Тест ниацина

Тест ниацина широко используется с 1960 -х годов для выявления микобактерий на уровне видов в клинической лаборатории . ^{[ 1 ]} Тест ниацина обнаруживает ниацин ( никотиновая кислота ) в водных экстрактах культуры. М. Туберкулез штаммы, которые испытывают отрицательные для теста на ниацин, очень редки. ^{[ 2 ]} Окислительно -восстановительные реакции, происходящие у видов микобактерии, вырабатывают ниацин как часть энергетического метаболизма . Несмотря на то, что все микобактерии продуцируют ниацин, M. tuberculosis накапливает избыток ниацина из -за его неспособности обрабатывать ниацин, выделяя избыток ниацина в культуральную среду, что позволяет обнаружить его с использованием теста ниацина. ^{[ 3 ]} Тест ниацина, как правило, проводится только на медленно растущих гранулированных, коричневых цветных колониях, так как это морфологии характеристики M. tuberculosis на агаровой пластине . ^{[ 4 ]} Из-за его доступности по сравнению с дорогими методами идентификации, такими как пиросеквенирование или Maldi-Tof MS , которые требуют дорогих машин и реагентов . ^{[ 5 ]}

Биохимические процессы

Биохимический путь

Путь деградации никотинамида аднуклеотида (NAD+) у M. tuberculosis имеет блокаду, которая утихивает путь, приводящий к избытке ниацина, который не может быть обработан организмом. ^{[ 3 ]} Из -за этого изобилия M. tuberculosis вместе с Mycobacterium canettii и различными типами микобактерий Africanum выпускают избыток ниацина в их внешнюю среду, в данном случае, агарную пластину или другую среду. Ниацин растворим в воде, поэтому культуральная среда можно проверить на наличие ниацина, чтобы определить, является ли изолят микобактерии одним из трех упомянутых видов. ^{[ 3 ]} Эти три вида являются членами комплекса Mycobacterium Tuberculosis .

Процесс испытательной полосы

Испытательная полоса ниацина обычно состоит из тиоцианата калия , хлорам-T , лимонной кислоты и 4-аминососалициловой кислоты . ^{[ 5 ]} В присутствии лимонной кислоты хлорамин-T и тиоцианат калия будут реагировать на образование хлорида цианогена . Это химическое вещество разбивает пиридиновое кольцо ниацина с образованием Y-карбоксиякового альдегида и соединяет ароматический амин с образованием желтого цвета. ^{[ 1 ]}

Процедура тестирования

Тестская полоса ниацина похожа по внешнему виду с тестовой полосой pH . Он маленький, тонкий, прямоугольный и белый цвет. Вода помещается на культуральную пластину и касается испытательной полосой в течение 15–20 минут внутри небольшой стерильной трубки. Если обнаружены избыточные количества ниацина, жидкость внутри трубки станет желтой, положительный тест. Если жидкость в трубке ясна, нет избыточных количеств ниацина, а тест отрицательный. ^{[ 6 ]} Положительный тест ниацина не обязательно указывает на наличие M. tuberculosis , поскольку другие виды Mycobacterium могут проверить положительный результат на избыток ниацина. ^{[ 6 ]}

Наряду с каждой партией испытанных образцов, будет включен положительный контроль M. tuberculosis и отрицательный контроль без организма. Если положительный контроль проверяет отрицательные, вероятно, была ошибка с партией, а также для отрицательного теста, показывающего положительный. ^{[ 5 ]}

Поскольку образцы лабораторий, которые определяются как кислотные бацилла, возможно, являются M. tuberculosis , организм на уровне биобезопасности , все тесты на ниацин должны проводиться в шкафу биобезопасности с полным платьем, респиратором, перчатками и запечатанными лабораторией, чтобы обеспечить безопасность. лабораторного техника, выполняющего тест. Все тесты также должны проводиться с помощью стерильной техники . ^{[ 2 ]}

Ссылки

^ Jump up to: ^а ^{беременный} Янг, WD; Масланский, Элвин; Лефар, Лефар; Крониш, Дональд (декабрь 1970 г.). «Разработка теста бумажной полосы для обнаружения ниацина, полученного микобактериями» . Прикладная микробиология . 20 (6): 939–945. PMC 377087 . PMID 4321713 .
^ Jump up to: ^а ^{беременный} «Стандартная рабочая процедура (SOP): тест ниацина» . stoptb.org . Получено 4 ноября 2016 года .
^ Jump up to: ^а ^{беременный} ^в Паломино, Хуан; Лев, Сильвия; Ritacco, Viviana, eds. (Июнь 2007 г.). Tuberculosis 2007 (PDF) . Архивировано (PDF) из оригинала 25 июня 2016 года . Получено 2 ноября 2016 года .
^ Ачарья, Танкшвар (22 июля 2013 г.). «Ключевые биохимические методы, используемые для различения микобактериальной группы» . Микробенлайн. Архивировано с оригинала 4 ноября 2016 года . Получено 4 ноября 2016 года .
^ Jump up to: ^а ^{беременный} ^в Гадре; Махаджан; Сингх; Агарвал; Talwar (1995). «Тест ниацина для микобактерий: сравнительное исследование двух методов» (PDF) . Индийский журнал туберкулеза . 42 : 225–226. Архивировано (PDF) из оригинала 4 ноября 2016 года . Получено 4 ноября 2016 года .
^ Jump up to: ^а ^{беременный} «Ниациновый реагент полоса» (PDF) . 1 сентября 2005 года. Архивировал (PDF) с оригинала 2 ноября 2016 года . Получено 2 ноября 2016 года .

[young-1] Jump up to: ^а ^{беременный} Янг, WD; Масланский, Элвин; Лефар, Лефар; Крониш, Дональд (декабрь 1970 г.). «Разработка теста бумажной полосы для обнаружения ниацина, полученного микобактериями» . Прикладная микробиология . 20 (6): 939–945. PMC 377087 . PMID 4321713 .

[:1-2] Jump up to: ^а ^{беременный} «Стандартная рабочая процедура (SOP): тест ниацина» . stoptb.org . Получено 4 ноября 2016 года .

[palomino-3] Jump up to: ^а ^{беременный} ^в Паломино, Хуан; Лев, Сильвия; Ritacco, Viviana, eds. (Июнь 2007 г.). Tuberculosis 2007 (PDF) . Архивировано (PDF) из оригинала 25 июня 2016 года . Получено 2 ноября 2016 года .

[4] Ачарья, Танкшвар (22 июля 2013 г.). «Ключевые биохимические методы, используемые для различения микобактериальной группы» . Микробенлайн. Архивировано с оригинала 4 ноября 2016 года . Получено 4 ноября 2016 года .

[:0-5] Jump up to: ^а ^{беременный} ^в Гадре; Махаджан; Сингх; Агарвал; Talwar (1995). «Тест ниацина для микобактерий: сравнительное исследование двух методов» (PDF) . Индийский журнал туберкулеза . 42 : 225–226. Архивировано (PDF) из оригинала 4 ноября 2016 года . Получено 4 ноября 2016 года .

[remel-6] Jump up to: ^а ^{беременный} «Ниациновый реагент полоса» (PDF) . 1 сентября 2005 года. Архивировал (PDF) с оригинала 2 ноября 2016 года . Получено 2 ноября 2016 года .

[ 1 ]

[ 2 ]

[ 3 ]

[ 4 ]

[ 5 ]

[ 6 ]