Супер оптимальный бульон

Супер оптимальный бульон ( СОБ -среду ) -это питательная бактериальная среда, используемая для микробиологической культуры , как правило, эсшерихийской палочки . Этот богатый питательными веществами микробный бульон содержит пептиды , аминокислоты, растворимые в воде витамины и глюкозу в составе с низкой соли. Он был разработан Дугласом Ханаханом в 1983 году и является скорректированной версией обычно используемой среды LB ( лизогенный бульон ). Рост кишечной палочки в среде SOB или SOC приводит к более высокой трансформации эффективности плазмид . ^{[ 1 ]}^{[ 2 ]} Среда SOC также может быть использована для регенерации штаммов Klebsiella oxytoca для повышения эффективности трансформации.

Супер оптимальный бульон с катаболитной репрессией ( SOC ) рыдает с добавленной глюкозой . ^{[ 3 ]}

Композиция

(Цифры в скобках представляют собой массы, необходимые для создания 1 литра среды)

ПОД

2% w/v tryptone (20 g)
0,5% мас./В дрожжевой экстракт (5 г)
8,56 мм NaCl (0,5 г) или 10 мм NaCl (0,584 г)
2,5 мм KCL (0,186 г)
_DD H ₂ O до 1000 мл ^{[ 4 ]}
10 мм Mgcl ₂ (безводный: 0,952 г; гексагидрат: 2,033 г) и 10 мм Mgso ₄ (безводный: 1,204 г; гептагидрат: 2,465 г) ^{[ 2 ]}

Соц

В дополнение к содержимому СБ, SOC также содержит 20 мм глюкозы (3,603 г)

В качестве альтернативы, SOB и SOC можно сделать, добавив небольшие количества концентрированных растворов хлорида магния и глюкозы в предварительно подготовленную СОБ.

регулировка pH

Для максимальной эффективности SOB/SOC Media должен регулировать свой pH до 7,0 путем добавления концентрированного гидроксида натрия . ^{[ 3 ]} В первоначальной литературе говорится, что рН окончательной среды должен составлять от 6,8 до 7,0.

Стерилизация

Наконец, среду SOB должна быть автоклавирована при 121 ° C, чтобы обеспечить бесплодие . Компоненты среды SOC не должны быть автоклавированы вместе, потому что высокая температура может привести к тому, что глюкоза реагирует с триптическими пептидами (см. Реакцию Maillard ), ставя под угрозу качество. Растворы сдачих и магний и глюкозы могут быть автоклавированы отдельно, а потом смешаны с конечными концентрациями. Полный SOC может быть стерилизован фильтрованием через фильтр 0,22 мкм.

Ссылки

^ Ханахан Д. (1983). «Исследования по трансформации Escherichia coli с плазмидами». Журнал молекулярной биологии . 166 (4): 557–580. doi : 10.1016/s0022-2836 (83) 80284-8 . PMID 6345791 .
^ Jump up to: ^а ^{беременный} Soc Medium
^ Jump up to: ^а ^{беременный} http://www.protocol-online.org/biology-forums/posts/10626more1.html ^{[ мертвая ссылка ]}
^ Soc Medium

[1] Ханахан Д. (1983). «Исследования по трансформации Escherichia coli с плазмидами». Журнал молекулярной биологии . 166 (4): 557–580. doi : 10.1016/s0022-2836 (83) 80284-8 . PMID 6345791 .

[SA-2] Jump up to: ^а ^{беременный} Soc Medium

[protocol-online.org-3] Jump up to: ^а ^{беременный} http://www.protocol-online.org/biology-forums/posts/10626more1.html ^{[ мертвая ссылка ]}

[4] Soc Medium

[ 1 ]

[ 2 ]

[ 3 ]

[ 4 ]