NeutrAvid

Нейтралитный белок авидин представляет собой дегликозилированную версию куриного авидина с массой около 60 000 дальтон . В результате углеводов удаления связывание лектина снижается до необнаружимого уровня, однако аффинность связывания биотина сохраняется, поскольку углеводы не необходимы для этой активности. Авидин имеет высокий pI, а NeutrAvidin имеет почти нейтральный pI (pH 6,3), что сводит к минимуму неспецифические взаимодействия с отрицательно заряженной поверхностью клетки или с ДНК/РНК. Нейтравидин все еще содержит остатки лизина , которые остаются доступными для дериватизации или конъюгации .

Как и сам авидин, НейтрАвидин представляет собой тетрамер с сильным сродством к биотину ( K _d = 10 ⁻¹⁵ М). В биохимических применениях стрептавидин , который также очень прочно связывается с биотином, может использоваться взаимозаменяемо с нейтравидином.

Авидин, иммобилизованный на твердых носителях, также используется в качестве среды для очистки для захвата меченных биотином белков или нуклеиновых кислот молекул . Например, белки клеточной поверхности можно специфически пометить мембранонепроницаемым биотиновым реагентом , а затем специфически захватить с помощью носителя NeutrAvidin.

Ссылки

• Байер, Эд: « Система авидин-биотин », кафедра биологической химии, Научный институт Вейцмана, Израиль.
• Ю. Хиллер, Дж. М. Гершони, Е. А. Байер, М. Вилчек (1987), «Связывание биотина с авидином. Боковая цепь олигосахарида не требуется для ассоциации лиганда», Biochemical Journal , vol. 248, нет. 1, стр. 167–171, doi : 10.1042/bj2480167 , PMC   1148514 , PMID   3435435 {{citation}}: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка )
• Эдвард А. Байер, Фабьен Де Местер, Тиква Кулик, Меир Вильчек (1995), «Получение дегликозилированного авидина яичного белка», Прикладная биохимия и биотехнология , том. 53, нет. 1, стр. 1–9, номер документа : 10.1007/BF02783477 , PMID   7625822. {{citation}}: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка )
• Ари Т. Марттила, Олли Х. Лайтинен, Кари Дж. Айренн, Тиква Кулик, Эдвард А. Байер, Меир Вилчек, Маркку С. Куломаа (2000), «Рекомбинантный нейтральный авидин: негликозилированный кислый мутант куриного авидина, который проявляет высокое сродство к биотину и низкие свойства неспецифического связывания», FEBS Letters , том. 467, нет. 1, стр. 31–36, Bibcode : 2000FEBSL.467...31M , doi : 10.1016/S0014-5793(00)01119-4 , PMID   10664451 {{citation}}: CS1 maint: несколько имен: список авторов ( ссылка )