✖


Jump to content

Изолированный район

Add links
Множественные уровни организации генома млекопитающих. Хромосомы занимают отдельные территории в ядре (слева). Топологически ассоциированные домены (TAD) — это области генома с локально высокой частотой взаимодействия (в центре). Изолированные окрестности представляют собой петли, образованные в результате взаимодействия CTCF/связанных с когезином якорей, содержащих гены и их регуляторные элементы.

В млекопитающих биологии петель , изолированные районы представляют собой структуры хромосомных образованные в результате физического взаимодействия двух локусов ДНК , связанных фактором транскрипции CTCF и совместно занятых когезином . [ 1 ] Считается, что изолированные районы являются структурными и функциональными единицами генного контроля , поскольку их целостность важна для нормальной регуляции генов. Имеющиеся данные свидетельствуют о том, что эти структуры образуют механистическую основу хромосомных структур более высокого порядка, включая топологически ассоциированные домены (TADs). Изолированные окрестности функционально важны для понимания регуляции генов в нормальных клетках и нарушения регуляции экспрессии генов при заболеваниях.

Нацеливание на ген-энхансер

[ редактировать ]

генов млекопитающих Транскрипция обычно контролируется энхансерами . [ 2 ] [ 3 ] [ 4 ] [ 5 ] [ 6 ] Энхансеры могут регулировать транскрипцию генов на больших расстояниях, создавая петлю для физического контакта с генами-мишенями. Это свойство энхансеров затрудняет идентификацию целевого гена(ов) энхансера. Инсуляторы , другой тип регуляторного элемента ДНК, ограничивают способность энхансера нацеливаться на дистальные гены, когда инсулятор расположен между энхансером и потенциальной мишенью. [ 7 ] [ 8 ] [ 9 ] [ 10 ] У млекопитающих инсуляторы связываются CTCF, [ 11 ] но только меньшинство сайтов, связанных с CTCF, действуют как изоляторы. [ 12 ] Молекулы CTCF могут образовывать гомодимеры на ДНК, которые могут быть связаны когезином; эта структура петли хроматина помогает ограничить способность энхансеров внутри петли нацеливаться на гены вне петли. Петли с CTCF и когезином в начале и конце петли, которые ограничивают нацеливание на ген-энхансер, представляют собой «изолированные окрестности».

Функция

[ редактировать ]

Изолированные окрестности определяются как петли хромосом, которые образованы гомодимерами CTCF , связанными с когезином и содержащими по крайней мере один ген. [ 13 ] [ 14 ] Области, связанные с CTCF/когезином, ограничивающие изолированное окружение, называются «якорями». человека Одно исследование эмбриональных стволовых клеток выявило около 13 000 изолированных районов, каждый из которых в среднем содержал три гена и имел размер около 90 КБ. [ 15 ] Две линии доказательств утверждают, что границы изолированных районов являются изолирующими: 1) подавляющее большинство (~ 90-97%) взаимодействий энхансер-ген содержится внутри изолированных районов и 2) генетическое возмущение CTCF / связанных с когезином якорей изолированного окружения. приводит к локальной дисрегуляции генов из-за новых взаимодействий за пределами района.

Большинство изолированных районов, по-видимому, сохраняется во время развития, поскольку связывание CTCF и структуры петель CTCF-CTCF очень похожи для разных типов клеток человека. [ 16 ] [ 17 ] Хотя расположение многих изолированных соседних структур сохраняется в разных типах клеток, взаимодействия энхансер-ген, происходящие внутри них, специфичны для типа клеток, что согласуется со специфичной для типа клеток активностью энхансеров. [ 18 ] [ 19 ]

Ассоциация с ТАД

[ редактировать ]

Топологически ассоциированные домены (TAD) представляют собой области размером в мегабазу с относительно высокими частотами взаимодействия ДНК. [ 20 ] [ 21 ] Механистические исследования показывают, что TAD представляют собой отдельные изолированные кварталы или группы изолированных кварталов. [ 22 ]

Актуальность в отношении болезней человека

[ редактировать ]

Генетические и эпигенетические вариации изолированных якорей соседства связаны с несколькими заболеваниями человека. Одно исследование генетического варианта, связанного с астмой, нарушает связывание CTCF и образование изолированного окружения. [ 23 ] Исследования импринтированных локусов показали, что метилирование ДНК контролирует петли, заякоренные в CTCF, регулирующие экспрессию генов. Лица с аберрациями метилирования в импринтированном сайте связывания CTCF рядом с IGF2/H19 образуют аберрантные изолированные окрестности и развивают синдром Беквита-Видемана (когда оба аллеля имеют отцовский тип изолированного соседства) или синдром Сильвера-Рассела (когда оба аллеля имеют материнский тип). изолированного района). [ 24 ]

Изолированные районы помогают идентифицировать целевые гены вариантов энхансеров, связанных с заболеванием. Большинство вариантов ДНК, связанных с заболеваниями, выявленных в ходе полногеномных исследований ассоциаций, встречаются в энхансерах. [ 25 ] [ 26 ] [ 27 ] [ 28 ] Идентификация генов-мишеней энхансеров с вариантами, связанными с заболеванием, была трудной, поскольку энхансеры могут действовать на больших расстояниях, но ограничение нацеливания на ген-энхансер с помощью изолированных районов уточняет предсказание генов-мишеней. Например, вариант ДНК, связанный с диабетом 2 типа, встречается в энхансере, расположенном между генами CDC123 и CAMK1D, но влияет только на CAMK1D, поскольку этот ген и энхансер находятся в одном и том же изолированном районе, тогда как CDC123 находится вне этого района. [ 29 ] [ 30 ]

Соматические мутации , которые изменяют изолированные соседние якоря, могут способствовать онкогенезу . Хромосомные изменения, такие как транслокации , делеции и тандемные дупликации, пересекающиеся с изолированными соседними якорными сайтами, могут активировать онкогены . [ 31 ] [ 32 ] [ 33 ] Эпигенетическая дисрегуляция также может способствовать онкогенезу за счет изменения изолированных районов. IDH с мутацией Глиомы демонстрируют измененный характер метилирования ДНК, поэтому связывание CTCF, которое зависит от метилирования ДНК, также изменяется. [ 34 ] Изменение связывания CTCF нарушает изолированные районы и может привести к неправильной регуляции онкогена.

Ссылки

[ редактировать ]
  1. ^ Хниш, Д; День, ДС; Янг, РА (17 ноября 2016 г.). «Изолированные районы: структурные и функциональные единицы контроля генов млекопитающих» . Клетка . 167 (5): 1188–1200. дои : 10.1016/j.cell.2016.10.024 . ПМК   5125522 . ПМИД   27863240 .
  2. ^ Бюкер, К; Высоцкая, Дж (июнь 2012 г.). «Усилители как центры интеграции информации в развитии: уроки геномики» . Тенденции в генетике . 28 (6): 276–284. дои : 10.1016/j.tig.2012.02.008 . ПМК   5064438 . ПМИД   22487374 .
  3. ^ Хайнц, С; Романоски, CE; Беннер, К; Стекло, СК (март 2015 г.). «Выбор и функция энхансеров, специфичных для типа клеток» . Nature Reviews Молекулярно-клеточная биология . 16 (3): 144–154. дои : 10.1038/nrm3949 . ПМЦ   4517609 . ПМИД   25650801 .
  4. ^ Левин, М; Каттольо, К; Тцзян, Р. (27 марта 2014 г.). «Петля назад, чтобы прыгнуть вперед: транскрипция вступает в новую эру» . Клетка . 157 (1): 13–25. дои : 10.1016/j.cell.2014.02.009 . ПМК   4059561 . ПМИД   24679523 .
  5. ^ Онг, Коннектикут; Корсес, В.Г. (апрель 2011 г.). «Функция усилителя: новое понимание регуляции экспрессии тканеспецифичных генов» . Обзоры природы Генетика . 12 (4): 283–293. дои : 10.1038/nrg2957 . ПМК   3175006 . ПМИД   21358745 .
  6. ^ Рен, Б; Юэ, Ф (2015). «Усилители транскрипции: соединение генома и фенома» . Симпозиумы Колд-Спринг-Харбор по количественной биологии . 80 : 17–26. дои : 10.1101/sqb.2015.80.027219 . ПМИД   26582789 .
  7. ^ Чунг, Дж. Х.; Уайтли, М; Фельзенфельд, Г. (13 августа 1993 г.). «5'-элемент домена бета-глобина курицы служит изолятором в эритроидных клетках человека и защищает от позиционного эффекта у дрозофилы». Клетка . 74 (3): 505–514. дои : 10.1016/0092-8674(93)80052-г . ПМИД   8348617 . S2CID   45876439 .
  8. ^ Гейер, ПК; Корсес, В.Г. (октябрь 1992 г.). «Позиционно-специфическая репрессия транскрипции белком цинкового пальца дрозофилы» . Гены и развитие . 6 (10): 1865–1873. дои : 10.1101/гад.6.10.1865 . ПМИД   1327958 .
  9. ^ Келлум, Р; Шедль, П. (8 марта 1991 г.). «Анализ эффекта положения для границ хромосомных доменов более высокого порядка». Клетка . 64 (5): 941–950. дои : 10.1016/0092-8674(91)90318-с . ПМИД   1848159 . S2CID   43485905 .
  10. ^ Удвардий, А; Мэн, Э; Шедль, П. (20 сентября 1985 г.). «Хромомера 87A7. Идентификация новых структур хроматина, фланкирующих локус теплового шока, которые могут определять границы доменов более высокого порядка». Журнал молекулярной биологии . 185 (2): 341–358. дои : 10.1016/0022-2836(85)90408-5 . ПМИД   2997449 .
  11. ^ Белл, AC; Вест, АГ; Фельзенфельд, Г. (6 августа 1999 г.). «Белок CTCF необходим для блокирования энхансеров инсуляторов позвоночных» . Клетка . 98 (3): 387–396. дои : 10.1016/s0092-8674(00)81967-4 . ПМИД   10458613 .
  12. ^ Лю, М; Маурано, Монтана; Ван, Х; Ци, Ч; Песня, Чехия; Навас, Пенсильвания; Эмери, Д.В.; Стаматояннопулос, JA ; Стаматояннопулос, Г. (февраль 2015 г.). «Геномное открытие мощных изоляторов хроматина для генной терапии человека». Природная биотехнология . 33 (2): 198–203. дои : 10.1038/nbt.3062 . ПМИД   25580597 . S2CID   19587760 .
  13. ^ Дауэн, Дж. М.; Фан, ЗП; Хниш, Д; Рен, Дж; Авраам, Би Джей; Чжан, Л.Н.; Вайнтрауб, АО; Шуйерс, Дж; Ли, ТИ; Чжао, К; Янг, РА (9 октября 2014 г.). «Контроль генов клеточной идентичности происходит в изолированных районах хромосом млекопитающих» . Клетка . 159 (2): 374–387. дои : 10.1016/j.cell.2014.09.030 . ПМК   4197132 . ПМИД   25303531 .
  14. ^ Джи, Х; Дадон, Д.Б.; Пауэлл, Бельгия; Фан, ЗП; Борхес-Ривера, Д; Шачар, С; Вайнтрауб, АО; Гниш, Д; Пегораро, Дж; Ли, ТИ; Мистели, Т; Йениш, Р; Янг, РА (4 февраля 2016 г.). «Трехмерный ландшафт регуляции хромосом в плюрипотентных клетках человека» . Клеточная стволовая клетка . 18 (2): 262–275. дои : 10.1016/j.stem.2015.11.007 . ПМЦ   4848748 . ПМИД   26686465 .
  15. ^ Джи, Х; Дадон, Д.Б.; Пауэлл, Бельгия; Фан, ЗП; Борхес-Ривера, Д; Шачар, С; Вайнтрауб, АО; Гниш, Д; Пегораро, Дж; Ли, ТИ; Мистели, Т; Йениш, Р; Янг, РА (4 февраля 2016 г.). «Трехмерный ландшафт регуляции хромосом в плюрипотентных клетках человека» . Клеточная стволовая клетка . 18 (2): 262–75. дои : 10.1016/j.stem.2015.11.007 . ПМЦ   4848748 . ПМИД   26686465 .
  16. ^ Джи, Х; Дадон, Д.Б.; Пауэлл, Бельгия; Фан, ЗП; Борхес-Ривера, Д; Шачар, С; Вайнтрауб, АО; Гниш, Д; Пегораро, Дж; Ли, ТИ; Мистели, Т; Йениш, Р; Янг, РА (4 февраля 2016 г.). «Трехмерный ландшафт регуляции хромосом в плюрипотентных клетках человека» . Клеточная стволовая клетка . 18 (2): 262–75. дои : 10.1016/j.stem.2015.11.007 . ПМЦ   4848748 . ПМИД   26686465 .
  17. ^ Кудапа, С; Джоти, Р; Шонес, Делавэр; Ро, Тайвань; Цюи, К; Чжао, К. (январь 2009 г.). «Глобальный анализ инсуляторсвязывающего белка CTCF в областях барьера хроматина выявляет разграничение активных и репрессивных доменов» . Геномные исследования . 19 (1): 24–32. дои : 10.1101/гр.082800.108 . ПМК   2612964 . ПМИД   19056695 .
  18. ^ Джи, Х; Дадон, Д.Б.; Пауэлл, Бельгия; Фан, ЗП; Борхес-Ривера, Д; Шачар, С; Вайнтрауб, АО; Гниш, Д; Пегораро, Дж; Ли, ТИ; Мистели, Т; Йениш, Р; Янг, РА (4 февраля 2016 г.). «Трехмерный ландшафт регуляции хромосом в плюрипотентных клетках человека» . Клеточная стволовая клетка . 18 (2): 262–75. дои : 10.1016/j.stem.2015.11.007 . ПМЦ   4848748 . ПМИД   26686465 .
  19. ^ Смит, Э.М.; Ладжуа, БР; Джайн, Дж; Деккер, Дж. (7 января 2016 г.). «Инвариантные границы TAD ограничивают специфичные для типа клеток циклические взаимодействия между промоторами и дистальными элементами вокруг локуса CFTR» . Американский журнал генетики человека . 98 (1): 185–201. дои : 10.1016/j.ajhg.2015.12.002 . ПМЦ   4716690 . ПМИД   26748519 .
  20. ^ Диксон-младший; Сельварадж, С; Юэ, Ф; Ким, А; Ли, Ю; Шен, Ю; Ху, М; Лю, Дж. С.; Рен, Б. (11 апреля 2012 г.). «Топологические домены в геномах млекопитающих, выявленные путем анализа взаимодействий хроматина» . Природа . 485 (7398): 376–80. Бибкод : 2012Natur.485..376D . дои : 10.1038/nature11082 . ПМЦ   3356448 . ПМИД   22495300 .
  21. ^ Нора, EP; Ладжуа, БР; Шульц, Э.Г.; Джорджетти, Л; Окамото, я; Слуга, Н; Пиолот, Т; ван Беркум, Нидерланды; Мейзиг, Дж; Седат, Дж; Грибнау, Дж; Барийо, Э; Блютген, Н; Деккер, Дж ; Херд, Э. (11 апреля 2012 г.). «Пространственное разделение регуляторного ландшафта центра Х-инактивации» . Природа . 485 (7398): 381–5. Бибкод : 2012Natur.485..381N . дои : 10.1038/nature11049 . ПМЦ   3555144 . ПМИД   22495304 .
  22. ^ Джи, Х; Дадон, Д.Б.; Пауэлл, Бельгия; Фан, ЗП; Борхес-Ривера, Д; Шачар, С; Вайнтрауб, АО; Гниш, Д; Пегораро, Дж; Ли, ТИ; Мистели, Т; Йениш, Р; Янг, РА (4 февраля 2016 г.). «Трехмерный ландшафт регуляции хромосом в плюрипотентных клетках человека» . Клеточная стволовая клетка . 18 (2): 262–75. дои : 10.1016/j.stem.2015.11.007 . ПМЦ   4848748 . ПМИД   26686465 .
  23. ^ Тан, З; Луо, О.Дж.; Ли, Х; Чжэн, М; Чжу, Джей-Джей; Саладж, П; Тшаскома, П; Магальска, А; Влодарчик, Дж; Рущицкий, Б; Михальский, П; Пикуч, Э; Ван, П; Ван, Д; Тянь, СЗ; Пенрад-Мобаед, М; Сакс, Л.М.; Руан, Х; Вэй, CL; Лю, ET; Вильчински, генеральный менеджер; Плевчинский, Д; Ли, Г; Руан, Ю. (17 декабря 2015 г.). «3D-архитектура генома человека, опосредованная CTCF, раскрывает топологию хроматина для транскрипции» . Клетка . 163 (7): 1611–27. дои : 10.1016/j.cell.2015.11.024 . ПМЦ   4734140 . ПМИД   26686651 .
  24. ^ Нативио, Р; Спараго, А; Ито, Ю; Вексберг, Р; Риччио, А; Мюррелл, А. (1 апреля 2011 г.). «Нарушение геномного соседства в импринтированном локусе IGF2-H19 при синдроме Беквита-Видемана и синдроме Сильвера-Рассела» . Молекулярная генетика человека . 20 (7): 1363–74. дои : 10.1093/hmg/ddr018 . ПМК   3049359 . ПМИД   21282187 .
  25. ^ Эрнст, Дж; Херадпур, П; Миккельсен, Т.С.; Шореш, Н; Уорд, LD; Эпштейн, CB; Чжан, X; Ван, Л; Исснер, Р; Койн, М; Ку, М; Дарем, Т; Келлис, М; Бернштейн, Бельгия (5 мая 2011 г.). «Картирование и анализ динамики состояния хроматина в девяти типах клеток человека» . Природа . 473 (7345): 43–9. Бибкод : 2011Natur.473...43E . дои : 10.1038/nature09906 . ПМК   3088773 . ПМИД   21441907 .
  26. ^ Фарх, КК; Марсон, А; Чжу, Дж; Кляйневитфельд, М; Хаусли, штат Вашингтон; Бейк, С; Шореш, Н; Уиттон, Х; Райан, Р.Дж.; Шишкин А.А.; Хатан, М; Карраско-Альфонсо, MJ; Майер, Д; Лаки, CJ; Патсопулос, Н.А.; Де Ягер, Польша; Качроо, В.К.; Эпштейн, CB; Дейли, MJ; Хафлер, Д.А.; Бернштейн, Бельгия (19 февраля 2015 г.). «Генетическое и эпигенетическое точное картирование причинных вариантов аутоиммунных заболеваний» . Природа . 518 (7539): 337–43. Бибкод : 2015Natur.518..337F . дои : 10.1038/nature13835 . ПМК   4336207 . ПМИД   25363779 .
  27. ^ Хниш, Д; Авраам, Би Джей; Ли, ТИ; Лау, А; Сен-Андре, В; Сигова, А.А.; Хок, штат Ха; Янг, РА (7 ноября 2013 г.). «Суперусилители в контроле идентичности клеток и заболеваний» . Клетка . 155 (4): 934–47. дои : 10.1016/j.cell.2013.09.053 . ПМК   3841062 . ПМИД   24119843 .
  28. ^ Маурано, Монтана; Гумберт, Р; Райнс, Э; Турман, Р.Э.; Хауген, Э; Ван, Х; Рейнольдс, AP; Сандстрем, Р; Цюй, Х; Броуди, Дж; Шафер, А; Нери, Ф; Лук-порей; Кутявин Т; Стелинг-Сан, С; Джонсон, АК; Кэнфилд, Теннесси; Гисте, Э; Дигель, М; Бейтс, Д; Хансен, РС; Неф, С; Сабо, Пи Джей; Хаймфельд, С; Раубичек, А; Зиглер, С; Котсапас, К; Сотоодения, Н; Гласс, я; Сюняев, СР; Каул, Р; Стаматояннопулос, Дж. А. (7 сентября 2012 г.). «Систематическая локализация распространенных вариаций регуляторной ДНК, связанных с заболеванием» . Наука . 337 (6099): 1190–5. Бибкод : 2012Sci...337.1190M . дои : 10.1126/science.1222794 . ПМЦ   3771521 . ПМИД   22955828 .
  29. ^ Фогарти, член парламента; Кэннон, Мэн; Вадламуди, С; Голтон, Кей Джей; Мольке, КЛ (11 сентября 2014 г.). «Идентификация регуляторного варианта, который связывает FOXA1 и FOXA2 в локусе GWAS диабета 2 типа CDC123/CAMK1D» . ПЛОС Генетика . 10 (9): e1004633. дои : 10.1371/journal.pgen.1004633 . ПМЦ   4161327 . ПМИД   25211022 .
  30. ^ GTEx, Консорциум. (8 мая 2015 г.). «Геномика человека. Пилотный анализ экспрессии генотипа и ткани (GTEx): регуляция мультитканевых генов у людей» . Наука . 348 (6235): 648–60. Бибкод : 2015Sci...348..648. . дои : 10.1126/science.1262110 . ПМЦ   4547484 . ПМИД   25954001 .
  31. ^ Грёшель, С; Сандерс, Массачусетс; Хугенбозем, Р.; де Вит, Э; Бауман, бакалавр; Эрпелинк, К; ван дер Фельден, В.Х.; Хаверманс, М; Авеллино, Р; ван Лом, К; Ромбаутс, Э.Дж.; ван Дуин, М; Дёнер, К; Беверлоо, HB; Брэднер, Дж. Э.; Дёнер, Х; Левенберг, Б; Валк, ПиДжей; Биндельс, Э.М.; де Лаат, В; Делвел, Р. (10 апреля 2014 г.). «Одна перестройка онкогенного энхансера вызывает сопутствующую дерегуляцию EVI1 и GATA2 при лейкемии» . Клетка . 157 (2): 369–81. дои : 10.1016/j.cell.2014.02.019 . ПМИД   24703711 .
  32. ^ Хниш, Д; Вайнтрауб, АО; День, ДС; Валтон, Алабама; Бак, Р.О.; Ли, CH; Гольдманн, Дж; Ладжуа, БР; Фан, ЗП; Сигова, А.А.; Редди, Дж; Борхес-Ривера, Д; Ли, ТИ; Йениш, Р; Портеус, Миннесота; Деккер, Дж ; Янг, РА (25 марта 2016 г.). «Активация протоонкогенов путем разрушения окрестностей хромосом» . Наука . 351 (6280): 1454–8. Бибкод : 2016Sci...351.1454H . дои : 10.1126/science.aad9024 . ПМЦ   4884612 . ПМИД   26940867 .
  33. ^ Вайшенфельдт, Иоахим; Дубаш, Тарониш; Дринас, Александрос П.; Мардин, Балка Р.; Чен, Юаньюань; Штютц, Адриан М.; Васак, Себсатян М.; Боско, Грациелла; Халворсен, Энн Р.; Редер, Бенджамин; Эфтимиопулос, Теохарис; Эркек, Серап; Сигл, Кристина; Бреннер, Герман; Брустугун, Одд Т.; Дитер, Себастьян М; Норткотт, Пол А.; Петерсен, Ивер; Пфистер, Стефан М.; Шнайдер, Мартин; Сольберг, Стейнар К.; Туниссен, Эрик; Вейхерт, Вилко; Зихер, Томас; Томас, роман; Пайпер, Мартин; Хелланд, Аслауг; Болл, Клаудия Р.; Йехлингер, Мартин; Сотильо, Росио; Эмбер, Ханно; Корбель, Ян О. (2016). «Панараковый анализ изменений числа соматических копий указывает на участие IRS4 и IGF2 в захвате энхансера» . Природная генетика . 49 (1): 65–74. дои : 10.1038/ng.3722 . ПМК   5791882 . ПМИД   27869826 .
  34. ^ Флавахан, Вашингтон; Дьер, Ю; Лиау, Б.Б.; Гиллеспи, С.М.; Вентайхер, А.С.; Штеммер-Рахамимов, АО; Сува, ML; Бернштейн, Бельгия (7 января 2016 г.). «Инсуляторная дисфункция и активация онкогенов в глиомах с мутацией IDH» (PDF) . Природа . 529 (7584): 110–4. Бибкод : 2016Natur.529..110F . дои : 10.1038/nature16490 . ПМЦ   4831574 . ПМИД   26700815 .
Retrieved from "https://en.wikipedia.org/w/index.php?title=Insulated_neighborhood&oldid=1223304698"
Arc.Ask3.Ru: конец переведенного документа.
Arc.Ask3.Ru
Номер скриншота №: 712cbed8d202097019d2036725a07e13__1715398260
URL1:https://arc.ask3.ru/arc/aa/71/13/712cbed8d202097019d2036725a07e13.html
Заголовок, (Title) документа по адресу, URL1:
Insulated neighborhood - Wikipedia
Данный printscreen веб страницы (снимок веб страницы, скриншот веб страницы), визуально-программная копия документа расположенного по адресу URL1 и сохраненная в файл, имеет: квалифицированную, усовершенствованную (подтверждены: метки времени, валидность сертификата), открепленную ЭЦП (приложена к данному файлу), что может быть использовано для подтверждения содержания и факта существования документа в этот момент времени. Права на данный скриншот принадлежат администрации Ask3.ru, использование в качестве доказательства только с письменного разрешения правообладателя скриншота. Администрация Ask3.ru не несет ответственности за информацию размещенную на данном скриншоте. Права на прочие зарегистрированные элементы любого права, изображенные на снимках принадлежат их владельцам. Качество перевода предоставляется как есть. Любые претензии, иски не могут быть предъявлены. Если вы не согласны с любым пунктом перечисленным выше, вы не можете использовать данный сайт и информация размещенную на нем (сайте/странице), немедленно покиньте данный сайт. В случае нарушения любого пункта перечисленного выше, штраф 55! (Пятьдесят пять факториал, Денежную единицу (имеющую самостоятельную стоимость) можете выбрать самостоятельно, выплаичвается товарами в течение 7 дней с момента нарушения.)