✖


Jump to content

Циклин D/Cdk4

Edit links

Комплекс Cyclin D/Cdk4 представляет собой мультибелковую структуру, состоящую из белков Cyclin D и циклин-зависимой киназы 4, или Cdk4 , серин-треониновой киназы. Этот комплекс является одним из многих циклин/циклинзависимых киназных комплексов, которые являются «сердцем системы контроля клеточного цикла». [ 1 ] и управляют клеточным циклом и его развитием. Как следует из названия, циклин-зависимая киназа активна и способна фосфорилировать свои субстраты только тогда, когда она связана с соответствующим циклином. Комплекс Cyclin D/Cdk4 необходим для перехода клетки от фазы роста 1 к фазе синтеза клеточного цикла, для контрольной точки Start или G1/S .

Основной механизм

[ редактировать ]
Роль CDK4, циклина D, Rb и E2F в регуляции клеточного цикла.

В условиях неделения (когда клетка находится в фазе G0 клеточного цикла) белок ретинобластомы ( Rb ) связывается с транскрипционным фактором E2F . Во время перехода G0 в G1 фактор роста стимулирует синтез белка циклина D, [ 2 ] концентрация которого увеличивается до тех пор, пока не достигнет максимума в районе перехода G1/S.

На ранних и средних стадиях фазы G1 циклин D связывается с конститутивно экспрессируемым белком Cdk4, [ 3 ] который создает активированный комплекс CyclinD/Cdk4. После активации комплекс Cyclin D/Cdk4 стыкуется с C-концевой спиралью белка ретинобластомы (pRb), что приводится в действие сайтом узнавания C-концевой спирали циклина D. [ 4 ] При стыковке CyclinD/Cdk4 монофосфорилирует белок Rb, [ 5 ] который нарушает взаимодействие Rb/E2F и достаточен для инициации индукции E2F. [ 6 ] E2F транскрипционно активирует ряд нижестоящих генов-мишеней, необходимых на следующих стадиях клеточного цикла и репликации ДНК, путем связывания с их промоторными областями ДНК. Эти гены включают гены циклина E и A, а также другие гены, связанные с переходом G1/S.

Синтез циклина E и последующее связывание с конститутивно экспрессируемым Cdk2 приводит к всплеску активности комплекса циклин E/Cdk2, [ 7 ] который отвечает за гиперфосфорилирование Rb. [ 5 ] Гиперфосфорилирование Rb приводит к полной инактивации Rb и высвобождению E2F, запуская петлю положительной обратной связи между E2F и циклином E/Cdk2, которая стимулирует экспрессию генов перехода G1/S, управляемых E2F, и на определенном уровне активирует бистабильный переключатель. это приводит к необратимому переходу в S-фазу. [ 6 ] [ 7 ]

Регулирование

[ редактировать ]

В этом сигнальном пути имеется несколько точек регуляции. Прежде всего, в условиях отсутствия деления несколько белков могут ингибировать комплекс циклин D/Cdk4, связывая Cdk4 и ингибируя его ассоциацию с циклином D. В первую очередь это достигается с помощью p27 , но это также может быть сделано с помощью p16 и p21 . Однако этот путь стимулируется восходящим связыванием факторов роста (GF) либо изнутри самой клетки, либо из соседних клеток. Стимуляция факторами роста активирует любой из ряда белков рецепторной тирозинкиназы ( RTK ). Эти рецепторные тирозинкиназы, в свою очередь, фосфорилируют и активируют многие другие белки, включая Fos / Jun / Myc и фосфатидилинозитол-3-киназу ( PI-3-K ). Fos / Jun / Myc помогает активировать комплекс Cyclin D/Cdk4. Фосфатидилинозитол-3-киназа фосфорилирует p27 (или p16, или p21) и SCF / Skp1 . Фосфорилирование p27 ингибирует способность p27 связывать Cdk4, тем самым освобождая Cdk4 для связи с циклином D и образования активного комплекса. SCF /Skp1 (ан E3-убиквитин-лигаза ) помогает дополнительно ингибировать p27 и, таким образом, дополнительно активировать комплекс Cyclin D/Cdk4. Кроме того, р27 действует как ингибитор циклина Е и циклина А. Таким образом, его ингибирование также способствует активации последующих митотических процессов, как отмечалось выше.

Существуют и другие периферические регуляторы комплекса Cyclin D/Cdk4. В мегакариоцитах он регулируется GATA-1 транскрипционным фактором . [ 8 ] GATA-1 служит активирующим фактором транскрипции циклина D и, возможно, также репрессором ингибитора циклина D, p16. Cdk4 также требует активации при сборке комплекса с циклином D. Это достигается с помощью киназы, активирующей Cdk ( CAK ), которая фосфорилирует Cdk4 по треонину 172. [ 9 ]

Рак

[ редактировать ]

Нарушения в оси CyclinD/Cdk4 при раке

Функция комплекса Cyclin D/Cdk4 предполагает очевидную связь с раком и онкогенезом. Фактически, нарушения в оси циклин D/Cdk4, которые приводят к увеличению активности циклина D/Cdk4, были обнаружены при многих видах рака. Существует ряд причин этих сбоев.

  • Во-первых, опухоли могут сверхэкспрессировать циклин D1, как это было обнаружено при раке молочной железы и поджелудочной железы. [ 10 ] [ 11 ]
  • Во-вторых, опухоли могут иметь мутации или амплификации белка Cdk4, как это было обнаружено при меланоме и плоскоклеточном раке головы и шеи. [ 12 ] [ 13 ]
  • В-третьих, в опухолях может наблюдаться снижение или полная потеря негативных регуляторов Cyclin D/Cdk4 либо в результате мутации, делеции, либо в результате подавления ингибиторов. Гомозиготные делеции в p16, ингибиторе Cdk4 семейства INK4, были обнаружены более чем в 50% глиом, а мутации в p16 были обнаружены при многих типах рака, включая семейные меланомы; лимфомы; и рак пищевода, поджелудочной железы и немелкоклеточный рак легких. [ 14 ] Снижение экспрессии p27, ингибитора семейства CIP/KIP, было обнаружено при ряде видов рака толстой кишки, молочной железы, простаты, печени, легких, мочевого пузыря, яичников и желудка; это показатель худшего прогноза при этих видах рака. [ 15 ]
  • В-четвертых, опухоли могут подавлять активность микроРНК, нацеленных на Cdk4, как это было обнаружено при раке мочевого пузыря. [ 16 ]
  • Наконец, в опухолях может наблюдаться нарушение регуляции вышестоящих онкогенных сигнальных путей, таких как путь фосфатидилинозитол-3-киназы (P13K), митоген-активируемой протеинкиназы (MAPK), ядерного фактора, усилителя каппа-легкой цепи активированных B-клеток (NF-). κB) путь и сигнальные пути стероидных гормонов, которые способствуют активности CyclinD/Cdk4.

Нарушение оси Cyclin D/Cdk4 посредством любого из этих трех механизмов вызывает фосфорилирование Rb, транскрипцию генов, управляемых E2F, неконтролируемое продвижение через контрольную точку G1/S и, в конечном итоге, рост раковых клеток. [ 17 ]


Селективные ингибиторы Cdk4/6

Учитывая роль циклина D/Cdk4 в прогрессировании рака, в последние годы возрос интерес к разработке селективных ингибиторов Cdk4/6. В настоящее время три ингибитора Cdk4/6 одобрены или находятся на поздней стадии разработки: палбоциклиб, рибоциклиб и абемациклиб. Все три из этих ингибиторов являются АТФ-конкурентными препаратами для перорального применения. [ 17 ]

На данный момент селективные ингибиторы Cdk4/6 показали себя наиболее многообещающими при использовании в сочетании с другими антиэстрогенными препаратами для лечения распространенного рака молочной железы, положительного по гормональным рецепторам (HR+). При HR+ раке молочной железы клетки сохраняют экспрессию Rb дикого типа и сверхэкспрессируют циклин D1.

  • Результаты недавнего клинического исследования III стадии исследования MONALEESA-2 показали, что рибоциклиб в сочетании с нестероидным ингибитором ароматазы летрозолом увеличивает медиану общей выживаемости на 12,5 месяцев у пациентов с HR+, отрицательными по рецептору 2 эпидермального фактора роста человека (HER2) в постменопаузе, по сравнению с ними. к лечению только летрозолом. [ 18 ]
  • Результаты исследования PALOMA-2 показали, что лечение палбоциклибом и летрозолом увеличивает выживаемость без прогрессирования на 10,3 месяца по сравнению с лечением только летрозолом у пациентов с ранее не получавшим лечения HR+-положительным и HER2-негативным раком молочной железы. [ 19 ]
  • Результаты исследования MONARCH-3 показали, что лечение абемациклибом в сочетании с летрозолом или анастрозолом увеличивает медиану выживаемости без прогрессирования на 13,42 месяца у пациенток в постменопаузе с нелеченым HR+, HER2-негативным раком молочной железы. [ 20 ]

Дополнительные исследования эффективности этих комбинированных методов лечения рака молочной железы в различных условиях продолжаются. На основании обнадеживающих результатов клинических испытаний также проводятся дополнительные исследования по изучению влияния трех селективных ингибиторов Cdk4/6 на другие новообразования, такие как немелкоклеточный рак легких. [ 17 ] [ 21 ] Следует отметить, что некоторые пациенты в доклинических и клинических условиях не ответили на ингибиторы Cdk4/6 или стали к ним резистентными. Исследования механизмов, лежащих в основе этих клинических результатов, все еще продолжаются.

Неканонические роли CyclinD/Cdk4

[ редактировать ]

Помимо своей канонической роли в содействии прохождению клеточного цикла, CyclinD/Cdk4 также играет роль в регуляции дифференцировки и метаболизма клеток в различных контекстах.

Дифференциация клеток

Rb может способствовать дифференцировке клеточного цикла путем взаимодействия с множеством различных транскрипционных факторов, специфичных для конкретного типа клеток. Эти факторы транскрипции включают MyoD и MEF2, которые регулируют дифференцировку мышечных клеток, и RUNX2, который регулирует дифференцировку остеобластов. [ 22 ] Когда CyclinD/Cdk4 фосфорилирует и инактивирует Rb, роль Rb в управлении дифференцировкой клеток посредством взаимодействия с этими факторами транскрипции ингибируется. Активность циклина D/Cdk4 также может напрямую блокировать ассоциацию MEF2 с GRIP-1, коактиватором транскрипции, который ингибирует способность MEF2 индуцировать экспрессию мышечных генов и последующую дифференцировку. [ 22 ] [ 23 ]

Активность циклина D/Cdk4 также может регулировать дифференцировку клеток Rb-независимыми путями. Например, было показано, что активность CyclinD/Cdk4 фосфорилирует фактор транскрипции GATA4 , который направляет его на деградацию и ингибирует дифференцировку кардиомиоцитов. [ 24 ] Кроме того, считается, что активность Cyclin D/Cdk4 блокирует нейрогенез в нервных стволовых клетках и способствует экспансии базальных предшественников. [ 25 ]

Метаболизм

Глюконеогенез в печени имеет решающее значение для выживания во время голодания и голодания. Было показано, что активность CyclinD1/Cdk4 играет роль в регуляции гомеостаза глюкозы путем подавления печеночного глюконеогенеза посредством индуцированного фосфорилированием ингибирования коактиватора-1α рецептора, активируемого пролифератором пероксисомы (PGC1α). (PGC1α) представляет собой коактиватор транскрипции, который управляет программированием экспрессии генов глюконеогенеза в печени. [ 26 ] Дополнительные исследования показали, что путь CyclinD/Cdk4/Rb/ER2F также влияет на экспрессию Kir6.2, субъединицы АТФ-чувствительного K-канала, который регулирует секрецию инсулина, индуцированную глюкозой. Когда комплекс CyclinD/Cdk4 ингибируется, экспрессия Kir6.2 подавляется, а при тестировании на мышиных моделях наблюдается нарушение секреции инсулина и непереносимость глюкозы. [ 27 ] Учитывая, что гомеостаз глюкозы при диабете нарушается, существует постоянный интерес к тому, может ли комплекс CyclinD/Cdk4 стать потенциальной мишенью для лечения заболевания.

См. также

[ редактировать ]

Ссылки

[ редактировать ]
  1. ^ Морган, Дэвид. Управление клеточным циклом: Введение .
  2. ^ Шерр, CJ; Робертс, Дж. М. (15 мая 1995 г.). «Ингибиторы циклинзависимых киназ G1 млекопитающих» . Гены и развитие . 9 (10): 1149–1163. дои : 10.1101/gad.9.10.1149 . ISSN   0890-9369 . ПМИД   7758941 .
  3. ^ Гупта, Ашна; Дагар, Гунджан; Чаухан, Рави; Садида, Хана К.; и др. (2023). «Циклин-зависимые киназы при раке: роль, регуляция и терапевтическое нацеливание». Достижения в области химии белков и структурной биологии . Том. 135. Эльзевир. стр. 21–55. дои : 10.1016/bs.apcsb.2023.02.001 . ISBN  978-0-443-15822-3 . ПМИД   37061333 .
  4. ^ Топасио, Бенджамин Р.; Затуловский, Евгений; Кристя, Сандра; Се, Шиконг; и др. (2019). «Циклин D-Cdk4,6 стимулирует развитие клеточного цикла через С-концевую спираль белка ретинобластомы» . Молекулярная клетка . 74 (4): 758–770.е4. doi : 10.1016/j.molcel.2019.03.020 . ПМК   6800134 . ПМИД   30982746 .
  5. ^ Jump up to: а б Нарасимха, Анил М; Каулич, Мануэль; Шапиро, Гэри С; Чхве, Юн Дж; и др. (04.06.2014). «Циклин D активирует опухолевый супрессор Rb путем монофосфорилирования» . электронная жизнь . 3 . doi : 10.7554/eLife.02872 . ISSN   2050-084X . ПМК   4076869 . ПМИД   24876129 .
  6. ^ Jump up to: а б Ким, Сонсу; Леонг, Алессандра; Ким, Мина; Ян, Хи Вон (07 октября 2022 г.). «CDK4/6 инициирует инактивацию Rb, а активность CDK2 координирует выполнение клеточного цикла и переход G1/S» . Научные отчеты . 12 (1): 16810. Бибкод : 2022NatSR..1216810K . дои : 10.1038/s41598-022-20769-5 . ISSN   2045-2322 . ПМЦ   9546874 . ПМИД   36207346 .
  7. ^ Jump up to: а б Моррис, Лорна; Аллен, К. Элизабет; Ла Танг, Николас Б. (2000). «Регуляция транскрипции E2F с помощью киназы циклин E – Cdk2, опосредованной коактиваторами p300/CBP». Природная клеточная биология . 2 (4): 232–239. дои : 10.1038/35008660 . ISSN   1465-7392 . ПМИД   10783242 .
  8. ^ Мунтян, Эндрю Г.; Панг, Лиян; Понц, Мортимер; Дауди, Стивен Ф.; и др. (15 июня 2007 г.). «Циклин D–Cdk4 регулируется GATA-1 и необходим для роста и полиплоидизации мегакариоцитов» . Кровь . 109 (12): 5199–5207. doi : 10.1182/blood-2006-11-059378 . ISSN   0006-4971 . ПМК   1890844 . ПМИД   17317855 .
  9. ^ Като, JY; Мацуока, М; Стром, ДК; Шерр, CJ (1994). «Регуляция циклин D-зависимой киназы 4 (cdk4) с помощью киназы, активирующей cdk4» . Молекулярная и клеточная биология . 14 (4): 2713–2721. дои : 10.1128/MCB.14.4.2713 . ISSN   0270-7306 . ПМЦ   358637 . ПМИД   8139570 .
  10. ^ Финн, Ричард С.; Алешин, Алексей; Слэмон, Деннис Дж. (2016). «Нацеливание на циклин-зависимые киназы (CDK) 4/6 при раке молочной железы, положительном по рецепторам эстрогена» . Исследование рака молочной железы . 18 (1): 17. дои : 10.1186/s13058-015-0661-5 . ISSN   1465-542X . ПМЦ   4746893 . ПМИД   26857361 .
  11. ^ Гансоге, Сюзанна; Гансоге, Фрэнк; Рамадани, Марко; Стоббе, Хайке; и др. (1 мая 1997 г.). «Сверхэкспрессия циклина D1 при карциноме поджелудочной железы человека связана с плохим прогнозом» . Исследования рака . 57 (9). Американская ассоциация исследований рака: 1634–1637. ISSN   0008-5472 . ПМИД   9134998 .
  12. ^ Сабир, Маймуна; Байг, Рукия Мехмуд; Махджабин, Ишрат; Каяни, Махмуд Ахтар (2012). «Новые мутации CDK4 зародышевой линии у пациентов с раком головы и шеи» . Наследственный рак в клинической практике . 10 (1): 11. дои : 10.1186/1897-4287-10-11 . ISSN   1897-4287 . ПМЦ   3488972 . ПМИД   22932448 .
  13. ^ Пунтерволл, Ханне Экнес; Ян, Сяохун Р; Ветти, Хильдегунн Хёберг; Бахманн, Ингеборг М; и др. (2013). «Семьи, склонные к меланоме с мутацией зародышевой линии CDK4: фенотипический профиль и ассоциации с вариантами MC1R» . Журнал медицинской генетики . 50 (4): 264–270. doi : 10.1136/jmedgenet-2012-101455 . ISSN   0022-2593 . ПМК   3607098 . ПМИД   23384855 .
  14. ^ Мэн, Раймонд Д.; Эль-Дейри, Вафик С. (2002). «Генная терапия рака с использованием генов-супрессоров опухолей, участвующих в контроле клеточного цикла». Генная терапия рака . Эльзевир. стр. 279–297. дои : 10.1016/b978-012437551-2/50018-5 . ISBN  978-0-12-437551-2 .
  15. ^ Молаторе, Сара; Пеллегата, Наталья С. (2010). «Синдром MENX и p27: связь с множественной эндокринной неоплазией». Прогресс в исследованиях мозга . Том. 182. Эльзевир. стр. 295–320. дои : 10.1016/s0079-6123(10)82013-8 . ISBN  978-0-444-53616-7 . ПМИД   20541671 .
  16. ^ Линь, Ивэй; Ву, Цзянь; Чен, Хун; Мао, Ецин; и др. (17 февраля 2012 г.). «Циклин-зависимая киназа 4 является новой мишенью для остановки клеточного цикла, опосредованной микроРНК-195, в клетках рака мочевого пузыря». Письма ФЭБС . 586 (4): 442–447. Бибкод : 2012FEBSL.586..442L . дои : 10.1016/j.febslet.2012.01.027 . ISSN   0014-5793 . ПМИД   22289176 .
  17. ^ Jump up to: а б с Гамильтон, Эрика; Инфанте, Джеффри Р. (2016). «Нацеливание на CDK4/6 у больных раком» . Обзоры лечения рака . 45 : 129–138. дои : 10.1016/j.ctrv.2016.03.002 . ПМИД   27017286 .
  18. ^ Хортобадьи, Габриэль Н.; Голоса, Соломон М.; Беррис, Ховард А.; Да, Юн-Сим; и др. (10 марта 2022 г.). «Общая выживаемость при применении рибоциклиба плюс летрозола при распространенном раке молочной железы» (PDF) . Медицинский журнал Новой Англии . 386 (10): 942–950. дои : 10.1056/NEJMoa2114663 . ISSN   1533-4406 . ПМИД   35263519 .
  19. ^ Финн, Ричард С.; Мартин, Майкл; Руго, Хоуп С.; Джонс, Стивен; Я, Сок-А; Гельмон, Карен; Харбек, Надя; Липатов Олег Н.; Уолш, Дженис М.; Молдер, Стейси; Готье, Эрик; Лу, Донгруй Р.; Рэндольф, София; Диерас, Вероника; Слэмон, Деннис Дж. (17 ноября 2016 г.). «Палбоциклиб и летрозол при распространенном раке молочной железы» . Медицинский журнал Новой Англии . 375 (20): 1925–1936. дои : 10.1056/NEJMoa1607303 . ISSN   0028-4793 . ПМИД   27959613 .
  20. ^ Джонстон, Стивен; Мартин, Мигель; Ди Лео, Анджело; Я, Сок-А; Авада, Ахмад; Форрестер, Тэмми; Френцель, Мартин; Хардебек, Молли С.; Кокс, Джоан; Баррига, Сусана; Той, Масакадзу; Ивата, Хиродзи; Гетц, Мэтью П. (17 января 2019 г.). «Окончательный PFS MONARCH 3: рандомизированное исследование абемациклиба в качестве начальной терапии распространенного рака молочной железы» . НПЖ Рак молочной железы . 5 (1): 5. doi : 10.1038/s41523-018-0097-z . ISSN   2374-4677 . ПМК   6336880 . ПМИД   30675515 .
  21. ^ Рампиони Винчигерра, Джан Лука; Сонего, Маура; Сегатто, Иления; Далл'Аква, Алессандра; Веккьоне, Андреа; Бальдасарре, Густаво; Беллетти, Барбара (27 мая 2022 г.). «Ингибиторы CDK4/6 в комбинированной терапии: лучше в компании, чем по отдельности: мини-обзор» . Границы онкологии . 12 . дои : 10.3389/fonc.2022.891580 . ISSN   2234-943X . ПМЦ   9197541 . ПМИД   35712501 .
  22. ^ Jump up to: а б Гидбринг, Пер; Малумбрес, Маркос; Сичинский, Петр (2016). «Неканонические функции циклинов клеточного цикла и циклин-зависимых киназ» . Nature Reviews Молекулярно-клеточная биология . 17 (5): 280–292. дои : 10.1038/номер.2016.27 . ISSN   1471-0072 . ПМЦ   4841706 . ПМИД   27033256 .
  23. ^ Лазаро, Жан-Бернар; Бейли, Питер Дж.; Лассар, Эндрю Б. (15 июля 2002 г.). «Активность циклина D–cdk4 модулирует субъядерную локализацию и взаимодействие MEF2 с коактиваторами семейства SRC во время дифференцировки скелетных мышц» . Гены и развитие . 16 (14): 1792–1805. дои : 10.1101/gad.U-9988R . ISSN   0890-9369 . ЧВК   186397 . ПМИД   12130539 .
  24. ^ Накадзима, Кунико; Инагава, Масайо; Учида, Тихару; Окада, Кумико; и др. (01.05.2011). «Координированная регуляция дифференцировки и пролиферации эмбриональных кардиомиоцитов с помощью пути jumonji (Jarid2)-циклин D1». Развитие 138 (9). Компания биологов: 1771–1782. дои : 10.1242/dev.059295 . ISSN   1477-9129 . ПМИД   21447557 .
  25. ^ Ланге, Кристиан; Хаттнер, Виланд Б.; Калегари, Федерико (2009). «Сверхэкспрессия Cdk4/CyclinD1 в нервных стволовых клетках укорачивает G1, задерживает нейрогенез и способствует генерации и расширению базальных предшественников» . Клеточная стволовая клетка . 5 (3): 320–331. дои : 10.1016/j.stem.2009.05.026 . ПМИД   19733543 .
  26. ^ Бхалла, Кавита; Лю, Ван-Джу; Томпсон, Кейта; Андерс, Ларс; и др. (01.10.2014). «Циклин D1 подавляет глюконеогенез посредством ингибирования транскрипционного коактиватора PGC1α» . Диабет 63 (10): 3266–3278. дои : 10.2337/db13-1283 . ISSN   0012-1797 . ПМЦ   4392904 . ПМИД   24947365 .
  27. ^ Анникотт, Жан-Себастьян; Бланше, Эмили; Чави, Карин; Янкова, Ирена; и др. (13 июля 2009 г.). «Путь CDK4–pRB–E2F1 контролирует секрецию инсулина» . Природная клеточная биология . 11 (8). ООО «Спрингер Сайенс энд Бизнес Медиа»: 1017–1023. дои : 10.1038/ncb1915 . ISSN   1465-7392 . ПМЦ   2824657 . ПМИД   19597485 .
Retrieved from "https://en.wikipedia.org/w/index.php?title=Cyclin_D/Cdk4&oldid=1222467041"
Arc.Ask3.Ru: конец переведенного документа.
Arc.Ask3.Ru
Номер скриншота №: cf4aef59d947c5bb05216fbadf6ccefc__1714956180
URL1:https://arc.ask3.ru/arc/aa/cf/fc/cf4aef59d947c5bb05216fbadf6ccefc.html
Заголовок, (Title) документа по адресу, URL1:
Cyclin D/Cdk4 - Wikipedia
Данный printscreen веб страницы (снимок веб страницы, скриншот веб страницы), визуально-программная копия документа расположенного по адресу URL1 и сохраненная в файл, имеет: квалифицированную, усовершенствованную (подтверждены: метки времени, валидность сертификата), открепленную ЭЦП (приложена к данному файлу), что может быть использовано для подтверждения содержания и факта существования документа в этот момент времени. Права на данный скриншот принадлежат администрации Ask3.ru, использование в качестве доказательства только с письменного разрешения правообладателя скриншота. Администрация Ask3.ru не несет ответственности за информацию размещенную на данном скриншоте. Права на прочие зарегистрированные элементы любого права, изображенные на снимках принадлежат их владельцам. Качество перевода предоставляется как есть. Любые претензии, иски не могут быть предъявлены. Если вы не согласны с любым пунктом перечисленным выше, вы не можете использовать данный сайт и информация размещенную на нем (сайте/странице), немедленно покиньте данный сайт. В случае нарушения любого пункта перечисленного выше, штраф 55! (Пятьдесят пять факториал, Денежную единицу (имеющую самостоятельную стоимость) можете выбрать самостоятельно, выплаичвается товарами в течение 7 дней с момента нарушения.)