C2C12
C2C12 представляет собой иммортализованную мыши миобластов линию клеток . Клеточная линия C2C12 представляет собой субклон миобластов , первоначально полученных Яффе и Сакселем в Научном институте Вейцмана в Израиле в 1977 году. [1] Клетки C2C12, разработанные для исследований in vitro миобластов, выделенных в результате сложных взаимодействий в условиях in vivo , полезны в биомедицинских исследованиях. [2] Эти клетки способны к быстрой пролиферации при высоком уровне сыворотки и дифференцировке в мышечные трубочки при низком уровне сыворотки. Мононуклеированные миобласты могут позже сливаться с образованием многоядерных мышечных трубочек при низком уровне сыворотки или голодании, что приводит к образованию предшественников сократительных клеток скелетных мышц в процессе миогенеза . [3] Клетки C2C12 используются для изучения дифференцировки миобластов, остеобластов и миогенеза, для экспрессии различных белков-мишеней и для изучения механистических биохимических путей.
Морфология
[ редактировать ]Клетки C2C12 дикого типа имеют радиально разветвленную морфологию, состоящую из длинных волокон, идущих во многих направлениях. Клетки C2C12 можно культивировать в различных условиях, чтобы вызвать специфические интересующие реакции. Например, благодаря высокой скорости дифференциации и скорости слияния клеточной линии, матрицы фибронектина можно микропосеять в чашки Петри или колбы для клеточных культур, чтобы индуцировать специфические модели роста, такие как взаимодействия клеток скелетных мышц с внеклеточного матрикса . компонентами [4] Введение молекул адгезии может изменить характер роста клеток C2C12 на продольное распределение, проявляющее полярность. [5] Существует множество способов регулировать форму миобластов C2C12 генетически и экологически: от стресса до изменения цитоскелета и факторов роста. Каркас клеток C2C12 особенно важен для изучения регенерации мышечной ткани после травмы или после истощения тканей из-за болезни или реабилитации в отделении интенсивной терапии .
Использование в исследованиях
[ редактировать ]Было показано, что клетки C2C12 эффективно включают экзогенную кДНК и нуклеиновые кислоты путем трансфекции . В пилотном исследовании, первоначально проведенном Яффе и Сакселем, C2C12 были получены путем серийного пассажа миобластов, культивированных из мышц бедра мышей C3H после раздавливания. В их исследовании набор клеток C2C12 был культивирован из миобластов нормальных мышей, которые были выращены у двухмесячных мышей C3H после раздавливания. В течение двух дней нормальные клетки дифференцировались в веретенообразные мононуклеированные миобласты. Через четыре дня сформировались многоядерные сети мышечных трубочек, а через несколько дней саркомеры и Z-линии. можно было наблюдать [6] Напротив, дистрофические клетки образовывали укороченные волокна, покрытые фибробластами , что является признаком атрофии мышц. [1]
Клетки C2C12 демонстрируют быстрое развитие и созревание в функциональные клетки скелетных мышц или клетки сердечной мышцы , обладающие способностью сокращаться и генерировать силу. [6] Скорость формирования мышц из клеток C2C12 можно контролировать путем введения генов потери функций, жизненно важных для слияния миобластов и миогенеза. [7] В условиях некроза, таких как фактор некроза опухоли альфа ( TNF-α ), тяжелой цепи миозина , в клетках скелетных мышц C2C12. была показана прямая потеря белка, особенно белка [8] Клетки C2C12 были использованы для выяснения репликации инактивированной Х-хромосомы (Xi) во время ранней S-фазы клеточного цикла, которая регулируется эпигенетически. [9] Клетки С2С12 особенно удобны для изучения клеточного цикла благодаря высокой скорости деления.
Ссылки
[ редактировать ]- ^ Перейти обратно: а б Яффе, Дэвид; Саксель, Ора (22 декабря 1977 г.). «Серийное пассирование и дифференцировка миогенных клеток, выделенных из дистрофических мышц мыши». Природа . 270 (5639): 725–727. Бибкод : 1977Natur.270..725Y . дои : 10.1038/270725a0 . ISSN 0028-0836 . ПМИД 563524 . S2CID 4196110 .
- ^ «Клеточная линия C2C12» . Проверено 12 июля 2018 г.
- ^ «Работа с клеточной линией C2C12» . Исследования миогенеза . 4 февраля 2012 года . Проверено 3 мая 2017 г.
- ^ Баджадж, Пиюш; Редди, Бобби; Миллет, Ларри; Вэй, Чунань; Зорлутуна, Пинар; Бао, Банда; Башир, Рашид (1 сентября 2011 г.). «Паттерн дифференцировки скелетных миобластов C2C12». Интегративная биология . 3 (9): 897–909. дои : 10.1039/c1ib00058f . ISSN 1757-9708 . ПМИД 21842084 .
- ^ Мермельштейн, CS (5 мая 2003 г.). «Изменения формы клеток, белков цитоскелета и мест адгезии культивируемых клеток после внеклеточного хелатирования Ca2+» (PDF) . Бразильский журнал медицинских и биологических исследований . 36 (8): 1111–1116. дои : 10.1590/s0100-879x2003000800018 . ПМИД 12886466 .
- ^ Перейти обратно: а б МакМахон, ДК; Андерсон, Пенсильвания; Нассар, Р.; Бантинг, Дж. Б.; Саба, З.; Окли, AE; Малуф, Н.Н. (1 июня 1994 г.). «Клетки C2C12: биофизические, биохимические и иммуноцитохимические свойства». Американский журнал физиологии. Клеточная физиология . 266 (6): 1795–1802 гг. дои : 10.1152/ajpcell.1994.266.6.c1795 . ISSN 0363-6143 . ПМИД 8023908 .
- ^ Би, Пэнпэн; Рамирес-Мартинес, Андрес; Ли, Хуэй; Каннавино, Джессика; Макэналли, Джон Р.; Шелтон, Джон М.; Санчес-Ортис, Эфраин; Бассель-Дюби, Ронда; Олсон, Эрик Н. (21 апреля 2017 г.). «Контроль мышечного формирования с помощью фузогенного микропептидного миомиксера» . Наука . 356 (6335): 323–327. Бибкод : 2017Sci...356..323B . дои : 10.1126/science.aam9361 . ISSN 1095-9203 . ПМК 5502127 . ПМИД 28386024 .
- ^ Ли, Ю.П.; Шварц, Р.Дж.; Уодделл, ID; Холлоуэй, БР; Рид, МБ (1 июля 1998 г.). «Миоциты скелетных мышц подвергаются потере белка и опосредованной реактивным кислородом активации NF-kappaB в ответ на фактор некроза опухоли альфа» . Журнал ФАСЭБ . 12 (10): 871–880. дои : 10.1096/fasebj.12.10.871 . ISSN 0892-6638 . ПМИД 9657527 .
- ^ Касас-Делучки, Корелла С.; Бреро, Алессандро; Ран, Ханс-Петер; Соловей Ирина; Вуц, Антон; Кремер, Томас; Леонхардт, Генрих; Кардозо, М. Кристина (1 марта 2011 г.). «Ацетилирование гистонов контролирует динамику репликации неактивной Х-хромосомы» . Природные коммуникации . 2 : 222. Бибкод : 2011NatCo...2..222C . дои : 10.1038/ncomms1218 . ISSN 2041-1723 . ПМК 3072080 . ПМИД 21364561 .