстрого скрининга мужской ДНК с использованием метода петлевой изотермической амплификации» . Международный журнал юридической медицины . 132 (4): 975–981. дои : 10.1007/s00414-017-1661-z . ISSN   1437-1596 . ПМИД   28803416 . S2CID   4035223 .
  31. ^ Торрес С., Виталис Э.А., Бейкер Б.Р., Гарднер С.Н., Торрес М.В., Дзенитис Дж.М. (2011). «LAVA: подход с открытым исходным кодом к созданию сигнатур ДНК LAMP (петлевая изотермическая амплификация)» . БМК Биоинформатика . 12 :240. дои : 10.1186/1471-2105-12-240 . ПМК   3213686 . ПМИД   21679460 .
  32. ^ Исеки, Хироши; Альхассан, Энди; Охта, Наоми; Продано, Ориэль ММ; Ёкояма, Наоаки; Иноуэ, Нобору; Я родила, Эндрю; Ясуда, Джун; Игараси, Икуо (декабрь 2007 г.). «Разработка метода мультиплексной петлевой изотермической амплификации (mLAMP) для одновременного обнаружения паразитов бабезий крупного рогатого скота». Журнал микробиологических методов . 71 (3): 281–7. дои : 10.1016/j.mimet.2007.09.019 . ПМИД   18029039 .
  33. ^ Таннер Н.А., Чжан Ю., Эванс Т.К. (август 2012 г.). «Одновременное обнаружение нескольких целей при изотермической амплификации, опосредованной петлей в реальном времени» . БиоТехники . 53 (2): 81–9. дои : 10.2144/0000113902 . ПМИД   23030060 .
  34. ^ Тоне К., Фудзисаки Р., Ямазаки Т., Макимура К. (январь 2017 г.). «Улучшенный анализ кривой плавления для распознавания продуктов петлевой изотермической амплификации четырех патогенных плесеней: использование неорганической пирофосфатазы и ее влияние на уменьшение разницы в значениях температуры плавления». J Микробные методы . 132 : 41–45. дои : 10.1016/j.mimet.2016.10.020 . ПМИД   27984058 .
  35. ^ Хабибзаде, Пархам; Мофаттех, Мохаммед; Силави, Мохаммед; Фагихи, Мохаммед Али; Гавами, Саид (2021). «Молекулярные диагностические тесты на COVID-19: обзор» . Критические обзоры клинических лабораторных наук . 58 (6): 385–398. дои : 10.1080/10408363.2021.1884640 . ПМЦ   7898297 . ПМИД   33595397 .
  36. ^ Х. Мёлинг, Тейлор Дж.; Чой, Гихун; Дуган, Лоуренс; Салит, Марк; Мигер, Роберт (2021). «Диагностика LAMP на месте оказания медицинской помощи: новые тенденции и перспективы для сообщества разработчиков» . Экспертный обзор молекулярной диагностики . 21 (1): 43–61. дои : 10.1080/14737159.2021.1873769 . ПМИД   33474990 .
Retrieved from "https://en.wikipedia.org/w/index.php?title=Loop-mediated_isothermal_amplification&oldid=1232028669"
Arc.Ask3.Ru: конец переведенного документа.
Arc.Ask3.Ru
Номер скриншота №: 10d07535f0a41c1c4235b23bd08b6853__1719836220
URL1:https://arc.ask3.ru/arc/aa/10/53/10d07535f0a41c1c4235b23bd08b6853.html
Заголовок, (Title) документа по адресу, URL1:
Loop-mediated isothermal amplification - Wikipedia
Данный printscreen веб страницы (снимок веб страницы, скриншот веб страницы), визуально-программная копия документа расположенного по адресу URL1 и сохраненная в файл, имеет: квалифицированную, усовершенствованную (подтверждены: метки времени, валидность сертификата), открепленную ЭЦП (приложена к данному файлу), что может быть использовано для подтверждения содержания и факта существования документа в этот момент времени. Права на данный скриншот принадлежат администрации Ask3.ru, использование в качестве доказательства только с письменного разрешения правообладателя скриншота. Администрация Ask3.ru не несет ответственности за информацию размещенную на данном скриншоте. Права на прочие зарегистрированные элементы любого права, изображенные на снимках принадлежат их владельцам. Качество перевода предоставляется как есть. Любые претензии, иски не могут быть предъявлены. Если вы не согласны с любым пунктом перечисленным выше, вы не можете использовать данный сайт и информация размещенную на нем (сайте/странице), немедленно покиньте данный сайт. В случае нарушения любого пункта перечисленного выше, штраф 55! (Пятьдесят пять факториал, Денежную единицу (имеющую самостоятельную стоимость) можете выбрать самостоятельно, выплаичвается товарами в течение 7 дней с момента нарушения.)