Минимальная необходимая среда Орла
В этой статье отсутствует информация о различных солях (Хэнкса, Эрла), их фактическом составе. ( ноябрь 2018 г. ) |
Минимальная необходимая среда (MEM) — это синтетическая клеток среда для культивирования , разработанная Гарри Иглом и впервые опубликованная в 1959 году. [1] Доктор наук , которые можно использовать для поддержания клеток в культуре тканей . Он основан на 6 солях и глюкозе , описанных в солях Эрла в 1934 году: ( хлорид кальция , хлорид калия , сульфат магния , хлорид натрия , фосфат натрия и бикарбонат натрия ), дополненных 13 незаменимыми аминокислотами и 8 витаминами : тиамином (витамин B) . 1 ), рибофлавин (витамин B 2 ), никотинамид (витамин B 3 ), пантотеновая кислота (витамин B 5 ), пиродоксин (витамин B 6 ), фолиевая кислота (витамин B 9 ), холин и мио-инозитол (первоначально известный как витамин В 8 ).
Было разработано множество вариантов этой среды, в основном с добавлением дополнительных витаминов, аминокислот и/или других питательных веществ. [2]
Игл разработал свой более ранний «Базальный средний орел» (BME) в 1955–1957 годах на L-клетках мыши. [3] и клетки HeLa человека , [4] с добавлением 13 незаменимых аминокислот и 9 витаминов. BME содержит биотин (витамин B 7 ), который, как позже обнаружил Игл, является излишним. Его «минимальная незаменимая среда» 1959 года удваивает количество многих аминокислот, чтобы «более точно соответствовать белковому составу культивируемых клеток человека. Это позволяет хранить культуры в течение более длительных периодов времени без повторной подкормки». [1]
DMEM ( модифицированная среда Игла Дульбекко и Дж. Фриманом в качестве среды Игла с «четырехкратной концентрацией аминокислот и витаминов», ) была первоначально предложена Ренато Дульбекко опубликованной в 1959 году. [5] Коммерческие версии этого носителя имеют дополнительные модификации, см. пример в таблице ниже. [6]
α-MEM (минимально необходимая среда Eagle – альфа-модификация) представляет собой среду, основанную на MEM, опубликованную в 1971 году Клиффордом П. Стэннерсом и его коллегами. [7] Он содержит больше заменимых аминокислот, пирувата натрия и витаминов (аскорбиновой кислоты (витамин С), биотина и цианокобаламина) по сравнению с МЕМ. Он также может содержать липоевую кислоту и нуклеозиды. [8] [9]
MEM Глазго ( минимальная необходимая среда Глазго ) — еще одна модификация, подготовленная Яном Макферсоном и Майклом Стокером. [10]
Состав
[ редактировать ]В одном литре каждой среды содержится (в миллиграммах):
Середина | БМЕ [11] | МЕМ [12] | α-МЭМа [13] | ДМЕМ [6] |
Глицин | 50 | 30 | ||
L-аланин | 25 | |||
L-аргинина гидрохлорид | 21 | 126 | 126 | 84 |
L-аспарагин-H 2 O | 50 | |||
L-аспарагиновая кислота | 30 | |||
L-цистеина гидрохлорид-H 2 O | 100 | |||
L-цистин 2HCl | 16 | 31 | 31 | 63 |
L-глутаминовая кислота | 75 | |||
L-глютамин | 292 | 292 | 292 | 584 |
L-гистидин | 8 | 31 | 42 | |
L-гистидина гидрохлорид-H 2 O | 42 | 42 | ||
L-изолейцин | 26 | 52 | 52 | 105 |
L-лейцин | 26 | 52 | 52 | 105 |
L-лизина гидрохлорид | 36.47 | 73 | 73 | 146 |
L-метионин | 7.5 | 15 | 15 | 30 |
L-фенилаланин | 16.5 | 32 | 32 | 66 |
L-пролин | 40 | |||
L-серин | 25 | 42 | ||
L-треонин | 24 | 48 | 48 | 95 |
L-триптофан | 4 | 10 | 10 | 16 |
Дигидрат динатриевой соли L-тирозина | 26 | 52 | 52 | 104 |
L-валин | 23.5 | 46 | 46 | 94 |
Аскорбиновая кислота | 50 | |||
Биотин | 1 | 0.1 | ||
Холина хлорид | 1 | 1 | 1 | 4 |
D-пантотенат кальция | 1 | 1 | 1 | 4 |
Фолиевая кислота | 1 | 1 | 1 | 4 |
Ниацинамид | 1 | 1 | 1 | 4 |
Пиридоксаль гидрохлорид | 1 | 1 | 1 | 4 |
Рибофлавин | 0.1 | 0.1 | 0.1 | 0.4 |
Тиамина гидрохлорид | 1 | 1 | 1 | 4 |
Витамин В12 | 1.36 | |||
я-инозитол | 2 | 2 | 2 | 7.2 |
Хлорид кальция (CaCl 2 , ангид.) | 200 | 200 | 200 | 200 |
Нитрат железа (Fe(NO 3 ) 3 ·9H 2 O) | 0.1 | |||
Сульфат магния (MgSO 4 , ангид.) | 97.67 | 97.67 | 97.67 | 97.67 |
Хлорид калия (KCl) | 400 | 400 | 400 | 400 |
Бикарбонат натрия (NaHCO 3 ) | 2200 | 2200 | 2200 | 3700 |
Хлорид натрия (NaCl) | 6800 | 6800 | 6800 | 6400 |
Фосфат натрия одноосновный (NaH 2 PO 4 -H 2 O) | 140 | 140 | 140 | 125 |
D-глюкоза (декстроза) | 1000 | 1000 | 1000 | 1000 |
Липоевая кислота | 0.2 | |||
Феноловый красный | 10 | 10 | 10 | 15 |
Пируват натрия | 110 | 110 |
См. также
[ редактировать ]- RPMI 1640 (среда Мемориального института Розуэлл-Парк), для лимфатических клеток
Ссылки
[ редактировать ]- ^ Jump up to: а б Игл Х (1959). «Метаболизм аминокислот в культурах клеток млекопитающих» . Наука . 130 (3373): 432–7. Бибкод : 1959Sci...130..432E . дои : 10.1126/science.130.3373.432 . ПМИД 13675766 .
- ^ Яо, Т; Асаяма, Ю. (апрель 2017 г.). «Среды для культивирования животных клеток: история, характеристики и текущие проблемы» . Репродуктивная медицина и биология . 16 (2): 99–117. дои : 10.1002/rmb2.12024 . ПМК 5661806 . ПМИД 29259457 .
- ^ Игл Х (1955). «Специфические потребности в аминокислотах клеток млекопитающих (штамм L) в культуре тканей» . J Биол Хим . 214 (2): 839–52. дои : 10.1016/S0021-9258(18)70932-0 . ПМИД 14381421 .
- ^ Игл Х (1955). «Особые потребности в аминокислотах клеток карциномы человека (окраска HeLa) в культуре тканей» . Джей Эксп Мед . 102 (1): 37–48. дои : 10.1084/jem.102.1.37 . ПМК 2136494 . ПМИД 14392239 .
- ^ Дульбекко Р., Фриман Дж. (1959). «Производство бляшек вирусом полиомы». Вирусология . 8 (3): 396–7. дои : 10.1016/0042-6822(59)90043-1 . ПМИД 13669362 .
- ^ Jump up to: а б «11885 - DMEM, с низким содержанием глюкозы, пируват (состав)» . Термо Фишер Сайентифик . Проверено 28 декабря 2021 г.
- ^ Станнерс КП; Элисейри Г.Л.; Грин Х (1971). «Два типа рибосом в гибридных клетках мыши и хомяка». Нат Нью Биол . 230 (10): 52–4. дои : 10.1038/newbio230052a0 . ПМИД 5279808 .
- ^ «α-МЕМ» (PDF) . Реагенты ITW .
- ^ «Альфа-МЕМ с нуклеозидами» . Технология стволовых клеток.
- ^ «Модифицированный Игл Глазго 51492C» . Сигма-Олдрич . Проверено 4 ноября 2018 г.
- ^ «Базальный средний орел (BME)» . Термофишер .
- ^ «МЕМ» . Термофишер .
- ^ «МЕМ α, нуклеозидов нет» . Термофишер .