Кальцеин
| |
| Имена | |
|---|---|
| Предпочтительное название ИЮПАК
2,2',2'',2'''-[(3',6'-Дигидрокси-3-оксо-3H- спиро [[2]бензофуран-1,9'-ксантен]-2',7 '-диил)бис(метиленнитрило)]тетрауксусная кислота | |
| Другие имена
Флуорексон
| |
| Идентификаторы | |
3D model ( JSmol )
|
|
| КЭБ | |
| ХЭМБЛ | |
| ХимическийПаук | |
| Информационная карта ECHA | 100.014.507 |
ПабХим CID
|
|
| НЕКОТОРЫЙ | |
Панель управления CompTox ( EPA )
|
|
| Характеристики | |
| С 30 Н 26 Н 2 О 13 | |
| Молярная масса | 622.53 g/mol |
| Температура плавления | Разлагается |
| Точка кипения | Н/Д |
| Слегка растворим | |
Если не указано иное, данные приведены для материалов в стандартном состоянии (при 25 °C [77 °F], 100 кПа).
| |
Кальцеин , также известный как флуорексон, флуоресцеина комплекс , представляет собой флуоресцентный краситель с длинами волн возбуждения и излучения 495 и 515 нм соответственно и имеет вид оранжевых кристаллов. Кальцеин самозатухает при концентрациях выше 70 мМ и обычно используется в качестве индикатора утечки липидных везикул. [ 1 ] [ 2 ] [ 3 ] также традиционно использовали в качестве комплексометрического индикатора для титрования ионов кальция ЭДТА Его и для флуорометрического определения кальция.
Приложения
[ редактировать ]
Нефлуоресцентное ацетометоксипроизводное кальцеина (кальцеин AM, AM = используется цетоксиметилэтил ) в биологии, поскольку оно может транспортироваться через клеточную мембрану в живые клетки, что делает его полезным для тестирования жизнеспособности клеток и для краткосрочных исследований. маркировка клеток. Альтернативно Фура-2 , Фураптра , Индо-1 и экворин можно использовать . Ацетометоксигруппа закрывает часть молекулы, которая хелатирует Ca. 2+ , мг 2+ , Зн 2+ и другие ионы. После транспорта в клетки внутриклеточные эстеразы удаляют ацетометоксигруппу, молекула оказывается внутри и излучает сильную зеленую флуоресценцию. Поскольку в мертвых клетках отсутствуют активные эстеразы, метятся только живые клетки. [ 4 ] и подсчитывают методом проточной цитометрии .
Кальцеин в настоящее время редко используется в качестве кальция. 2+ или мг 2+ индикатор, поскольку его флуоресценция непосредственно чувствительна к этим ионам только при сильно щелочном pH, и поэтому он не особенно полезен для измерения Ca. 2+ или мг 2+ в клетках. Флуоресценция кальцеина сильно гасится Co. 2+ , Является 2+ и Cu 2+ и заметно Fe 3+ и Мн 2+ при физиологическом pH. Эту реакцию тушения флуоресценции можно использовать для обнаружения открытия переходной поры митохондриальной проницаемости (mPTP) и для измерения изменений объема клеток. [ 5 ] Кальцеин обычно используется для отслеживания клеток и в исследованиях эндоцитоза, миграции клеток и щелевых соединений. [ 6 ]
Ацетоксиметиловый эфир кальцеина также используется для обнаружения взаимодействия лекарств с белками множественной лекарственной устойчивости (транспортеры ABC, гены-транспортеры АТФ-связывающей кассеты переносчика множественной лекарственной устойчивости 1 (MDR1) ) в интактных клетках, поскольку он является отличным субстратом P-гликопротеина и мультилекарственного эфира . Белок, ассоциированный с резистентностью (MRP1). [ 7 ] Анализ кальцеина AM можно использовать в качестве модели лекарственного взаимодействия, для скрининга субстратов и/или ингибиторов транспортеров; а также для определения лекарственной устойчивости клеток in vitro, включая образцы от пациентов. [ 8 ]
Кальцеин также используется для маркировки только что вылупившейся рыбы. [ 9 ] и для маркировки костей живых животных.
Ссылки
[ редактировать ]- ^ Аллен, ТМ; Клеланд, LG (1980). «Вызванная сывороткой утечка содержимого липосом». Biochimica et Biophysical Acta (BBA) – Биомембраны . 597 (2): 418–426. дои : 10.1016/0005-2736(80)90118-2 . ПМИД 7370258 .
- ^ Вирус Сендай вызвал утечку липосом, содержащих ганглиозиды Юнг Шиенг Цао и Лиф Хуанг Биохимия 1985 24 (5), 1092-1098
- ^ Патель, Х.; Чека, К.; Херклотц, Х. (2009). «Характеристика утечки везикул по измерениям времени жизни флуоресценции». Мягкая материя . 5 (15): 2849–2851. Бибкод : 2009SMat....5.2849P . дои : 10.1039/B908524F .
- ^ «Как работают световые микроскопы» . Как все работает. 25 мая 2001 г.
- ^ Хаманн, Дж. Ф.; Килгард; Литман, Т.; Альварес-Лифманс, Дж.; Цойтен, Т. (2002). «Измерение изменений объема клеток путем самотушения флуоресценции». Дж. Флуоресценция . 12 (2): 139–145. дои : 10.1023/а:1016832027325 . S2CID 20539474 .
- ^ «Флуоресцентные индикаторы Zn 2+ и ионы других металлов — раздел 19.7» . Молекулярные зонды: Справочник . invitrogen.
- ^ Главанас Х., Крайчи П., Черепеш Дж., Саркади Б. (январь 2004 г.). «Роль транспортеров ABC в лекарственной устойчивости, метаболизме и токсичности» . Курр Доставка лекарств . 1 (1): 27–42. дои : 10.2174/1567201043480036 . ПМИД 16305368 . Архивировано из оригинала 19 июля 2012 г.
- ^ Караси Э., Якаб К., Хомоля Л. и др. (февраль 2001 г.). «Анализ кальцеина на множественную лекарственную устойчивость надежно предсказывает ответ на терапию и выживаемость при остром миелолейкозе» . Бр. Дж. Гематол . 112 (2): 308–14. дои : 10.1046/j.1365-2141.2001.02554.x . ПМИД 11167823 .
- ^ «Маркировка мальков с помощью кальцеина» . Фонд охраны дикой природы и дикой природы. Архивировано из оригинала 25 сентября 2006 года.
