Нефелометрия (медицина)
Нефелометрия — метод, используемый в иммунологии для определения уровней некоторых белков плазмы крови. Например, общие уровни изотипов или классов антител : иммуноглобулин М , иммуноглобулин G и иммуноглобулин А. [ 1 ] Это важно для количественного определения свободных легких цепей при таких заболеваниях, как множественная миелома . Количественная оценка важна для классификации заболеваний и для мониторинга заболевания после лечения пациента (увеличенное отклонение соотношения между легкими цепями каппа и лямбда после лечения пациента является признаком рецидива заболевания).
Его осуществляют путем измерения рассеянного света под углом к измеряемому образцу. [ 2 ] В диагностической нефелометрии восходящая ветвь кривой Гейдельбергера-Кендалла расширяется за счет оптимизации хода реакции, так что сигналы измерения большинства белков плазмы (крови человека) попадают на левую сторону кривой Гейдельбергера-Кендалла даже при очень высоких значениях. высокие концентрации. [ нужна ссылка ]
Этот метод широко используется в клинических лабораториях, поскольку его относительно легко автоматизировать. Он основан на том принципе, что разбавленная суспензия мелких частиц будет рассеивать проходящий через нее свет (обычно лазерный), а не просто поглощать его. Степень рассеяния определяется путем сбора света под углом (обычно под углом 30 и 90 градусов). [ 3 ]
Антитело и антиген смешиваются в таких концентрациях, что образуются лишь небольшие агрегаты, которые не оседают быстро на дно. Величину рассеяния света измеряют и сравнивают с величиной рассеяния известных смесей. Количество неизвестного определяется по стандартной кривой.
Нефелометрию можно использовать для обнаружения либо антигена, либо антитела, но обычно она проводится с антителом в качестве реагента и антигеном пациента в качестве неизвестного. [ 4 ] В медицинской лаборатории иммунологии можно провести два типа тестов: «конечная нефелометрия» и «кинетическая (скоростная) нефелометрия».
Нефелометрические тесты по конечной точке проводятся, позволяя реакции антитело/антиген пройти до завершения (до тех пор, пока все присутствующие антитела-реагенты и имеющиеся антигены образца пациента, которые могут агрегировать, не агрегируют и перестанут образовываться комплексы). Однако крупные частицы выпадают из раствора и вызывают ложные показания разброса, поэтому была разработана кинетическая нефелометрия.
В кинетической нефелометрии скорость рассеяния измеряют сразу после добавления реагента. Пока реагент постоянен, скорость изменения можно рассматривать как напрямую связанную с количеством присутствующего антигена.
Другие приложения
[ редактировать ]Помимо медицинских применений, нефелометрию можно использовать для измерения прозрачности воды. [ 5 ] для измерения роста микроорганизмов [ 6 ] [ 7 ] и для проверки растворимости лекарств. [ 3 ]
См. также
[ редактировать ]Ссылки
[ редактировать ]- ^ Энциклопедия MedlinePlus : 003545
- ^ Риз, Энди К.; Долен, Уильям К. (1998). «Глава 4: Реакции антиген-антитело, нефелометрия» . Основы иммунологии . Медицинский колледж Джорджии. Архивировано из оригинала 4 сентября 2006 года.
- ^ Jump up to: а б «Нефелометрия» . БМГ ЛабТех . 2022 . Проверено 9 ноября 2022 г.
- ^ Стивенс, Кристин Доррестейн (2010). Клиническая иммунология и серология (3-е изд.). Компания Ф.А. Дэвиса. п. 127. ИСБН 978-0803618145 .
- ^ Fondriest Environmental, Inc. (5 сентября 2014 г.). «Измерение мутности, TSS и прозрачности воды» . Основы экологических измерений . Проверено 9 ноября 2022 г.
- ^ Торе, Эли С.Дж.; Шотерс, Флорис; Плюнь, Йорнт; Ван Мирт, Сабина (сентябрь 2021 г.). «Мониторинг биомассы микроводорослей в пилотных фотобиореакторах в режиме реального времени с использованием нефелометрии» . Процессы . 9 (9): 1530. дои : 10.3390/pr9091530 .
- ^ Мечснер, КЛ (1 января 1984 г.). «Автоматизированная нефелометрическая система для оценки роста бактериальных культур». Аналитика Химика Акта . 163 : 85–90. Бибкод : 1984AcAC..163...85M . дои : 10.1016/S0003-2670(00)81496-8 .