МТСЛ

МТСЛ
Имена
	Предпочтительное название ИЮПАК {2,2,5,5-Тетраметил-3-[(2-метил-2,2-диоксо-2λ 6 -дисульфан-1-ил)метил]-2,5-дигидро-1Н - пиррол-1-ил}оксил
	Другие имена МТСЛ
Идентификаторы
Номер CAS	81213-52-7 ;
3D model ( JSmol )	Интерактивное изображение ;
ХимическийПаук	117873 ;
ПабХим CID	133628 ;
Панель управления CompTox ( EPA )	DTXSID80230944 ;
	показывать ИнЧИ
	показывать УЛЫБКИ
Характеристики
Химическая формула	С 10 Н 18 Н О 3 С 2
Молярная масса	264.38 g·mol −1
	Если не указано иное, данные приведены для материалов в стандартном состоянии (при 25 °C [77 °F], 100 кПа). проверить ( что такое ?) Ссылки на инфобоксы

MTSL ( S- (1-оксил-2,2,5,5-тетраметил-2,5-дигидро-1H-пиррол-3-ил)метилметансульфонотиоат) представляет собой сероорганическое соединение , которое используется в качестве нитроксидной спиновой метки . ^[1] MTSL является бифункциональным нитроксила и тиосульфонатного эфира и состоит из функциональных групп . Метка нитроксида стерически защищена, поэтому она относительно нереактивна.

Маркировка

MTSL присоединяется к белкам путем реакции с тиоловыми группами. В реакции используется стандартная реакционная способность эфиров тиосульфата. Метансульфинат (CH ₃ SO ₂⁻) — уходящая группа:

RSO ₂ S- нитроксид + белок -SH → белок -SS- нитроксид + RSO ₂ H

Гетеродисульфидная является связь с остатком цистеина прочной, что позволяет осуществлять сайт-направленное спиновое мечение. ^[2]^[3] Фрагмент MTSL добавит 184,3 дальтон к массе белка или пептида , к которому он присоединен. Цистеин можно ввести с помощью сайт-направленного мутагенеза , и, следовательно, можно пометить большинство положений белка.

Спектроскопия

В ядерном магнитном резонансе введение парамагнитной группы увеличивает скорость релаксации близлежащих ядер . ^[1] Его присутствие можно обнаружить по уширению пиков и потере интенсивности пиков, соответствующих близлежащим ядрам. Следовательно, можно сделать вывод о близости для всех затронутых ядер. Основным преимуществом этого метода по сравнению с традиционными методами получения ограничений расстояния в ЯМР белков является увеличенная длина, поскольку усиление парамагнитной релаксации позволяет обнаруживать расстояния до 25 Å (2,5 нм ) по сравнению с примерно 6 Å (0,6 нм) при использовании ядерного Оверхаузера. эффект . Спиновое мечение с помощью MTSL часто используется при исследовании остаточной структуры внутренне неструктурированных белков .

Ссылки

^ Перейти обратно: ^а ^б Кристиан Альтенбах, Кёнг-Джун О, Рене Дж. Трабанино, Кальман Хидег, Уэйн Л. Хаббелл «Оценка расстояний между остатками в белках, меченных спином, при физиологических температурах: экспериментальные стратегии и практические ограничения» Биохимия, 2001, том 40, стр. 15471 –15482. два : 10.1021/bi011544w
^ Кеньон, Г.Л. и Брюс, Т.В. (1977). Новые сульфгидрильные реагенты. Методы энзимологии 47, 407–430. дои : 10.1016/0076-6879(77)47042-3
^ Берлинер, Л.Дж., Грюнвальд, Дж., Ханковски, Х.О., Хидег, К. (1982). Новая обратимая тиол-специфическая спин-метка: мечение активного центра папаина и ингибирование. Аналитическая биохимия 119, 450–455. дои : 10.1016/0003-2697(82)90612-1

[Altenbach-1] Перейти обратно: ^а ^б Кристиан Альтенбах, Кёнг-Джун О, Рене Дж. Трабанино, Кальман Хидег, Уэйн Л. Хаббелл «Оценка расстояний между остатками в белках, меченных спином, при физиологических температурах: экспериментальные стратегии и практические ограничения» Биохимия, 2001, том 40, стр. 15471 –15482. два : 10.1021/bi011544w

[2] Кеньон, Г.Л. и Брюс, Т.В. (1977). Новые сульфгидрильные реагенты. Методы энзимологии 47, 407–430. дои : 10.1016/0076-6879(77)47042-3

[3] Берлинер, Л.Дж., Грюнвальд, Дж., Ханковски, Х.О., Хидег, К. (1982). Новая обратимая тиол-специфическая спин-метка: мечение активного центра папаина и ингибирование. Аналитическая биохимия 119, 450–455. дои : 10.1016/0003-2697(82)90612-1

[1]

[2]

[3]