Псевдотипирование
Псевдотипирование — это процесс производства вирусов или вирусных векторов в сочетании с чужеродными белками вирусной оболочки . В результате получается псевдотипированная вирусная частица, также называемая псевдовирусом . [1] С помощью этого метода чужеродные белки вирусной оболочки можно использовать для изменения тропизма хозяина или увеличения или уменьшения стабильности вирусных частиц. Псевдотипированные частицы не несут генетического материала для производства дополнительных белков вирусной оболочки, поэтому фенотипические изменения не могут быть переданы потомству вирусных частиц. В некоторых случаях неспособность производить белки вирусной оболочки делает репликацию псевдовируса некомпетентной . Таким образом, свойства опасных вирусов можно изучать в условиях меньшего риска. [2]
Псевдотипирование позволяет контролировать экспрессию белков оболочки. Часто используемым белком является гликопротеин G (VSV-G) вируса везикулярного стоматита (VSV), который опосредует проникновение через рецептор ЛПНП . Белки оболочки, включенные в псевдовирус, позволяют вирусу легко проникать в различные типы клеток с соответствующим рецептором хозяина .
Разработка вакцины
[ редактировать ]Псевдотипированный вирус можно использовать для вакцинации животных против белков, экспрессируемых на оболочке вириона. [3] Этот подход использовался для производства вакцин-кандидатов против ВИЧ . [3] Нипах-хенипавирус , [2] лиссавирус бешенства , [4] ОРВИ-КоВ , [5] Заирский эболавирус , [6] и SARS-CoV-2 . [7] Рекомбинантный вирус везикулярного стоматита – заирский вирус Эбола (rVSV-ZEBOV) был создан Агентством общественного здравоохранения Канады (PHAC) и в настоящее время лицензирован в Европейском Союзе и США для профилактики заболевания, вызванного вирусом Эбола (БВВЭ), вызываемого заирским эболавирусом .
Серологическое тестирование
[ редактировать ]Псевдотипированные вирусы, особенно псевдотипированные вирусы, несущие ген рекомбинантной люциферазы (rLuc), можно использовать для проверки того, может ли лечение защитить от инфекции клеток-хозяев. [8] Например, кровь берут у животного с серологическим иммунитетом к вирусу. Отдельный псевдовирус создается с помощью белка оболочки вируса, к которому животное имеет иммунитет. Псевдовирус дополнительно модифицирован так, чтобы содержать ген люциферазы. Когда кровь, взятая у животного, смешивается с псевдовирусом, защитные антитела связываются и нейтрализуют введенный белок оболочки. В клеточной культуре нейтрализованные псевдовирусы не смогут инфицировать клетки и производить продукт люминесцентного репортерного гена. При анализе образцы клеточных культур, в которых присутствует эффективный ингибитор вируса, будут иметь пониженную люминесценцию. [4]
Ссылки
[ редактировать ]- ^ Пример разработки псевдотипических ретровирусных векторов в рабочей группе MHH. Архивировано 8 ноября 2009 г. в Wayback Machine.
- ^ Jump up to: а б Не, Цзяньхуэй; Лю, Лин; Ван, Цин; Чен, Жуйфэн; Нин, Тинтинг; Лю, Цян; Хуан, Вэйджин; Ван, Ючун (19 февраля 2019 г.). «Псевдовирусная система Nipah позволяет оценивать вакцины in vitro и in vivo с использованием средств, не соответствующих BSL-4» . Новые микробы и инфекции . 8 (1): 272–281. дои : 10.1080/22221751.2019.1571871 . ISSN 2222-1751 . ПМК 6455126 . ПМИД 30866781 .
- ^ Jump up to: а б Расин, Трина; Кобингер, Гэри П .; Артс, Эрик Дж. (12 сентября 2017 г.). «Разработка вакцины против ВИЧ с использованием вектора вируса везикулярного стоматита, экспрессирующего дизайнерские гликопротеины оболочки ВИЧ-1 для усиления гуморальных реакций» . Исследования и терапия СПИДа . 14 (1): 55. дои : 10.1186/s12981-017-0179-2 . ISSN 1742-6405 . ПМЦ 5594459 . ПМИД 28893277 .
- ^ Jump up to: а б Мёшлер, Сара; Лохер, Самира; Конзельманн, Карл-Клаус; Кремер, Беате; Циммер, Герт (16 сентября 2016 г.). «Количественное определение лиссавирус-нейтрализующих антител с использованием частиц псевдотипа вируса везикулярного стоматита» . Вирусы . 8 (9): 254. дои : 10.3390/v8090254 . ISSN 1999-4915 . ПМК 5035968 . ПМИД 27649230 .
- ^ Кападия, Сагар У.; Саймон, Ян Д.; Роуз, Джон К. (20 июня 2008 г.). «Вакцина против атипичной пневмонии, основанная на дефектном по репликации рекомбинантном вирусе везикулярного стоматита, более эффективна, чем вакцина, основанная на репликационно-компетентном векторе» . Вирусология . 376 (1): 165–172. дои : 10.1016/j.virol.2008.03.002 . ISSN 0042-6822 . ПМК 7103385 . ПМИД 18396306 .
- ^ Салата, Криштиану; Калистри, Арианна; Альвиси, Гуальтьеро; Селестино, Микеле; Паролин, Кристина; Палу, Джорджио (19 марта 2019 г.). «Вход вируса Эбола: от молекулярной характеристики к открытию лекарств» . Вирусы . 11 (3): 274. дои : 10.3390/v11030274 . ISSN 1999-4915 . ПМК 6466262 . ПМИД 30893774 .
- ^ Джонсон, Марк С.; Лиддон, Терри Д.; Суарес, Рейньер; Сальседо, Брэкстон; ЛеПик, Мэри; Грэм, Мэдди; Рикана, Клифтон; Робинсон, Кэролайн; Риттер, Детлеф Г. (14 октября 2020 г.). «Оптимизированные условия псевдотипирования спайкового гликопротеина SARS-COV-2» . Журнал вирусологии . 94 (21). дои : 10.1128/JVI.01062-20 . ISSN 0022-538X . ПМЦ 7565639 . ПМИД 32788194 .
- ^ Карнелл, Джордж Уильям; Феррара, Франческа; Грехан, Кейт; Томпсон, Крейг Питер; Темпертон, Найджел Джеймс (29 апреля 2015 г.). «Анализ нейтрализации гриппа на основе псевдотипов: систематический анализ» . Границы в иммунологии . 6 : 161. дои : 10.3389/fimmu.2015.00161 . ISSN 1664-3224 . ПМЦ 4413832 . ПМИД 25972865 .