Ветер

MAFA (антиген, связанный с функцией тучных клеток), представляет собой мембранный мембранный мембранный тип II , сначала идентифицированный на поверхности тучных клеток слизистой оболочки крысы линии RBL-2H3 . Совсем недавно были обнаружены гомологи MAFA человека и мыши, но также экспрессируются NK и T-клетками . ^{[ 1 ]} MAFA тесно связана с рецепторами FCɛ типа 1 не только в тучных клетках слизистой оболочки людей и мышей, но и в серобальных тучных клетках этих же организмов. ^{[ 2 ]}

Он обладает способностью функционировать как канал для ионов кальция, а также взаимодействие с другими рецепторами для ингибирования определенных клеточных процессов. ИТ -функция основана на своей специализированной структуре, которая содержит множество специализированных мотивов и последовательностей, которые позволяют его функциям иметь место. ^{[ 3 ]}

Открытие

Экспериментальное открытие

Мафа была первоначально обнаружена Энрике Ортегой и Израилем Пехтом в 1988 году при изучении рецепторов FCɛ типа 1 (FCɛri) и неизвестного CA ²⁺ каналы , которые позволили этим рецепторам работать в клеточной мембране. Ортега и Пехт экспериментировали с использованием ряда моноклональных антител на линии RBL -2H3 тучных клеток крысы. При экспериментировании и попытке найти специфическое антитело, которое поднимает ответ, было показано, что моноклональное антитело G63 поднимает ответ, ингибируя клеточные выделения, связанные с рецепторами FCɛRI в этих тучных клетках слизистой оболочки крысы. Антитело G63, прикрепленное к специфическому мембранному белке рецептора, которое вызвало возникающий процесс ингибирования. В частности, ингибирование происходило с помощью антитела G63 и гликопротеина сшивания , так что процессы образования медиатора воспаления, потребление CA2+ в клетку и гидролиз фосфатидилинозитидов были остановлены. Это вызвало биохимическое ингибирование нормального ответа FCɛRI. Идентифицированный рецепторный белок затем выделяли и изучали, где было обнаружено, что при сшивании белок фактически имел конформационные изменения, которые локализовали рецепторы FCɛRI. Основываясь на этих результатах, и Ortega, и Pecht назвали этот недавно обнаруженный белковый тучный антиген, связанный с функцией белков, в течение короткого времени. ^{[ 2 ]}

Структура и кодирование

Белковая структура

Общая структура

Говорят, что MAFA является мембранным гликопротеином типа II, что означает, что его N-конец столкнется с цитозолом, в то время как его C-конец столкнется с внеклеточной средой. Белок составляет 188 аминокислот в длину и имеет как гидрофобные , так и гидрофильные области в этих аминокислотах. Белок мафа весит от 28 до 40 килодальтов и может существовать как мономер или гомодимер у различных видов, как видно из результатов SDS-PAGE , которые показывают две широкие полосы на основе этих двух форм. ^{[ 2 ]} Последовательность полипептидов ядра Mafa весом около 19 килодальтов, однако большое количество веса поступает от N-связанных олигосахаридов , которые прикрепляются к белке. Это тяжелое гликозилирование является распространенным явлением среди мембранных гликопротеинов типа II и является ключевой частью как их структуры, так и функции. Изменение уровней гликозилирования помогает играть важную роль в свойствах белков мафа, поэтому белок должен быть должным образом изготовлен и модифицирован, чтобы иметь полную функциональность. ^{[ 4 ]}

CRD регион

С-конец мафы содержит 114 аминокислот и имеет отдельную область, называемую доменом распознавания углеводов , или CRD в течение короткого времени. Эта область, как подразумевается в названии, заключается в том, где распознаются различные углеводы и сигнальные молекулы и прикрепляются к белке. Этот CRD присутствует во многих других гликопротеинах, присутствующих у эукариот на более высоком уровне. CRD отличается консервативной 15 аминокислотной последовательности, которая включает в себя следующее количество аминокислот: два остатка глицина, два остатка лейцина, пять остатков триптофана и шесть остатков цистеина. Эти остатки помогают формировать различные мотивы благодаря их взаимодействиям, включая мотивы как WIGL, так и CYYF. ^{[ 4 ]}

Внутриклеточный домен

Наряду со специализированными последовательностями как на n -конце, так и на Cerminus, внутриклеточный домен этого белка содержит специализированную последовательность, называемую последовательность Siystl, где название является единой аминокислотной аббревиатуры его остатков. ^{[ 5 ]} Все аминокислоты в этой последовательности носят полярный характер и считаются частью ингибирующего мотива на основе тирозина иммунорецептора (ITM) . Этот ITIM позволяет белке рецептора MAFA не только считаться гликопротеином II типа, но также классифицируется как ингибирующий рецептор. ^{[ 5 ]}

Генетическое кодирование

Транскрипционное и трансляционное кодирование

Как и в случае с другими белками, MAFA подвергается транскрипции с последующей трансляцией и посттрансляционными модификациями в ER и Golgi. Геномная кодирующая область этого белка состоит из 13 килобайт генетической информации с пятью экзонами , которые разделены на четыре интрона в гене. Из этих пяти экзонов три используются, чтобы помочь кодировать область CRD, которая была упомянута ранее. Этот ген также регулируется через промоторную область вверх по течению , которая находится на 664 балках от первого нуклеотида белка. Как и другие белки, ген копируется в нескольких отправных точках и собирается в транскрипт мРНК . ^{[ 6 ]}

Альтернативный сплайсинг

После того, как код был транскрибирован в мРНК, было также обнаружено, что нить мафа подвергалась альтернативному сплайсингу , которая позволила перевести различные формы белка мафа и привести ко многим ранее обсуждаемым вариациям. Одна форма этого кода удаляет трансмембранную часть белка MAFA и вызывает изготовление растворимой версии, будучи уникальным для этого белка и позволяет ученым применить эту альтернативную идею сплайсинга для других трансмембранных белков тучных клеток. ^{[ 4 ]} После перевода белок входит в надлежащие клеточные пути от ER в Гольджи и, в конечном итоге, клеточную мембрану, где он интегрируется и начинает свою функциональность.

Функция

Функциональность канала

Как обнаружили Ортега и Пехт, одной из основных функций MAFA является функционирование как CA ²⁺ канал, как видно в их эксперименте с ингибированием CA ²⁺ Когда антитело G63 было связано с области рецептора MAFA. Кроме того, как видно из того факта, что это мембранный гликопротеин типа II, и его способность изменять конформацию, чтобы позволить различному количеству кальция войти в клетку, MAFA также функционирует как молекула рецептора и может ингибировать различные процессы в мачте. Полем В частности, это ингибирование частично связано с мотивом SIYSTL на С-конце белка, который находится в внеклеточном матриксе. Этот мотив плотный с остатками тирозина, некоторые из которых фосфорилированы. Фосфорилирование этих остатков играет основную роль в том, чтобы позволить мафе ингибировать различные биохимические процессы. ^{[ 4 ]}

Кластеризация

Fcɛri

Белок мафа также сильно взаимодействует с рецепторами FCɛRI посредством образования агрегатов и липидных рафей в клеточной мембране. Сформируя эти совокупные структуры, конформация MAFA изменяется таким образом, чтобы она мог полностью взаимодействовать с рецепторами FCɛRI и, следовательно, не может связываться с моноклональными антителами G63 и ингибируется от диффузии через его мембрану. Наряду с ингибированием функции MAFA, рецептор FCɛRI также ингибируется, что означает, что даже если стимул был связан с его рецептором, FCɛRI не вызовет гидролиз фосфатидилинозитидов, как это обычно делает. ^{[ 3 ]} Следовательно, образуя эти большие кластеры, как функция рецепторов MAFA, так и FCɛRI ингибируется и может привести к дальнейшему ингибированию процессов передачи сигналов клеток в клетке. Даже когда мафа не индуцируется в значительной степени взаимодействовать с FCɛri, мембрана тучных клеток обладает естественным взаимодействием между этими двумя рецепторами, которые вызывают небольшие количества комплексов Mafa-Fcɛri, которые можно найти без больших изменений ни в одном из их функций. ^{[ 6 ]} Конкретный механизм, с помощью которого мафа и FCɛri взаимодействуют и заполните еще предстоит обнаружить. ^{[ 4 ]}

Клеточный цикл

Наряду с взаимодействием с другими белками, MAFA может образовывать агрегаты, состоящие только из себя, которые индуцируются либо моноклональным антителом G63, которое было вовлечено в его обнаружение, либо частями связывания антитела F (AB ') 2 с его внеклеточным комплексом Полем Сформировав эти группы MAFA, было обнаружено, что он вызывает ингибирование процессов клеточного цикла и предотвращает митоз или репликацию ДНК . возникающие ^{[ 5 ]} В частности, это образование вызывает увеличение фосфорилирования тирозина различных циклинов и белков, участвующих в клеточном цикле. Два основных белка, которые фосфорилируются, являются p62 ^ПОКА и корабельный корабель фосфатазы инозитол, и это вызывает дальнейшее изменение нижестоящих процессов, в которых участвуют эти белки. Для p62 ^ПОКАПроцесс фосфорилирования заставляет его иметь повышенное связывание с RASGAP , которое функционирует, чтобы ингибировать функцию белка RAS, принимая на себя происходящую активность GTPase, и GDP, который ингибирует функциональность Ras. Имея ингибирование Ras, также останавливается дальнейшее продвижение транскрипции ДНК, которое включает в себя некоторые белки клеточного цикла. ^{[ 5 ]} Для корабли в области фосфатазы инозитол фосфорилирование вызвало увеличение количества связывания с SHC , которое, как правило, связывается с SOS1 во время цикла клеток. SOS1 и Ship оба связываются с SHC конкурентоспособно, и, имея повышенную аффинность к SHC во время фосфорилирования, связывание SOS1 значительно снижается. Эта связь предполагает, что снижение связывания SOS1 также связано с остановкой клеточного цикла, хотя механизм, с помощью которого происходит это ингибирование, не был обнаружен. ^{[ 5 ]}

Альтернативные формы

MAFA также может существовать в нескольких формах из -за альтернативного сплайсинга и одной из этих форм в растворимой версии белка, где его трансмембранная часть не была переведена и модифицирована. Эта форма мафы может диффундировать из клеточной мембраны и во внеклеточный матрикс, не будучи деградированием или разбитыми лизосомами, что означает, что она выполняет функцию в клетках человека. Степень гликозилирования наряду со специфической функцией этих белков еще предстоит обнаружена, но предполагается, что они играют важную роль в содействии поддержанию уровней кальция наряду с ограничением образования медиаторов воспаления в этих тучных клетках. ^{[ 1 ]} Многое об этих альтернативных формах еще предстоит открыть.

Ссылки

^ Подпрыгнуть до: ^а ^{беременный} Абрамсон; Джакуб Абрамсон; Ронг Сюй; Израиль Пехт (сентябрь 2002 г.). "Мафа" Молекулярная иммунология 38 (16–18): 1307–1 doi : /s 10.1016 PMID 12217400 .
^ Подпрыгнуть до: ^а ^{беременный} ^в Ortega E, Schneider H, Pecht I. Возможные взаимодействия между рецептором Epsilon FC и новым антигеном, связанным с функцией тучных клеток. Int Immunol. 1991 апрель; 3 (4): 333-42. doi: 10.1093/intimm/3.4.333. PMID 1831652.
^ Подпрыгнуть до: ^а ^{беременный} Bocek P JR, Guthmann MD, Pecht I. Анализ генов, кодирующих антиген, связанный с функцией тучных клеток, и его альтернативно сплайсированные транскрипты. J Immunol. 1997 апрель 1; 158 (7): 3235-43. PMID 9120279.
^ Подпрыгнуть до: ^а ^{беременный} ^в ^{дюймовый} ^и Сюй Р., Пехт И. Антиген, связанный с функцией тучных клеток, новый член семейства ИТИМ. Curr Top Microbiol Immunol. 1999; 244: 159-68. doi: 10.1007/978-3-642-58537-1_14. PMID 10453658.
^ Подпрыгнуть до: ^а ^{беременный} ^в ^{дюймовый} ^и Abramson J, Pecht I. Кластеризация связанных с функцией тучных клеток антигена (MAFA) приводит к фосфорилированию тирозина p62dok и суда и влияет на клеточный цикл RBL-2H3. Иммунол Летт. 2002 июня 3; 82 (1-2): 23-8. doi: 10.1016/s0165-2478 (02) 00013-5. PMID 12008030.
^ Подпрыгнуть до: ^а ^{беременный} Песня, Джинминг; Хаген, парень; Смит, Стивен М.Л.; Росс, Дебора А.; Печт, Израиль; Барисас, Б. Джордж (2002). «Взаимодействие антигена, связанного с функцией тучных клеток, с рецептором Fcepsilon типа I» . Молекулярная иммунология . 38 (16–18): 1315–1321. doi : 10.1016/s0161-5890 (02) 00081-0 . ISSN 0161-5890 . PMID 12217401 .

[NAME2-1] Подпрыгнуть до: ^а ^{беременный} Абрамсон; Джакуб Абрамсон; Ронг Сюй; Израиль Пехт (сентябрь 2002 г.). "Мафа" Молекулярная иммунология 38 (16–18): 1307–1 doi : /s 10.1016 PMID 12217400 .

[:0-2] Подпрыгнуть до: ^а ^{беременный} ^в Ortega E, Schneider H, Pecht I. Возможные взаимодействия между рецептором Epsilon FC и новым антигеном, связанным с функцией тучных клеток. Int Immunol. 1991 апрель; 3 (4): 333-42. doi: 10.1093/intimm/3.4.333. PMID 1831652.

[:2-3] Подпрыгнуть до: ^а ^{беременный} Bocek P JR, Guthmann MD, Pecht I. Анализ генов, кодирующих антиген, связанный с функцией тучных клеток, и его альтернативно сплайсированные транскрипты. J Immunol. 1997 апрель 1; 158 (7): 3235-43. PMID 9120279.

[:1-4] Подпрыгнуть до: ^а ^{беременный} ^в ^{дюймовый} ^и Сюй Р., Пехт И. Антиген, связанный с функцией тучных клеток, новый член семейства ИТИМ. Curr Top Microbiol Immunol. 1999; 244: 159-68. doi: 10.1007/978-3-642-58537-1_14. PMID 10453658.

[:3-5] Подпрыгнуть до: ^а ^{беременный} ^в ^{дюймовый} ^и Abramson J, Pecht I. Кластеризация связанных с функцией тучных клеток антигена (MAFA) приводит к фосфорилированию тирозина p62dok и суда и влияет на клеточный цикл RBL-2H3. Иммунол Летт. 2002 июня 3; 82 (1-2): 23-8. doi: 10.1016/s0165-2478 (02) 00013-5. PMID 12008030.

[:4-6] Подпрыгнуть до: ^а ^{беременный} Песня, Джинминг; Хаген, парень; Смит, Стивен М.Л.; Росс, Дебора А.; Печт, Израиль; Барисас, Б. Джордж (2002). «Взаимодействие антигена, связанного с функцией тучных клеток, с рецептором Fcepsilon типа I» . Молекулярная иммунология . 38 (16–18): 1315–1321. doi : 10.1016/s0161-5890 (02) 00081-0 . ISSN 0161-5890 . PMID 12217401 .

[ 1 ]

[ 2 ]

[ 3 ]

[ 4 ]

[ 5 ]

[ 6 ]