Синапто-фторин
Синапто-флуорин представляет собой генетически закодированный оптический индикатор высвобождения и рециркуляции везикул. Он используется в нейробиологии для изучения высвобождения медиатора. Он состоит из pH-чувствительной формы зеленого флуоресцентного белка (GFP), слитой с люминальной стороной мембранного белка, ассоциированного с везикулами (VAMP). При кислом pH внутри везикул-медиаторов синапто-флуорин не флуоресцирует ( гасится ). Когда везикулы высвобождаются, синапто-фторин попадает в нейтральное внеклеточное пространство, и пресинаптическая терминаль становится ярко флуоресцентной. После эндоцитоза везикулы снова подкисляются, и цикл может начаться снова. химическое подщелачивание Для нормализации сигналов синапто-фторина часто применяют всех везикул. Синапто-pHluorin иногда состоит из желтого флуоресцентного белка (YFP) для мониторинга цитоплазмы, поскольку его pK a выше, чем GFP (7,1 против 6,0). [1]
История
[ редактировать ]Синапто-флуорин был изобретен Геро Мизенбеком в 1998 году. [2] В 2006 году была опубликована улучшенная версия, в которой синаптофизин использовался для нацеливания GFP на везикулы. [3] В 2013 году был представлен двухцветный датчик высвобождения (ratio-sypHy) для определения размера пула рециркуляции в отдельных синапсах. [4]
Приложения
[ редактировать ]Синапто-флуорин в основном используется нейробиологами для изучения высвобождения и рециркуляции медиатора в пресинаптических окончаниях . [4] Его также применяли для изучения секреции инсулина в бета-клетках поджелудочной железы . [5]
Ссылки
[ редактировать ]- ^ Эшби, Майкл С.; Ибараки, Кёко; Хенли, Джереми М. (май 2004 г.). «Снаружи зелено: отслеживание белков клеточной поверхности с помощью pH-чувствительного GFP» . Тенденции в нейронауках . 27 (5): 257–261. дои : 10.1016/j.tins.2004.03.010 . ПМИД 15111007 . S2CID 23124974 .
- ^ Мизенбёк, Геро; Де Анджелис, Дино А.; Ротман, Джеймс Э. (июль 1998 г.). «Визуализация секреции и синаптической передачи с помощью pH-чувствительных зеленых флуоресцентных белков» . Природа . 394 (6689): 192–195. Бибкод : 1998Natur.394..192M . дои : 10.1038/28190 . ISSN 1476-4687 . ПМИД 9671304 . S2CID 4320849 .
- ^ Грансет, Бьёрн; Одерматт, Бенджамин; Ройл, Стивен Дж.; Лагнадо, Леон (сентябрь 2006 г.). «Клатрин-опосредованный эндоцитоз является доминирующим механизмом извлечения везикул в синапсах гиппокампа» . Нейрон . 51 (6): 773–786. дои : 10.1016/j.neuron.2006.08.029 . ПМИД 16982422 .
- ^ Jump up to: а б Роуз, Тобиас; Шёненбергер, Филипп; Езек, Карел; Эртнер, Томас Г. (2013). «Уточнение развития цикла везикул в коллатеральных синапсах Шаффера» . Нейрон . 77 (6): 1109–1121. дои : 10.1016/j.neuron.2013.01.021 . ПМИД 23522046 .
- ^ Цубои, Такаши; Раттер, Гай А. (апрель 2003 г.). «Множественные формы экзоцитоза типа «поцелуй и беги», выявленные с помощью микроскопии эванесцентной волны» . Современная биология . 13 (7): 563–567. дои : 10.1016/S0960-9822(03)00176-3 . ПМИД 12676086 .
| Оптогенетические актуаторы | |
|---|---|
| Оптогенетические датчики | |
| Связанные методы | |
