Реактивация клетки-хозяина
Эта статья нуждается в дополнительных цитатах для проверки . ( август 2014 г. ) |
Термин «реактивация клетки-хозяина» или HCR был впервые использован для описания выживаемости бактериофагов, облученных УФ- излучением, которые были трансфицированы в клетки, предварительно обработанные УФ-излучением. [ 1 ] Сначала считалось, что это явление является результатом гомологичной рекомбинации между бактериями и фагом, но позже было признано ферментативной репарацией. [ 2 ] [ 3 ] [ 4 ] Позднее были разработаны модификации этого анализа с использованием векторов плазмидной ДНК временной экспрессии на иммортализованных фибробластах . [ 5 ] и в последнее время на лимфоцитах человека . [ 6 ]
Анализ HCR , известный также как анализ реактивации плазмиды, косвенно контролирует систему репарации клеточной транскрипции, которая активируется ингибируемым транскрипцией повреждением, нанесенным УФ-излучением плазмиде . Учитывая, что повреждение ДНК, вызванное УФ-излучением, используется в качестве мутагена , клетка использует путь эксцизионного восстановления нуклеотидов NER , который активируется искажением спирали ДНК. [ 1 ]
или Анализ реактивации клетки-хозяина HCR — это метод, используемый для измерения способности репарации ДНК клетки с определенным изменением ДНК. В анализе HCR измеряется способность интактной клетки восстанавливать экзогенную ДНК. [ 7 ] Клетка-хозяин трансфицируется поврежденной плазмидой , содержащей репортерный ген , обычно люциферазу , которая была деактивирована из-за повреждения. Способность клетки восстанавливать повреждения плазмиды после ее введения в клетку позволяет реактивировать репортерный ген. Более ранние версии этого анализа были основаны на гене хлорамфениколацетилтрансферазы (CAT) , [ 5 ] но версия анализа с использованием люциферазы в качестве репортерного гена почти в 100 раз более чувствительна. [ 1 ]
См. также
[ редактировать ]- Болезнь ускоренного старения
- Старение ДНК
- Клеточный цикл
- Повреждение ДНК (естественное)
- Теория старения, связанная с повреждением ДНК
- репликация ДНК
- Прямое повреждение ДНК
- Митохондриальная генетика человека
- Косвенное повреждение ДНК
- Прогерия
Ссылки
[ редактировать ]- ^ Jump up to: а б с Джонсон Дж. М., Латимер Дж. Дж. (2005). «Анализ репарации ДНК с использованием реактивации клетки-хозяина на основе трансфекции». Протоколы молекулярной токсикологии . Методы Мол. Биол. Том. 291. С. 321–35. дои : 10.1385/1-59259-840-4:321 . ISBN 1-59259-840-4 . ПМЦ 4860737 . ПМИД 15502233 .
- ^ Руперт К.С., Харм В. (1966). «Реактивация после фотобиологического повреждения». Адв. Радиат. Биол . Достижения радиационной биологии. 2 :1–81. дои : 10.1016/B978-1-4832-3121-1.50006-2 . ISBN 9781483231211 . ISSN 0065-3292 .
- ^ Смит К.К., Мартиньони К.Д. (декабрь 1976 г.). «Защита клеток Escherichia coli от летального воздействия ультрафиолетового и рентгеновского облучения путем предварительного рентгеновского облучения: генетическое и физиологическое исследование». Фотохим. Фотобиол . 24 (6): 515–23. дои : 10.1111/j.1751-1097.1976.tb06868.x . ПМИД 798210 . S2CID 37612164 .
- ^ Джонс Д.Т., Робб Ф.Т., Вудс Д.Р. (декабрь 1980 г.). «Влияние кислорода на выживаемость Bacteroides fragilis после облучения дальним ультрафиолетом» . Дж. Бактериол . 144 (3): 1179–81. дои : 10.1128/JB.144.3.1179-1181.1980 . ПМЦ 294787 . ПМИД 7440505 .
- ^ Jump up to: а б Протич-Саблич М., Кремер К.Х. (октябрь 1985 г.). «Один димер пиримидина инактивирует экспрессию трансфицированного гена в клетках пигментной ксеродермы» . Учеб. Натл. акад. наук. США . 82 (19): 6622–6. Бибкод : 1985PNAS...82.6622P . дои : 10.1073/pnas.82.19.6622 . ПМК 391262 . ПМИД 2995975 .
- ^ Атас В.Ф., Хедаяти М.А., Матаноски Г.М., Фармер Э.Р., Гроссман Л. (ноябрь 1991 г.). «Разработка и валидация полевых испытаний метода восстановления ДНК в циркулирующих лимфоцитах человека». Рак Рез . 51 (21): 5786–93. ПМИД 1933849 .
- ^ Маккриди, С. (2014). Иммуноанализ для измерения восстановления ДНК. В П. Кеохавонге и С.Г. Гранте (ред.), «Протоколы молекулярной токсикологии» (том 1105, стр. 551–564). Хумана Пресс. дои : 10.1007/978-1-62703-739-6_38